| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| ·蟾蜍药用价值概述 | 第11-14页 |
| ·蟾酥、蟾皮和蟾衣在肿瘤治疗中的研究进展 | 第12-13页 |
| ·蟾蜍抗菌肽的研究进展 | 第13-14页 |
| ·转胶蛋白-2 | 第14-19页 |
| ·SM22/trangelins | 第14页 |
| ·CH 结构域 | 第14-15页 |
| ·TAGLN2/SM22 与细胞骨架 | 第15-17页 |
| ·TAGLN1-2 与肿瘤 | 第17-19页 |
| 第二章 日本蟾蜍 TAGLN2 partial cDNA 的克隆 | 第19-28页 |
| ·实验材料 | 第19-21页 |
| ·主要材料 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·主要实验仪器(表 2.1) | 第20页 |
| ·主要溶液的配制 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-22页 |
| ·日本蟾蜍皮肤 cDNA 质粒文库转化 | 第21页 |
| ·阳性菌落筛选 | 第21页 |
| ·质粒回收、DNA 测序 | 第21页 |
| ·生物信息学分析 | 第21-22页 |
| ·实验结果 | 第22-25页 |
| ·cDNA 的筛选 | 第22页 |
| ·TAGLN2 cDNA 测序结果及其编码蛋白的理化性质 | 第22-23页 |
| ·TAGLN2 的二级结构、磷酸化位点及亚细胞定位预测 | 第23-24页 |
| ·TAGLN2 结构域分析 | 第24-25页 |
| ·不同动物 TAGLN2 氨基酸序列同源性分析 | 第25页 |
| ·讨论 | 第25-28页 |
| 第三章 日本蟾蜍 TAGLN2 全长 cDNA 的克隆 | 第28-37页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·主要材料 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·主要实验仪器 | 第28页 |
| ·主要溶液的配制 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-30页 |
| ·引物设计 | 第29页 |
| ·日本蟾蜍皮肤 TAGLN25′-UTR 和 3′-UTR 克隆 | 第29-30页 |
| ·日本蟾蜍皮肤 TAGLN2 cDNA 克隆、序列及生物信息学分析 | 第30页 |
| ·实验结果 | 第30-36页 |
| ·日本蟾蜍 TAGLN2 cDNA 的克隆 | 第30-31页 |
| ·日本蟾蜍 TAGLN2 cDNA 及其编码蛋白的生物信息学分析 | 第31-32页 |
| ·TAGLN2 cDNA 多态性分析 | 第32-33页 |
| ·日本蟾蜍 TAGLN2 磷酸化位点和二级结构预测 | 第33-35页 |
| ·日本蟾蜍全长 TAGLN2 结构域分析 | 第35页 |
| ·不同动物 TAGLN2 氨基酸序列同源性分析 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 中华大蟾蜍 TAGLN2 cDNA 的克隆与及其组织分布 | 第37-43页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·主要材料 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要实验仪器 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-39页 |
| ·中华大蟾蜍各器官总 RNA 的纯化及其第一链 cDNA 的合成 | 第37-38页 |
| ·总 RNA 质量检测 | 第38页 |
| ·反转录反应 | 第38页 |
| ·引物设计 | 第38-39页 |
| ·中华大蟾蜍 TAGNL2 的克隆 | 第39页 |
| ·中华大蟾蜍 TAGLN2 组织分布检测 | 第39页 |
| ·实验结果 | 第39-42页 |
| ·中华大蟾蜍 TAGLN2 cDNA 的克隆 | 第39页 |
| ·中华大蟾蜍 TAGLN2 cDNA 及其编码蛋白的理化性质 | 第39-40页 |
| ·中华大蟾蜍 TAGLN2 磷酸化位点、二级结构及功能结构域分析 | 第40页 |
| ·不同动物 TAGLN2 氨基酸序列同源性分析 | 第40-42页 |
| ·中华大蟾蜍 TAGLN2 的组织分布检测 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42页 |
| ·结论 | 第42-43页 |
| 第五章 日本蟾蜍 TAGLN2 原核表达及其抗血清的制备 | 第43-54页 |
| ·实验材料 | 第43-45页 |
| ·实验动物和实验材料 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43-44页 |
| ·主要实验仪器 | 第44页 |
| ·主要溶液的配制 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-48页 |
| ·引物设计 | 第45页 |
| ·日本蟾蜍皮肤 TAGLN2 的点突变和原核表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第46页 |
| ·重组蛋白的可溶性检测 | 第46-47页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第47页 |
| ·Western blotting 检测重组蛋白 | 第47页 |
| ·鼠抗蟾蜍 TAGLN2 抗血清制备 | 第47-48页 |
| ·间接 ELISA 检测抗体的效价 | 第48页 |
| ·Western blotting 检测抗血清 | 第48页 |
| ·实验结果 | 第48-53页 |
| ·重组蛋白诱导表达最优条件 | 第48-49页 |
| ·重组蛋白诱导可溶性检测和免疫印迹 | 第49-50页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第50-51页 |
| ·鼠抗蟾蜍 TAGLN2 抗血清效价的 ELISA 检测结果 | 第51页 |
| ·Western blotting 检测重组蛋白 | 第51-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| 第六章 小结与展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 个人简介 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
