Holliday交叉解旋酶hGEN1功能的初步研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-23页 |
| ·DNA损伤及修复 | 第10-14页 |
| ·DNA损伤的类型 | 第10-11页 |
| ·DNA修复的类型 | 第11-14页 |
| ·Holliday交叉结构及解旋酶 | 第14-16页 |
| ·Holliday交叉结构 | 第14页 |
| ·Holliday交叉解旋酶 | 第14-16页 |
| ·中心体 | 第16-21页 |
| ·中心体的结构 | 第16-17页 |
| ·中心体的复制 | 第17-19页 |
| ·中心体与细胞分裂 | 第19页 |
| ·中心体与细胞周期 | 第19-20页 |
| ·中心体与肿瘤发生的关联 | 第20-21页 |
| ·GEN1研究进展 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-29页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-29页 |
| ·感受态大肠杆菌的制备 | 第24-25页 |
| ·RNA提取及逆转录PCR | 第25-26页 |
| ·表达载体的构建 | 第26页 |
| ·蛋白质体外表达与纯化 | 第26页 |
| ·细胞培养 | 第26-27页 |
| ·细胞的转染 | 第27页 |
| ·Western blot | 第27页 |
| ·考马斯亮蓝染色 | 第27-28页 |
| ·免疫荧光 | 第28页 |
| ·细胞的BrdU标记及细胞周期分析 | 第28页 |
| ·siRNA转染方法 | 第28-29页 |
| 第三章 结果 | 第29-42页 |
| ·hGEN1抗体制备 | 第29-33页 |
| ·hGEN1基因的扩增 | 第29页 |
| ·hGEN1的GST融合蛋白的表达 | 第29-30页 |
| ·hGEN1抗体的纯化 | 第30-31页 |
| ·hGEN1-C抗体特异性验证 | 第31-32页 |
| ·hGEN1多肽抗体的制备 | 第32-33页 |
| ·内源hGEN1胞中定位 | 第33-35页 |
| ·内源hGEN1在胞中定位 | 第33页 |
| ·内源hGEN1中心体定位确认 | 第33-35页 |
| ·hGENl中心体定位片段 | 第35-37页 |
| ·hGEN1表达水平敲低对细胞的影响 | 第37-38页 |
| ·hGEN1与DNA复制的关系 | 第38-39页 |
| ·hGEN1的互作基因 | 第39-41页 |
| ·hGEN1互作网络分析 | 第39-40页 |
| ·hGEN1互作蛋白基因的克隆 | 第40-41页 |
| ·XN系统的构建 | 第41-42页 |
| 第四章 讨论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
