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MiR-183/96/182簇调控胶质瘤细胞中ROS诱导的细胞凋亡及其对化疗敏感性的影响

中文摘要第1-9页
ABSTRACT第9-16页
主要缩略词简表第16-17页
第一章 前言第17-19页
技术路线第19-20页
第二章 材料与方法第20-30页
   ·细胞第20页
   ·组织样本第20页
   ·菌株第20页
   ·质粒载体第20页
   ·酶类第20页
   ·试剂盒第20-21页
   ·抗体第21页
   ·其它生化试剂第21页
   ·细胞培养用试剂第21页
   ·探针及引物第21-22页
   ·主要仪器第22页
   ·原位杂交检测miRNA的表达第22-23页
   ·原位杂交结果分析第23页
   ·培养细胞及组织的RNA制备第23-24页
     ·培养细胞总RNA的抽提第23-24页
     ·组织细胞总RNA的抽提第24页
     ·RNA中痕量DNA的消化第24页
   ·real-time PCR检测第24-25页
     ·miRNA检测第24-25页
     ·mRNA检测第25页
   ·细胞蛋白抽提第25-26页
     ·细胞总蛋白的抽提第25页
     ·线粒体/胞浆蛋白抽提第25-26页
     ·BCA测蛋白浓度第26页
   ·Western blot检测第26页
   ·miRNA和si-RNA转染目的细胞第26-27页
   ·MTT第27页
   ·Hoechst检测细胞凋亡第27页
   ·流式细胞分析细胞凋亡的变化第27页
   ·miRNA的靶基因验证第27-28页
   ·JC-1检测MMP(△Ψm)第28页
   ·H_2DCFDA检测胞内ROS生成第28-29页
   ·统计分析第29-30页
第三章 结果第30-43页
 1. miR-183/96/182簇在胶质瘤组织中高表达第30-32页
 2. miR-183/96/182簇促进胶质瘤细胞的增殖并抑制FGF9、CPEB1和FOXO1的表达第32-35页
 3. miR-183/96/182簇调节细胞凋亡和线粒体跨膜电位(MMP,△Ψm)第35-37页
 4. miR-183/96/182簇对胶质瘤细胞内ROS生成的影响第37-40页
 5. miR-183/96/182簇调控AKT/P53/凋亡信号通路第40-41页
 6. miR-183/96/182簇沉默可以增加胶质瘤细胞对化疗的敏感性第41-43页
第四章 讨论第43-46页
结论第46-47页
参考文献第47-53页
综述第53-58页
 参考文献第56-58页
致谢第58-59页
攻读硕士学位期间主要研究成果第59-60页
个人简历第60页

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