中文摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-16页 |
主要缩略词简表 | 第16-17页 |
第一章 前言 | 第17-19页 |
技术路线 | 第19-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-30页 |
·细胞 | 第20页 |
·组织样本 | 第20页 |
·菌株 | 第20页 |
·质粒载体 | 第20页 |
·酶类 | 第20页 |
·试剂盒 | 第20-21页 |
·抗体 | 第21页 |
·其它生化试剂 | 第21页 |
·细胞培养用试剂 | 第21页 |
·探针及引物 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·原位杂交检测miRNA的表达 | 第22-23页 |
·原位杂交结果分析 | 第23页 |
·培养细胞及组织的RNA制备 | 第23-24页 |
·培养细胞总RNA的抽提 | 第23-24页 |
·组织细胞总RNA的抽提 | 第24页 |
·RNA中痕量DNA的消化 | 第24页 |
·real-time PCR检测 | 第24-25页 |
·miRNA检测 | 第24-25页 |
·mRNA检测 | 第25页 |
·细胞蛋白抽提 | 第25-26页 |
·细胞总蛋白的抽提 | 第25页 |
·线粒体/胞浆蛋白抽提 | 第25-26页 |
·BCA测蛋白浓度 | 第26页 |
·Western blot检测 | 第26页 |
·miRNA和si-RNA转染目的细胞 | 第26-27页 |
·MTT | 第27页 |
·Hoechst检测细胞凋亡 | 第27页 |
·流式细胞分析细胞凋亡的变化 | 第27页 |
·miRNA的靶基因验证 | 第27-28页 |
·JC-1检测MMP(△Ψm) | 第28页 |
·H_2DCFDA检测胞内ROS生成 | 第28-29页 |
·统计分析 | 第29-30页 |
第三章 结果 | 第30-43页 |
1. miR-183/96/182簇在胶质瘤组织中高表达 | 第30-32页 |
2. miR-183/96/182簇促进胶质瘤细胞的增殖并抑制FGF9、CPEB1和FOXO1的表达 | 第32-35页 |
3. miR-183/96/182簇调节细胞凋亡和线粒体跨膜电位(MMP,△Ψm) | 第35-37页 |
4. miR-183/96/182簇对胶质瘤细胞内ROS生成的影响 | 第37-40页 |
5. miR-183/96/182簇调控AKT/P53/凋亡信号通路 | 第40-41页 |
6. miR-183/96/182簇沉默可以增加胶质瘤细胞对化疗的敏感性 | 第41-43页 |
第四章 讨论 | 第43-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
综述 | 第53-58页 |
参考文献 | 第56-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
攻读硕士学位期间主要研究成果 | 第59-60页 |
个人简历 | 第60页 |