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三个地方品种鸡肌肉组织基因组DNA甲基化分析

中文摘要第1-7页
Abstract第7-13页
中英文对照表第13-14页
引言第14-16页
第一篇 文献综述第16-32页
 1 DNA 甲基化和去甲基化的分子机制第16-18页
   ·DNA 甲基化的分子机制第16-17页
   ·DNA 去甲基化的分子机制第17-18页
 2 DNA 甲基化转移酶的分类第18-20页
   ·维持DNA 甲基化转移酶第18-19页
   ·甲基化转移酶2(DNMT2)第19页
   ·从头甲基化酶第19页
   ·CMT第19-20页
 3 DNA 甲基化的检测方法第20-26页
   ·基因组整体水平的甲基化检测第20-22页
   ·特异性位点的DNA 甲基化的检测第22-26页
   ·甲基化新位点的寻找第26页
 4 DNA 甲基化的生物学作用第26-29页
   ·DNA 甲基化对基因表达的影响第27页
   ·DNA 甲基化与细胞分化第27页
   ·DNA 甲基化与胚胎发育调节第27-28页
   ·X 染色体失活第28页
   ·基因印记第28页
   ·肿瘤发生第28-29页
 5 影响 DNA 甲基化因素第29-30页
   ·DNA 甲基转移酶第29页
   ·组蛋白甲基化第29页
   ·RNA 干扰第29页
   ·药物第29-30页
   ·环境因素第30页
 6 展望第30-32页
第二篇 研究内容第32-82页
 第一章 F-MSAP方法的建立及汶上芦花鸡不同组织甲基化检测第32-46页
  1 试验材料第32-33页
   ·试验动物样品采集第32页
   ·主要试剂的配制第32-33页
  2 方法第33-37页
   ·不同组织基因组DNA 提取第33-34页
   ·酶切第34-35页
   ·酶切产物与接头引物连接第35页
   ·预扩增第35-36页
   ·选择性扩增第36-37页
   ·选择性扩增DNA 甲基化多态性的检测第37页
  3 结果第37-44页
   ·不同组织基因组DNA 提取结果第37页
   ·不同组织基因组DNA 酶切结果第37-38页
   ·预扩增结果第38-39页
   ·选择性扩增结果第39页
   ·F-MSAP 结果第39-40页
   ·数据输出结果第40-41页
   ·各个组织基因组DNA 甲基化水平分析结果第41-44页
  4 讨论第44页
  5 小结第44-46页
 第二章 DNA 甲基化与肉质性状相关性分析第46-72页
  1 材料第46-48页
   ·样品的采集第46页
   ·主要试剂的配制第46-48页
  2 方法第48-54页
   ·基因组DNA 的提取、酶切、连接、预扩增、选择性扩增第48页
   ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第48页
   ·变性聚丙烯酰胺凝胶银染程序第48-49页
   ·特异性甲基化片段的回收第49页
   ·特异性甲基化片段的二次PCR第49页
   ·二次PCR 产物的回收第49-50页
   ·特异性甲基化片段的克隆测序第50页
   ·特异性甲基化片段southern blot 检测第50-53页
   ·数据统计分析第53-54页
  3 结果第54-68页
   ·肉质性状测定结果第54页
   ·不同品种胸肌基因组DNA 提取结果第54-55页
   ·不同品种胸肌基因组DNA 酶切结果第55页
   ·预扩增结果第55-56页
   ·选择性扩增结果第56页
   ·F-MSAP 结果第56-57页
   ·数据输出及统计分析结果第57-60页
   ·汶上芦花鸡、仙居三黄鸡和淮北麻鸡肌肉组织基因组DNA 甲基化差异分析结果第60-61页
   ·不同个体胸肌组织部分特异性甲基化片段变性聚丙烯酰胺凝胶结果第61-62页
   ·特异性甲基化片段的二次PCR 及测序结果第62页
   ·探针制备结果第62-63页
   ·特异性甲基化片段的Southern 杂交验证第63页
   ·三个品种不同个体间特异性甲基化片段的序列分析结果第63-67页
   ·甲基化水平与肉质性状的相关性分析第67-68页
  4 讨论第68-70页
  5 小结第70-72页
 第三章 甲基化差异基因FABP4mRNA 表达水平与肉质性状相关性分析第72-80页
  1 材料第72页
  2 方法第72-74页
   ·组织样品总RNA 的提取第72页
   ·cDNA 合成第72-73页
   ·荧光定量PCR第73-74页
   ·数据统计分析第74页
  3 结果第74-77页
   ·胸肌组织总RNA 提取结果第74页
   ·PCR 扩增结果第74-75页
   ·目的片段和看家基因融解曲线和扩增曲线第75-76页
   ·荧光定量结果第76-77页
   ·FABP4 mRNA 表达水平与肉质性状的相关性分析第77页
  4 讨论第77-78页
  5 小结第78-80页
 结论第80-82页
参考文献第82-94页
附录第94-105页
导师简介第105-106页
作者简介第106-107页
攻读学位期间发表的学术论文及科研成果第107-109页
致谢第109页

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