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水稻育性突变体的筛选和育性相关基因OsMSH4及PSS1的克隆与功能研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-13页
第一章 文献综述第13-33页
   ·水稻的花粉发育第13-15页
   ·水稻胚囊发育第15-17页
   ·植物减数分裂第17-28页
   ·驱动蛋白第28-31页
   ·本研究的目的与意义第31-33页
第二章 育性突变体的筛选第33-39页
 1 材料与方法第33-34页
   ·实验材料筛选第33-34页
   ·田间种植第34页
   ·育性调查第34页
   ·水稻形态观察第34页
 2 结果第34-37页
   ·突变体育性考察第34-35页
   ·材料的遗传分析第35页
   ·三个花器官发育突变体与叶色突变体第35-37页
   ·M3的定位第37页
 3 讨论第37-39页
   ·T-DNA插入突变体库与水稻功能基因研究第37-38页
   ·有关水稻的雄性不育突变体第38-39页
第三章 水稻三体雌雄不育突变体Q6537M的图位克隆与功能分析第39-59页
 1 材料与方法第39-43页
   ·材料的来源第39页
   ·田间种植第39页
   ·育性调查及表型鉴定第39-40页
   ·DNA提取第40页
   ·INDEL标记开发第40页
   ·RNA提取及cDNA合成第40-41页
   ·分子标记检测第41页
   ·目标基因预测与序列测定第41页
   ·农杆菌介导的水稻遗传转化第41-42页
   ·Q6537M减数分裂染色体观察第42页
   ·Tos17标签与NE4534,NG0561和NE4536突变体表型的共分离验证第42页
   ·生物信息学分析第42-43页
 2 结果与分析第43-56页
   ·三体植株可以遗传并保存完全不育突变体第43-45页
   ·得到野生型并观察了Q6537M的雄配子的减数分裂第45-47页
   ·细胞观察比较了Q6537WT与Q6537M的胚囊第47-48页
   ·Q6537M不育突变体中突变基因的图位克隆第48-51页
   ·OsMSH4基因的Tos17插入突变体与Q6537M一样表现出完全不育第51-52页
   ·OsMSH4全长cDNA的克隆和功能分析第52-54页
   ·OsMSH4全基因组和全长cDNA的互补验证第54-55页
   ·OsMSH4基因的表达第55页
   ·OsMSH4基因的改变对减数分裂上下游基因没有影响第55-56页
   ·OsMSH4在减数分裂不同时期的亚细胞定位第56页
 3 讨论第56-59页
   ·利用额外的三体染色体进行水稻基因的染色体定位第56-57页
   ·三体水稻更利于隐性突变基因的保存第57页
   ·三体后代可以分离得到高比例的隐性纯合突变体第57-59页
第四章 半不育基因PSS1的功能研究与互作基因第59-73页
 1 材料与方法第59-62页
   ·植物材料分离第59-60页
   ·田间种植第60页
   ·PSS1干扰载体的构建第60页
   ·PSS1干扰植株的定量PCR第60页
   ·PSS1原生质体的亚细胞定位第60-61页
   ·PSS1干扰株减数分裂染色体观察第61页
   ·免疫荧光观察pss1减数分裂纺锤体第61页
   ·利用酵母双杂交筛选PSS1互作基因第61-62页
 2 结果与分析第62-69页
   ·干扰植株PCR的检测及表型分析第62-64页
   ·PSS1原生质体的亚细胞定位第64-65页
   ·W207-2雄配子减数分裂各时期纺锤体的免疫荧光观察第65-67页
   ·利用酵母双杂交筛选PSS1互作基因第67-69页
 3 讨论第69-73页
   ·互作基因TPX2参与PSS1在纺锤体上的定位第69页
   ·PSS1可能参与水稻减数分裂的染色体交换第69-70页
   ·PSS1对Glutamine synthetase的运输过程受阻影响配子发育第70-71页
   ·PSS1对Glutamine synthetase的运输过程受阻导致水稻生物量增加第71-73页
第五章 全文结论与创新第73-75页
 全文结论与讨论第73-74页
 本文的创新之处第74-75页
参考文献第75-87页
附录第87-93页
在读期间发表的论文第93-95页
致谢第95页

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