| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-36页 |
| ·选题的背景与意义 | 第12-15页 |
| ·蛋白激酶（Protein kinase）概述 | 第15-27页 |
| ·蛋白磷酸化修饰 | 第15页 |
| ·蛋白激酶的重要性 | 第15-17页 |
| ·蛋白激酶的分类 | 第17-18页 |
| ·蛋白激酶的活性分析 | 第18-27页 |
| ·己糖激酶（Hexokinase）概述 | 第27-29页 |
| ·生物传感器 | 第29-35页 |
| ·基于荧光共轭聚合物的生物传感器研究进展 | 第29-32页 |
| ·基于功能化磁性微球的生物传感器研究进展 | 第32-34页 |
| ·基于便携式血糖仪的生物传感器研究进展 | 第34-35页 |
| ·论文主要研究内容 | 第35-36页 |
| 第2章 基于荧光共轭聚合物及金属离子介导的荧光共振能量转移高灵敏检测蛋白激酶活性 | 第36-51页 |
| ·引言 | 第36-37页 |
| ·实验部分 | 第37-40页 |
| ·仪器与试剂 | 第37-38页 |
| ·PKA 催化底物肽磷酸化 | 第38-39页 |
| ·荧光探针 PFPaa-Zr4+的制备 | 第39页 |
| ·PKA 活性分析 | 第39页 |
| ·荧光检测步骤 | 第39页 |
| ·PKA 抑制剂筛选 | 第39页 |
| ·AKT1 活性分析 | 第39-40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-50页 |
| ·实验原理 | 第40-42页 |
| ·体系中 Zr4+浓度的优化 | 第42-45页 |
| ·体系中 PFPaa 浓度的优化 | 第45页 |
| ·体系中 ATP 浓度的优化 | 第45-46页 |
| ·体系中 FITC-peptide 浓度的优化 | 第46-47页 |
| ·检测 PKA 活性的校准曲线及检出限 | 第47-48页 |
| ·PKA 抑制剂的筛选 | 第48-49页 |
| ·检测 AKT1 的活性 | 第49-50页 |
| ·结论 | 第50-51页 |
| 第3章 基于功能化磁性微球的蛋白激酶活性荧光分析 | 第51-70页 |
| ·引言 | 第51-52页 |
| ·实验部分 | 第52-56页 |
| ·仪器与试剂 | 第52-54页 |
| ·TiO2修饰磁性微球（TMSPs）的制备及表征 | 第54页 |
| ·细胞培养及细胞裂解液的制备 | 第54页 |
| ·PKA 催化磷酸化肽 | 第54-55页 |
| ·TMSFs 磁球选择性富集磷酸化肽 | 第55页 |
| ·荧光法检测 PKA 活性 | 第55页 |
| ·荧光成像法测定 PKA 活性 | 第55页 |
| ·PKA 抑制剂筛选 | 第55-56页 |
| ·荧光法检测 AKT1 活性 | 第56页 |
| ·同时测定 PKA 和 AKT1 两种蛋白激酶的活性 | 第56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-69页 |
| ·TiO2修饰磁性微球（TMSPs）的制备及表征 | 第56-58页 |
| ·实验原理 | 第58-59页 |
| ·考察 TMSPs 磁性微球分散溶剂乙腈（ACN）对磷酸化肽选择性富集的影响 | 第59-60页 |
| ·优化磷酸化肽从 TMSPs 磁球上的洗脱条件 | 第60-62页 |
| ·体系中 ATP 浓度的优化 | 第62页 |
| ·检测 PKA 活性的校准曲线及检出限 | 第62-66页 |
| ·PKA 抑制剂的筛选 | 第66-67页 |
| ·同时测定 PKA 和 AKT1 两种蛋白激酶的活性 | 第67-68页 |
| ·HeLa 细胞中 PKA 活性测定 | 第68-69页 |
| ·结论 | 第69-70页 |
| 第4章 基于便携式血糖仪测定已糖激酶的活性分析 | 第70-77页 |
| ·引言 | 第70-71页 |
| ·实验部分 | 第71-73页 |
| ·仪器设备 | 第71页 |
| ·主要试剂 | 第71-72页 |
| ·HK 催化磷酸化葡萄糖 | 第72页 |
| ·血糖仪测定 | 第72页 |
| ·HK 抑制剂筛选 | 第72-73页 |
| ·复杂体系中 HK 活性的测定 | 第73页 |
| ·结果与讨论 | 第73-76页 |
| ·实验原理 | 第73-74页 |
| ·HK 活性测定 | 第74页 |
| ·HK 抑制剂筛选试验 | 第74-75页 |
| ·复杂基体 HK 活性测定 | 第75-76页 |
| ·结论 | 第76-77页 |
| 结语 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果 | 第88页 |
