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疣孢菌的生物勘探、分离与鉴定

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-11页
第一章 前言第11-36页
   ·机遇与挑战第11-13页
     ·挑战第11-12页
     ·机遇第12-13页
   ·微生物的生物勘探第13-22页
     ·生物勘探的概念与应用第14页
     ·生物勘探应用于常规微生物资源研究第14-17页
     ·生物勘探应用于宏组学(meta-omics)技术第17-18页
     ·生物勘探的方法第18-22页
       ·基于PCR技术的生物勘探第20页
       ·基于杂交技术的生物勘探第20-21页
       ·基于其它技术或组合技术的生物勘探第21-22页
   ·疣孢菌的系统生物学第22-27页
     ·疣孢菌的分类地位第22-25页
     ·疣孢菌的分类第25-27页
       ·疣孢菌的表型信息与化学分类信息第25页
       ·疣孢菌的分子分类信息第25-27页
   ·疣孢菌是一类重要的药用微生物资源第27-31页
     ·疣孢菌合成活性物质的巨大潜力第28-30页
     ·疣孢菌产生的生物活性物质第30-31页
   ·疣孢菌的选择性分离第31-34页
     ·样品的预处理第31-33页
     ·抗生素的选择第33页
     ·培养基第33-34页
   ·研究目的与意义第34-35页
   ·技术路线第35-36页
第二章 疣孢菌的生物勘探与多样性分析第36-62页
   ·前言第36-37页
   ·材料与方法第37-50页
     ·材料第37-42页
       ·实验菌株第37页
       ·环境样品第37-39页
       ·主要仪器设备第39-40页
       ·PCR 引物第40-41页
       ·主要试剂第41页
       ·分析软件第41-42页
       ·培养基第42页
     ·方法第42-50页
       ·引物设计与序列水平的评价第42-43页
       ·模式菌株纯培养水平的评价第43-44页
       ·疣孢菌的生物勘探第44-46页
       ·检测疣孢菌引物的灵敏度第46-48页
       ·阳性代表样品中疣孢菌的多样性分析第48-50页
   ·结果与分析第50-57页
     ·引物设计与序列水平的评价第50-52页
     ·模式菌株纯培养水平的评价第52页
     ·疣孢菌的生物勘探第52-53页
     ·疣孢菌引物的灵敏度分析第53-54页
     ·阳性代表样品中疣孢菌的多样性第54-57页
   ·讨论第57-62页
     ·疣孢菌属的特异性引物第57-58页
     ·疣孢菌的生物勘探第58-60页
     ·疣孢菌的多样性第60-62页
第三章 疣孢菌的选择性分离第62-80页
   ·前言第62-63页
   ·材料与方法第63-70页
     ·环境样品第63页
     ·研究中使用的抗生素第63页
     ·红树林土壤的理化性质分析第63-64页
     ·疣孢菌的抗生素敏感性实验第64-65页
     ·样品预处理的快速分析第65-66页
     ·疣孢菌选择性分离培养基的制备第66-68页
     ·预处理、涂布、培养、挑菌和菌种保藏第68页
     ·从分离菌株中快速鉴定疣孢菌第68-69页
     ·疣孢菌的16S rRNA基因序列扩增与分析第69-70页
   ·结果与分析第70-77页
     ·红树林土壤的理化性质第70页
     ·疣孢菌对抗生素的敏感性第70-72页
     ·样品预处理分析第72-73页
     ·分离结果统计第73-74页
     ·分离菌株纯化与疣孢菌的快速鉴定第74页
     ·疣孢菌的16S rRNA基因序列扩增与分析第74-76页
     ·分离的疣孢菌菌株与文库分析的疣孢菌克隆子对比分析第76-77页
   ·讨论第77-80页
     ·疣孢菌选择性分离方法的探索第77-79页
     ·分离菌株的快速鉴定第79-80页
第四章 生物活性检测与基因勘探第80-88页
   ·前言第80-81页
   ·材料与方法第81-85页
     ·实验菌株第81页
     ·病原指示菌株第81-82页
     ·阳性抗生素第82页
     ·培养基第82-83页
     ·发酵培养第83页
     ·抗菌活性检测第83-84页
     ·抗尖孢镰刀菌的活性测定第84页
     ·PKSs和NRPSs基因的勘探第84-85页
   ·结果与分析第85-86页
     ·疣孢菌分离株抗菌活性第85页
     ·疣孢菌PKSs基因与NRPSs的勘探第85-86页
   ·讨论第86-88页
第五章 疣孢菌的多相分类鉴定第88-106页
   ·前言第88页
   ·材料与方法第88-99页
     ·实验菌株第88-89页
     ·培养基第89页
     ·形态特征和培养特征第89-90页
     ·生理生化特性第90-91页
       ·NaCl耐受实验第90页
       ·pH耐受实验第90页
       ·碳源利用实验第90页
       ·氮源利用实验第90-91页
       ·酶学试验第91页
     ·化学分类特征第91-94页
       ·细胞壁氨基酸分析第91-92页
       ·磷酸类脂分析第92-94页
       ·醌组分分析第94页
     ·分子分类特征第94-99页
       ·分离菌株的16S rRNA基因序列分析第94页
       ·系统发育分析第94-95页
       ·DNA同源性分析(DNA-DNA杂交)第95-99页
   ·结果与分析第99-104页
     ·形态特征第99页
     ·生理生化特性第99-102页
     ·化学特征第102-103页
     ·分子分类特征第103-104页
   ·多相分类结果第104-106页
     ·菌株234402与菌株2601PA01的多相分类结果第104页
     ·菌株2603PH03的多相分类结果第104-105页
     ·菌株232076与菌株234606的多相分类结果第105-106页
第六章 结论与展望第106-109页
   ·结论第106-107页
     ·疣孢菌属特异性引物设计第106页
     ·不同海洋环境样品中疣孢菌属的生物勘探第106页
     ·发现存在大量未培养的疣孢菌第106页
     ·疣孢菌的分离方法第106-107页
     ·多相分类鉴定了疣孢菌新种第107页
     ·获得抗MRSA的疣孢菌第107页
     ·微生物资源挖掘的新策略第107页
   ·展望第107-109页
参考文献第109-130页
致谢第130-131页
附录1:博士期间的科研论文及专利第131-133页
附录2:疣孢菌特异引物在RDP比对的结果第133-138页

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