| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-16页 |
| ·卤虫的生物特性 | 第9-10页 |
| ·分类地位及生态分布 | 第9页 |
| ·形态特征与胚胎发育 | 第9-10页 |
| ·经济价值 | 第10页 |
| ·nupr1 的结构与功能 | 第10-14页 |
| ·nupr1 基因的发现与命名 | 第10页 |
| ·nupr1 基因的分子结构 | 第10-11页 |
| ·NUPR1 蛋白的亚细胞定位 | 第11页 |
| ·nupr1 的表达调控 | 第11-12页 |
| ·nupr1 基因的功能 | 第12-14页 |
| ·原核表达 | 第14-15页 |
| ·抗体制备 | 第15页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-38页 |
| ·材料 | 第16-21页 |
| ·卤虫培养条件 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16-20页 |
| ·仪器设备 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-37页 |
| ·制备模板 | 第21-22页 |
| ·PCR 扩增反应及核酸电泳 | 第22-23页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第23-31页 |
| ·鼠抗卤虫 As-NUPR1 多克隆抗体的制备及效价测定 | 第31-33页 |
| ·免疫组化 | 第33-34页 |
| ·Western-blot 检测 | 第34-37页 |
| ·生物信息学分析及统计学分析 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-50页 |
| ·As-nupr1 序列片段 | 第38页 |
| ·结构域分析 | 第38-39页 |
| ·As-NUPR1 的进化分析 | 第39-41页 |
| ·14 个物种 NUPR1 同源性比对 | 第39-40页 |
| ·14 个物种 NUPR1 的进化关系 | 第40-41页 |
| ·酶切结果 | 第41页 |
| ·重组质粒序列分析 | 第41-42页 |
| ·重组蛋白表达及纯化 | 第42-45页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第42-43页 |
| ·重组蛋白的可溶性检测 | 第43-44页 |
| ·蛋白纯化 | 第44页 |
| ·组氨酸标签检测 | 第44-45页 |
| ·鼠抗 As-NUPR1 多克隆抗体的效价测定与特异性检测 | 第45-46页 |
| ·抗体效价测定 | 第45-46页 |
| ·抗体特异性检测 | 第46页 |
| ·As-NUPR1 蛋白的表达模式 | 第46-50页 |
| ·As-NUPR1 的表达部位 | 第46-47页 |
| ·卤虫不同发育时期 As-NUPR1 的表达 | 第47-48页 |
| ·不同盐度胁迫下卤虫 As-NUPR1 的表达 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| ·As-nupr1 ORF 序列及其蛋白结构域的进化关系 | 第50页 |
| ·重组蛋白的表达及纯化 | 第50-51页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第51页 |
| ·As-NUPR1 蛋白的表达模式 | 第51-53页 |
| ·As-NUPR1 蛋白的表达部位 | 第51页 |
| ·卤虫发育各时期及盐度胁迫下的 As-NUPR1 蛋白的表达模式 | 第51-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
