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纤维素酶基因枯草芽孢杆菌工程菌的构建及其酶学性质的初步研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
縮略词表第12-13页
第一章 文献综述第13-30页
   ·纤维素第13-15页
     ·纤维素的理化性质第13-14页
     ·纤维素的分布第14页
     ·纤维素的降解第14-15页
   ·纤维素酶第15-20页
     ·纤维素酶的来源第15-16页
     ·纤维素酶的组成第16-17页
     ·纤维素酶的酶学性质第17-18页
     ·纤维素酶的结构第18-19页
     ·纤维素酶的降解机理第19-20页
   ·纤维素酶在畜禽养殖业中的应用第20-24页
     ·在动物饲料中的应用第20-23页
     ·纤维素酶在堆肥中的应用第23-24页
   ·高产纤维素酶生产菌种的选育第24-27页
     ·自然选育第24页
     ·诱变育种第24-25页
     ·抗降解物阻遏突变株筛选技术第25页
     ·原生质融合育种第25-26页
     ·基因工程育种第26-27页
   ·枯草芽孢杆菌的表达系统第27-30页
     ·枯草芽孢杆菌的蛋白分泌系统第28-29页
     ·枯草芽孢杆菌的优劣势分析第29-30页
第二章 研究的目的与意义第30-31页
第三章 材料和方法第31-48页
   ·试验材料第31-37页
     ·试验主要菌株和质粒第31-32页
     ·主要仪器设备第32-33页
     ·主要试剂和试剂盒第33页
     ·常用试剂及其配制第33-37页
   ·试验方法第37-48页
     ·扩增靶基因第37-41页
     ·表达载体的构建第41-42页
     ·枯草芽孢杆菌感受态的电转化方法第42-43页
     ·重组菌株的表达分析第43-44页
     ·纤维素酶活性的测定第44-45页
     ·内切葡聚糖酶和葡萄糖苷酶的酶活性鉴定第45-46页
     ·重组菌一些生理指标的鉴定第46-48页
第四章 试验结果第48-63页
   ·重组质粒的构建第48-51页
     ·绿色木霉内切葡聚糖酶基因信号肽的扩增与融合第48-49页
     ·重组质粒获得第49-50页
     ·双酶切验证第50-51页
   ·纤维素酶工程菌的获得第51-52页
   ·重组菌株的刚果红初步分析第52页
   ·SDS-PAGE的进一步分析第52-54页
     ·Bs168-Tv-EgⅦ-pMA5的SDS-PAGE分析第52-53页
     ·Bs168-An-BglⅠ-pMA5的SDS-PAGE分析第53-54页
   ·重组菌纤维素酶酶特性的研究第54-59页
     ·葡萄糖标准曲线的绘制第54页
     ·Bs168-Tv-EgⅦ-pMA5和Bs168-An-BglⅠ-pMA5的酶活力的测定结果第54-55页
     ·Bs168-Tv-EgⅦ-pMA5和Bs168-An-BglⅠ-pMA5最适反应条件的pH的测定第55-56页
     ·Bs168-Tv-EgⅦ-pMA5和Bs168-An-BglⅠ-pMA5 pH稳定性的测定第56-57页
     ·Bs168-Tv-EgⅦ-pMA5和Bs168-An-BglⅠ-pMA5最适反应温度的测定第57-58页
     ·Bs168-Tv-EgⅦ-pMA5和Bs168-An-BglⅠ-pMA5最适培养转数的测定第58-59页
   ·重组菌株的遗传稳定性第59-61页
   ·重组菌株的生长特性第61-62页
   ·重组菌株的生化特性第62-63页
第五章 分析与讨论第63-67页
   ·枯草芽孢杆菌表达菌株和载体的选取第63-64页
   ·纤维素酶表达基因的选取第64页
   ·纤维素酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达第64-65页
   ·重组纤维素酶酶学性质的研究第65-67页
     ·重组内切葡聚糖酶酶反应最佳pH及对pH的稳定性第66页
     ·重组葡萄糖苷酶酶反应最佳pH及对pH的稳定性第66页
     ·重组纤维素酶培养转速的分析第66-67页
第六章 结论第67-69页
   ·试验得出的结果第67-68页
   ·下一步需要研究的工作第68-69页
参考文献第69-75页
致谢第75页

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