| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-8页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-15页 |
| 1 卵泡刺激素简介 | 第9-10页 |
| 2 卵泡刺激素的生物学作用 | 第10页 |
| ·FSH对家禽繁殖的作用 | 第10页 |
| ·FSH对哺乳动物繁殖的作用 | 第10页 |
| 3 卵泡刺激素的表达和调控 | 第10-11页 |
| 4 卵泡刺激素的应用 | 第11-12页 |
| 5 融合基因的研究进展 | 第12-13页 |
| ·融合PCR技术 | 第12页 |
| ·添加CTP序列 | 第12-13页 |
| 6 卵泡刺激素的表达系统 | 第13-14页 |
| ·真核表达系统 | 第13-14页 |
| ·原核表达系统 | 第14页 |
| 7 本研究目的意义 | 第14-15页 |
| 第二章 鹅FSH-α、INH-α基因在不同生殖时期的表达差异分析 | 第15-24页 |
| 1 材料 | 第15页 |
| ·实验材料 | 第15页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第15页 |
| 2 实验方法 | 第15-17页 |
| ·鹅组织总RNA抽提 | 第15-16页 |
| ·引物设计与合成 | 第16页 |
| ·FSH-α、INH-α基因在不同组织中的mRNA表达分析 | 第16-17页 |
| ·统计分析 | 第17页 |
| 3 实验结果 | 第17-22页 |
| ·总RNA提取检测结果 | 第17-18页 |
| ·不同组织鹅FSH-α基因mRNA RT-PCR检测 | 第18页 |
| ·不同组织鹅INH-α基因mRNA RT-PCR检测 | 第18-19页 |
| ·鹅不同生殖时期生殖组织FSH-α、INH-α基因mRNA表达量检测 | 第19-21页 |
| ·浙东白鹅与扬州鹅产蛋期FSH-a和INH-a基因mRNA表达差异 | 第21-22页 |
| 4 讨论 | 第22-24页 |
| ·FSH-α和INH-α在不同组织中的表达差异性 | 第22页 |
| ·FSH-α和INH-α在不同生殖时期的表达趋势 | 第22页 |
| ·浙东白鹅与扬州鹅产蛋期FSH-α和INH-α基因mRNA表达差异分析 | 第22-23页 |
| ·FSH和INH之间的表达关系 | 第23-24页 |
| 第三章 鹅FSH原核表达研究 | 第24-51页 |
| 1 材料与方法 | 第24-26页 |
| ·实验动物 | 第24页 |
| ·主要试验仪器设备 | 第24页 |
| ·菌株和质粒 | 第24-25页 |
| ·主要试剂盒及药品 | 第25页 |
| ·常用溶液的配制 | 第25-26页 |
| 2 试验方法 | 第26-38页 |
| ·采集样品 | 第26页 |
| ·鹅垂体总RNA提取 | 第26页 |
| ·PCR引物的设计与合成 | 第26-27页 |
| ·引物稀释 | 第27页 |
| ·基因cDNA扩增 | 第27-29页 |
| ·PCR产物的克隆及鉴定 | 第29-33页 |
| ·鹅融合基因FSHα-CTP、FSHβ-CTP和FSHβ-CTP-α原核表达载体的构建 | 第33-36页 |
| ·最佳诱导时间的分析 | 第36页 |
| ·最佳诱导浓度的分析 | 第36页 |
| ·蛋白表达形式的分析 | 第36-37页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第37页 |
| ·表达产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测 | 第37-38页 |
| 3 实验结果 | 第38-49页 |
| ·总RNA提取结果 | 第38页 |
| ·PCR扩增结果 | 第38-39页 |
| ·pMD18-T载体连接后,重组质粒的鉴定 | 第39-41页 |
| ·PET32a载体连接后,重组质粒的鉴定 | 第41-43页 |
| ·蛋白表达条件的优化 | 第43-47页 |
| ·蛋白表达形式的鉴定 | 第47-48页 |
| ·三个融合基因包涵体的纯化 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| ·融合PCR | 第49页 |
| ·CTP序列的添加 | 第49页 |
| ·表达系统的选择 | 第49页 |
| ·表达条件的优化 | 第49-50页 |
| ·包涵体的制备与纯化 | 第50-51页 |
| 全文结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第59-61页 |
