| 提要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 第一部分 升麻三萜皂苷化合物 A、DA、KCY4 调节白血病干细胞Wnt/β-catenin 信号通路自我更新途径的体外研究 | 第11-25页 |
| 1 实验材料 | 第11-13页 |
| ·细胞株 | 第11页 |
| ·实验材料 | 第11-13页 |
| 2 实验方法 | 第13-18页 |
| ·细胞培养 | 第13页 |
| ·实验药品 | 第13页 |
| ·MACS 分选 LSCs | 第13-14页 |
| ·CD34~+/CD123~+双阳 LSCs 细胞的培养 | 第14页 |
| ·生长抑制试验 | 第14页 |
| ·CCK-8 法检测细胞活性 | 第14页 |
| ·流式细胞术分析细胞凋亡率及细胞周期分布 | 第14-15页 |
| ·Western-blotting 检测蛋白在细胞膜上的表达 | 第15-16页 |
| ·荧光定量 PCR 检测 mRNA 表达改变 | 第16-18页 |
| 3 实验结果 | 第18-25页 |
| ·细胞分子表面标记 FACS 检测细胞纯度 | 第18页 |
| ·CCK-8 法检测细胞活性 | 第18-21页 |
| ·细胞凋亡率检测 | 第21-23页 |
| ·Western-blotting 检测蛋白的表达水平改变及相关性 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR 法检测β-catenin、CyclinD1 及 APC 的 mRNA 表达水平 | 第24-25页 |
| 第二部分 升麻三萜皂苷化合物 A、DA、KCY4 调节白血病干细胞Wnt/β-catenin 信号通路自我更新途径的体内研究 | 第25-36页 |
| 实验一 KG-1a/NOD-SCID 小鼠动物模型的建立及鉴定 | 第25-30页 |
| 1 实验材料 | 第25-26页 |
| ·实验细胞及动物 | 第25页 |
| ·病理试剂、实验器械及耗材 | 第25页 |
| ·主要仪器和设备 | 第25-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-28页 |
| ·细胞培养 | 第26页 |
| ·动物分组及 KG-1a 细胞接种 | 第26-27页 |
| ·观察小鼠的一般情况及生存时间 | 第27页 |
| ·外周血白细胞计数及血涂片检测 | 第27页 |
| ·骨髓涂片 | 第27页 |
| ·骨髓染色体核型分析 | 第27-28页 |
| ·病理组织学检查 | 第28页 |
| 3 实验结果 | 第28-30页 |
| ·一般情况 | 第28-29页 |
| ·外周血细胞计数及涂片镜检 | 第29页 |
| ·骨髓细胞学检查 | 第29页 |
| ·染色体分析 | 第29页 |
| ·组织病理学检查 | 第29-30页 |
| 实验二 升麻三萜皂苷化合物 A、DA、KCY4 对 KG-1a/NOD-SCID 小鼠生存时间、细胞凋亡及周期及 Wnt/β-catenin 信号通路自我更新途径调控因子表达的影响 | 第30-36页 |
| 1 实验材料 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-32页 |
| ·实验药物 | 第30页 |
| ·药物干预 | 第30页 |
| ·一般情况及生存时间 | 第30-31页 |
| ·流式细胞术分析细胞凋亡率及细胞周期分布 | 第31页 |
| ·免疫组化检测 | 第31-32页 |
| ·统计学方法 | 第32页 |
| 3 实验结果 | 第32-36页 |
| 第三部分 讨论 | 第36-49页 |
| 1 中医学对 AML 的认识 | 第36-37页 |
| ·病因 | 第36页 |
| ·病机 | 第36页 |
| ·治疗原则 | 第36-37页 |
| 2 白血病干细胞 | 第37-40页 |
| ·白血病干细胞 | 第37-39页 |
| ·自我更新机制与白血病 | 第39-40页 |
| 3 Wnt 信号通路细胞信号转导与白血病 | 第40-44页 |
| ·白血病信号转导与自我更新机制 | 第40页 |
| ·Wnt 的自我更新作用机制 | 第40-41页 |
| ·关键效应蛋白β-catenin 的调节 | 第41-42页 |
| ·靶基因的调控 | 第42页 |
| ·细胞凋亡率和细胞周期与 Wnt 信号通路 | 第42-44页 |
| 4 NOD/SCID 鼠 | 第44页 |
| 5 药物分析 | 第44-46页 |
| ·升麻提取物及药理作用 | 第45页 |
| ·本研究选取的升麻三萜皂苷类化合物的研究背景 | 第45-46页 |
| 6 实验结果的讨论 | 第46-49页 |
| ·三种新分离的升麻三萜皂苷类化合物 A、DA、KCY4 体外试验 | 第46-47页 |
| ·三种新分离的升麻三萜皂苷类化合物 A、DA、KCY4 对 KG-1a/NOD-SCID 的体内试验 | 第47-49页 |
| 结语 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 综述 | 第56-63页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 附录 | 第63-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录及科研参与情况 | 第74-75页 |
| 发表的论文 | 第75-80页 |
| 详细摘要 | 第80-88页 |
