| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-16页 |
| ·课题背景(或引言) | 第9-10页 |
| ·植物金属硫蛋白研究进展 | 第10-15页 |
| ·植物MTs的分类 | 第10-11页 |
| ·植物MTs基因的表达调控 | 第11-12页 |
| ·植物MTs蛋白的结构 | 第12-13页 |
| ·植物MTs的功能 | 第13-15页 |
| ·研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 星星草PutMT2基因的克隆与生物信息学分析 | 第16-24页 |
| ·实验材料 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-18页 |
| ·星星草cDNA酵母9.3文库NaCl胁迫筛选 | 第16页 |
| ·酵母总DNA的提取 | 第16-17页 |
| ·PCR产物的片段回收与连接 | 第17页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第17-18页 |
| ·质粒提取 | 第18页 |
| ·星星草PutMT2的序列分析 | 第18页 |
| ·结果与分析 | 第18-23页 |
| ·PutMT2基因的克隆与序列分析 | 第18-19页 |
| ·PutMT2蛋白同源性与进化树分析 | 第19-21页 |
| ·PutMT2蛋白性质预测 | 第21-22页 |
| ·PutMT2蛋白磷酸化位点预测分析 | 第22页 |
| ·PutMT2蛋白的二级结构预测 | 第22-23页 |
| ·本章小结 | 第23-24页 |
| 3 PutMT2在酵母中的表达及金属结合特性分析 | 第24-34页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-27页 |
| ·酵母表达载体pAUR123-PutMT2的构建 | 第24-25页 |
| ·质粒pAUR123-PutMT2酵母转化 | 第25-26页 |
| ·酵母的抗性分析 | 第26页 |
| ·原子吸收测定酵母细胞金属累积量和总蛋白络合金属量 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-32页 |
| ·pAUR123-PutMT2表达载体的构建与探针标记 | 第27-28页 |
| ·表达PutMT2酵母胁迫逆境响应分析 | 第28-29页 |
| ·原子吸收法测定分析表达PutMT2酵母金属结合能力 | 第29-32页 |
| ·本章小结 | 第32-34页 |
| 4 PutMT2在大肠杆菌中的表达及金属结合能力分析 | 第34-47页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·实验菌株和仪器 | 第34页 |
| ·实验试剂及配方 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-38页 |
| ·GST-PutMT2表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第36页 |
| ·GST-PutMT2融合蛋白的小量诱导 | 第36-37页 |
| ·GST-PutMT2融合蛋白的大量诱导 | 第37页 |
| ·GST-PutMT2融合蛋白的纯化 | 第37页 |
| ·不同金属离子对GST-PutMT2融合蛋白产量的影响 | 第37页 |
| ·ICP-AES测定分析PutMT2的金属结合能力 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-45页 |
| ·GST-PutMT2表达载体的构建与鉴定 | 第38-39页 |
| ·GST-PutMT2融合蛋白的诱导表达 | 第39-40页 |
| ·GST-PutMT2融合蛋白的纯化 | 第40页 |
| ·金属离子对GST-PutMT2蛋白产量的影响 | 第40-41页 |
| ·ICP-AES蛋白样品的纯化与定量 | 第41-42页 |
| ·PutMT2蛋白金属结合特性分析 | 第42-45页 |
| ·本章小结 | 第45-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 讨论和展望 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
