| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-23页 |
| 1 概述 | 第13-14页 |
| 2 病原学 | 第14-16页 |
| ·病毒分类地位 | 第14-15页 |
| ·形态特征 | 第15页 |
| ·生物学特性 | 第15页 |
| ·实验室宿主系统 | 第15-16页 |
| 3 IBV 的基因组特点及功能蛋白 | 第16-18页 |
| ·IBV 基因组 | 第16页 |
| ·IBV 基因组编码的非结构蛋白 | 第16-17页 |
| ·IBV 基因组编码的结构蛋白 | 第17-18页 |
| ·S 蛋白 | 第17-18页 |
| ·M 蛋白 | 第18页 |
| ·N 蛋白 | 第18页 |
| ·E 蛋白 | 第18页 |
| 4 IBV 的变异 | 第18-20页 |
| ·基因突变 | 第19页 |
| ·基因重组 | 第19-20页 |
| 5 IBV 的基因分型和血清型分型 | 第20-22页 |
| ·基因分型 | 第20-22页 |
| ·血清分型 | 第22页 |
| 6 研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 IBV 弱毒株的筛选 | 第23-42页 |
| 1 材料 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要试验仪器 | 第23-24页 |
| ·其他 | 第24页 |
| 2 试验内容与方法 | 第24-26页 |
| ·病毒增殖 | 第24页 |
| ·IBV 阳性血清制备 | 第24-25页 |
| ·气管环组织培养（Tracheal organ cultures，TOC） | 第25页 |
| ·鸡胚气管环半数感染量（TOC-ID_(50)）的测定 | 第25-26页 |
| ·气管环血清交叉中和试验 | 第26页 |
| 3 试验结果 | 第26-40页 |
| ·各毒株气管环半数感染量（TOC-ID_(50)）测定结果 | 第26-29页 |
| ·GY 分离株 TOC-ID_(50)的测定 | 第27页 |
| ·WT 分离株 TOC-ID_(50)的测定 | 第27-28页 |
| ·DP 分离株 TOC-ID_(50)的测定 | 第28页 |
| ·HQ 分离株 TOC-ID_(50)的测定 | 第28页 |
| ·FJW 分离株 TOC-ID_(50)的测定 | 第28-29页 |
| ·H120 疫苗株 TOC-ID_(50)的测定 | 第29页 |
| ·血清交叉中和试验结果 | 第29-39页 |
| ·GY 分离株与 FJW、DP、WT 血清的中和试验 | 第30-31页 |
| ·HQ 分离株与 FJW、DP、WT 血清的中和试验 | 第31-32页 |
| ·H120 疫苗株与 FJW、DP、WT 血清的交叉中和试验 | 第32-33页 |
| ·FJW 分离株与六种血清的中和试验 | 第33-35页 |
| ·DP 分离株与六种血清的中和试验 | 第35-37页 |
| ·WT 分离株与六种血清的中和试验 | 第37-39页 |
| ·交叉中和试验结果 | 第39页 |
| ·各毒株间的血清交叉中和相关性 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 致弱毒株安全性、免疫原性检测及其 S1 基因、N 基因序列分析 | 第42-63页 |
| 1 材料 | 第42-43页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42-43页 |
| ·鸡外周红细胞的制备 | 第43页 |
| ·其他 | 第43页 |
| 2 试验内容与方法 | 第43-50页 |
| ·SPF 鸡胚传代致弱 | 第43-44页 |
| ·红细胞凝集试验（HA） | 第44页 |
| ·HQ 毒株 P110 安全性及免疫原性的检测 | 第44-45页 |
| ·HQ 毒株 P110 的安全性检测 | 第44页 |
| ·HQ 毒株 P110 免疫原性的检测 | 第44-45页 |
| ·HQ 毒株 P10 和 P110 S1 基因、N 基因的克隆与序列测定分析 | 第45-50页 |
| ·病毒 RNA 提取 | 第45页 |
| ·引物设计与合成 | 第45-46页 |
| ·反转录反应(Reverse Transcription) | 第46-47页 |
| ·PCR 反应、鉴定 | 第47-48页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第48页 |
| ·pGEM-T Easy 载体与纯化 PCR 产物的连接 | 第48页 |
| ·连接产物的转化 | 第48-49页 |
| ·重组质粒提取 | 第49页 |
| ·重组质粒的 PCR 鉴定 | 第49-50页 |
| ·HQ 毒株 P10 与 P110 S1 基因、N 基因序列测定与分析比较 | 第50页 |
| 3 试验结果 | 第50-60页 |
| ·SPF 鸡胚传代致弱 | 第50-51页 |
| ·红细胞凝集试验（HA） | 第51-52页 |
| ·HQ 毒株 P110 安全性及免疫原性的检测 | 第52-53页 |
| ·HQ 毒株 P110 安全性检测 | 第52页 |
| ·HQ 毒株 P110 免疫原性检测 | 第52-53页 |
| ·HQ 毒株 P10 和 P110 S1 基因、N 基因的克隆与序列测定分析 | 第53-60页 |
| ·S1 基因、N 基因 RT-PCR 扩增结果 | 第53-54页 |
| ·重组质粒 PCR 鉴定 | 第54-55页 |
| ·HQ 毒株 P10 与 P110 S1 基因序列测定与分析 | 第55-57页 |
| ·HQ 毒株 P10 与 P110 N 基因序列测定与分析 | 第57-60页 |
| 4 讨论 | 第60-63页 |
| 第四章 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 附录 | 第70-78页 |
| 1 重组质粒提取步骤 | 第70-71页 |
| 2 HQ 毒株 P10 与 P110 S1 基因核苷酸序列比对 | 第71-74页 |
| 3 HQ 毒株 P10 与 P110 S1 基因推导氨基酸序列比对 | 第74-75页 |
| 4 HQ 毒株 P10 与 P110 N 基因核苷酸序列比对 | 第75-77页 |
| 5 HQ 毒株 P10 与 P110 N 基因推导氨基酸序列比对 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
