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拟南芥雄性不育基因NEF1的初步功能研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-9页
第一章 前言第9-26页
   ·花粉壁的结构与形成第11-15页
     ·花粉壁的结构与功能第11-12页
     ·花粉壁形成过程第12-15页
   ·影响花粉壁合成的关键要素第15-20页
     ·胼胝质对花粉壁形成的影响第15-17页
     ·初生外壁对花粉壁形成的影响第17-19页
     ·波浪形膜结构在花粉壁形成中的作用第19-20页
   ·影响波浪形膜结构形成相关基因的概述第20-22页
   ·NEF1基因的研究概述及蛋白质结构域分析第22-24页
   ·本研究的目的和意义第24-26页
第二章 实验材料与方法第26-41页
   ·实验材料第26-28页
     ·植物材料第26页
     ·质粒和菌株第26页
     ·主要试剂和酶类第26-27页
     ·实验仪器第27页
     ·主要软件及数据库第27-28页
   ·实验方法第28-41页
     ·拟南芥培养第28页
     ·T-DNA插入不育突变体的鉴定第28-29页
     ·DNA与RNA抽提及反转录技术第29-31页
     ·半定量RT-PCR与Real-time RT-PCR第31页
     ·亚历山大染色第31页
     ·扫描电镜分析第31-32页
     ·半薄切片分析第32-33页
     ·透射电镜分析第33页
     ·互补载体及NEF1融合GFP基因的构建第33-36页
       ·质粒的大小量抽提第34-35页
       ·酶切和连接体系第35页
       ·大肠杆菌以及农杆菌的转化实验第35-36页
     ·拟南芥转化和转基因植株的筛选第36页
     ·激光共聚焦分析第36页
     ·原位杂交第36-41页
第三章 结果与分析第41-50页
   ·T-DNA插入位点及NEF1在突变体中的表达分析第41-42页
   ·nef1-1突变体的表型特征以及遗传互补实验第42-43页
   ·nef1-1小孢子发育过程中的细胞学分析第43-44页
   ·在nef1-1背景下胼胝质合成与CaLS5的表达受到影响第44-45页
   ·透射电镜结果表明小孢子膜波浪形结构形成异常第45-47页
   ·NEF1的亚细胞定位第47-48页
   ·NEF1及其同源蛋白之间的序列分析第48-49页
   ·NEF1基因在花药中表达的原位杂交结果第49-50页
第四章 讨论第50-54页
参考文献第54-59页
致谢第59页

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