一株多重耐药单核细胞增生李斯特菌的耐药基因分析
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩写词表 | 第9-11页 |
| 目录 | 第11-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-29页 |
| ·单核细胞增生李斯特菌简介 | 第15-20页 |
| ·单核细胞增生李斯特菌的生物学特性 | 第15-16页 |
| ·单核细胞增生李斯特菌的流行病学特征 | 第16页 |
| ·单核细胞增生李斯特菌的致病机理 | 第16-17页 |
| ·单核细胞增生李斯特菌的检测方法 | 第17-20页 |
| ·单核细胞增生李斯特菌的耐药性 | 第20页 |
| ·抗生素的耐药机制 | 第20-25页 |
| ·细菌耐药的生化机制 | 第21-23页 |
| ·耐药性产生的遗传学机制 | 第23-24页 |
| ·重金属抗性与抗生素耐药性的共选择作用 | 第24-25页 |
| ·耐药性消除的研究 | 第25-28页 |
| ·嵌合染料消除法 | 第25页 |
| ·SDS 消除法 | 第25-26页 |
| ·抗生素消除法 | 第26页 |
| ·中药消除法 | 第26-27页 |
| ·物理消除方法 | 第27页 |
| ·生物消除方法 | 第27-28页 |
| ·本课题的研究意义及主要内容 | 第28-29页 |
| 第二章 单核细胞增生李斯特菌的药物敏感性试验 | 第29-38页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·菌株来源 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·主要试剂和培养基 | 第29-30页 |
| ·数据分析软件 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-32页 |
| ·选用抗生素种类 | 第30-31页 |
| ·药敏测试方法 | 第31-32页 |
| ·统计学方法 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-35页 |
| ·90 株 LM 对不同抗菌药物的耐药率 | 第32-33页 |
| ·90 株 LM 的耐药谱型 | 第33-34页 |
| ·不同食品来源 LM 的耐药性比较 | 第34-35页 |
| ·不同血清型 LM 的耐药性比较 | 第35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-38页 |
| 第三章 多重耐药菌株 L78 的耐药基因检测 | 第38-51页 |
| ·材料 | 第38-40页 |
| ·菌株来源 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38-39页 |
| ·引物 | 第39页 |
| ·常用溶液、试剂配制 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40-45页 |
| ·DNA 模板的制备(CTAB 法) | 第40-41页 |
| ·耐药基因的 PCR 扩增 | 第41-44页 |
| ·扩增产物的凝胶电泳检测 | 第44页 |
| ·DNA 序列测定 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-49页 |
| ·氯霉素耐药基因的检测 | 第45-46页 |
| ·红霉素耐药基因的检测 | 第46-47页 |
| ·四环素耐药基因的检测 | 第47-48页 |
| ·未能检测到链霉素、甲氧苄啶相关耐药基因 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·cat 介导的氯霉素耐药 | 第49页 |
| ·ermB 介导的红霉素耐药 | 第49-50页 |
| ·tetS 介导的四环素耐药 | 第50页 |
| ·本章小结 | 第50-51页 |
| 第四章 耐药基因全长序列的扩增及分析 | 第51-68页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·菌株来源 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·主要培养基 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-59页 |
| ·引物设计 | 第52-53页 |
| ·耐药基因全长序列的扩增 | 第53-54页 |
| ·PCR 产物的检测 | 第54页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第54-55页 |
| ·耐药基因全长序列的克隆 | 第55-58页 |
| ·序列测定及解析 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-65页 |
| ·cat 全长序列的扩增结果与序列分析 | 第59-61页 |
| ·ermB 全长序列的扩增结果与序列分析 | 第61-62页 |
| ·tetS 全长序列的扩增结果与序列分析 | 第62-65页 |
| ·序列的上传 | 第65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| ·PCR 引物设计的讨论 | 第65-66页 |
| ·对耐药基因全长序列比对结果的讨论 | 第66-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 第五章 耐药基因定位 | 第68-77页 |
| ·材料 | 第68-70页 |
| ·菌株来源 | 第68页 |
| ·主要仪器 | 第68-69页 |
| ·主要试剂 | 第69页 |
| ·主要培养基 | 第69页 |
| ·引物 | 第69-70页 |
| ·方法 | 第70-72页 |
| ·质粒提取 | 第70-71页 |
| ·质粒的电泳检测 | 第71页 |
| ·质粒消除 | 第71页 |
| ·质粒消除前后 MIC 值变化测定 | 第71-72页 |
| ·耐药性的稳定性试验 | 第72页 |
| ·结果 | 第72-75页 |
| ·质粒抽提结果 | 第72页 |
| ·质粒的消除 | 第72-73页 |
| ·抗性消除子的质粒提取、耐药基因 PCR 验证 | 第73-74页 |
| ·质粒消除前后 MIC 值变化 | 第74-75页 |
| ·耐药性的稳定性评价 | 第75页 |
| ·讨论 | 第75-76页 |
| ·对质粒消除结果的讨论 | 第75-76页 |
| ·无选择压力下耐药性的稳定性评价 | 第76页 |
| ·本章小结 | 第76-77页 |
| 结论与展望 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-90页 |
| 附录 | 第90-100页 |
| 攻读硕士学位论文期间取得的主要成果 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 附件 | 第102页 |