| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 1 引言 | 第13-28页 |
| ·芝麻的生产及研究概况 | 第13-14页 |
| ·芝麻主要病害 | 第14页 |
| ·芝麻茎点枯病 | 第14-17页 |
| ·芝麻茎点枯病的致病菌 | 第14-15页 |
| ·芝麻茎点枯病的症状及危害 | 第15-16页 |
| ·芝麻茎点枯病的防治 | 第16-17页 |
| ·植物抗病基因的研究 | 第17-21页 |
| ·植物抗病反应 | 第17-18页 |
| ·植物抗病基因的分类 | 第18-21页 |
| ·NBS-LRR类 | 第18-19页 |
| ·STK-LRR类 | 第19页 |
| ·LRR-TM类 | 第19-20页 |
| ·STK类 | 第20页 |
| ·毒素还原酶类 | 第20-21页 |
| ·植物抗病基因的克隆方法 | 第21页 |
| ·Real-time PCR | 第21-24页 |
| ·Real-time PCR原理及应用 | 第21-22页 |
| ·Real-time PCR分类 | 第22-24页 |
| ·内参基因的选择 | 第24页 |
| ·亚细胞定位 | 第24-25页 |
| ·亚细胞定位的原理 | 第24页 |
| ·亚细胞定位的方法 | 第24-25页 |
| ·立题依据 | 第25-27页 |
| ·技术路线 | 第27-28页 |
| 2 芝麻抗茎点枯病相关基因的克隆 | 第28-49页 |
| ·材料与试剂 | 第28-29页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·实验材料及处理 | 第28页 |
| ·菌株和载体 | 第28-29页 |
| ·生化试剂和试剂盒 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-34页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·基因组提取 | 第30页 |
| ·总RNA的提取 | 第30页 |
| ·总RNA中基因组DNA的去除 | 第30-31页 |
| ·cDNA第一链的反转录及检测 | 第31页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第31-32页 |
| ·目的片段的回收 | 第32页 |
| ·大肠杆菌(TG1)感受态的制备 | 第32-33页 |
| ·连接与转化、菌落PCR检测及送样测序 | 第33-34页 |
| ·芝麻抗茎点枯病相关基因的生物信息学分析 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-47页 |
| ·RNA提取与反转录 | 第34-35页 |
| ·RGA基因的克隆及序列分析 | 第35-43页 |
| ·SIRGA1基因 | 第35-37页 |
| ·SIRGA2基因 | 第37-38页 |
| ·SIRGA8基因 | 第38-41页 |
| ·SIRGA12基因 | 第41-43页 |
| ·芝麻NBS类RGAs基因的比对及聚类分析 | 第43-46页 |
| ·芝麻NBS类RGAs基因的亚细胞定位预测 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 3 芝麻抗茎点枯病相关基因的表达模式分析 | 第49-64页 |
| ·材料与试剂 | 第49-50页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·实验材料及材料处理 | 第49页 |
| ·接种方法 | 第49-50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-52页 |
| ·引物设计 | 第50-51页 |
| ·RNA提取 | 第51页 |
| ·RNA中基因组的去除 | 第51页 |
| ·cDNA第一链的反转录及检测 | 第51页 |
| ·Real-time PCR分析 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-61页 |
| ·RNA提取及cDNA反转录 | 第52页 |
| ·反转录cDNA的检测 | 第52页 |
| ·定量引物检测结果 | 第52-53页 |
| ·定量分析结果 | 第53-61页 |
| ·抗病基因类似物在芝麻根、茎、叶中的组织表达特征 | 第53页 |
| ·SIRGA基因在芝麻叶部受茎点枯病菌诱导后的表达特征 | 第53-57页 |
| ·SIRGA基因在芝麻茎部受茎点枯病菌诱导后的表达分析 | 第57-61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| 4 SIRGA8基因的亚细胞定位 | 第64-72页 |
| ·材料与试剂 | 第64页 |
| ·主要仪器 | 第64页 |
| ·实验材料 | 第64页 |
| ·菌株与载体 | 第64页 |
| ·主要试剂与试剂盒 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-68页 |
| ·材料处理 | 第64页 |
| ·引物的设计 | 第64-65页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第65-68页 |
| ·目标片段加酶切位点的PCR扩增 | 第65页 |
| ·目标片段双酶切 | 第65-66页 |
| ·连接 | 第66页 |
| ·大肠杆菌感受态(TG1)的制备和转化 | 第66页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第66-67页 |
| ·洋葱表皮的转化及观察 | 第67-68页 |
| ·结果 | 第68-71页 |
| ·SIRGA8基因编码区的PCR扩增 | 第68页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第68-70页 |
| ·洋葱表皮细胞转化后的亚细胞定位观察 | 第70-71页 |
| ·讨论 | 第71-72页 |
| 5 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 个人简历 | 第77页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 附录 | 第79-81页 |