| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| Abbreviations | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-18页 |
| ·猪流行性腹泻简介 | 第8-11页 |
| ·PEDV基因结构 | 第8-9页 |
| ·PEDV抗原表位的研究 | 第9页 |
| ·PEDV发病机理 | 第9-10页 |
| ·国内外的研究动态及发展趋势 | 第10-11页 |
| ·乳酸菌食品级基因表达系统 | 第11-15页 |
| ·乳酸菌 | 第11页 |
| ·乳酸菌的重要生理功能 | 第11-12页 |
| ·食品级基因表达系统的基本要求 | 第12页 |
| ·乳酸菌食品级选择性标记 | 第12-14页 |
| ·乳酸菌表达载体 | 第14-15页 |
| ·表达宿主与表达载体的选择 | 第15-16页 |
| ·表达宿主的选择 | 第15-16页 |
| ·表达载体的选择 | 第16页 |
| ·立题意义与研究内容 | 第16-18页 |
| ·立题意义 | 第16页 |
| ·研究内容 | 第16-18页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第18-32页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·菌种和质粒 | 第18页 |
| ·酶及化学试剂 | 第18页 |
| ·主要培养基及溶液 | 第18-20页 |
| ·实验器材 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-32页 |
| ·新发PEDV部分S基因及ORF3 基因的变异分析 | 第20-23页 |
| ·PEDV CH-GZH株人工感染动物试验 | 第23页 |
| ·PEDV 总RNA提取 | 第23页 |
| ·大肠杆菌乳及酸乳球菌质粒提取 | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第24页 |
| ·乳酸乳球菌感受态细胞的制备及电击转化 | 第24-25页 |
| ·猪流行性腹泻病毒COE基因PCR引物设计及其扩增 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的构建 | 第26-29页 |
| ·重组乳酸乳球菌COE基因的表达及鉴定 | 第29-31页 |
| ·诱导条件对重组菌生长的影响 | 第31-32页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第32-44页 |
| ·新发猪流行性腹泻病毒基因变异分析 | 第32-35页 |
| ·S和ORF3 基因RT-PCR扩增 | 第32页 |
| ·S和ORF3 基因的克隆 | 第32-33页 |
| ·PEDV S及ORF3 基因序列分析 | 第33-34页 |
| ·基因进化树分析 | 第34-35页 |
| ·CH-GZH毒人工感染实验结果及检测 | 第35-37页 |
| ·CH-GZH毒人工感染实验结果 | 第35-36页 |
| ·病毒检测 | 第36-37页 |
| ·乳酸乳球菌重组质粒的构建结果 | 第37-38页 |
| ·目的基因的扩增结果 | 第37-38页 |
| ·COE基因乳酸乳球菌表达载体构建结果 | 第38页 |
| ·重组乳酸菌的鉴定及目的基因的表达 | 第38-41页 |
| ·PEDV COE基因乳酸乳球菌表达载体电转化结果 | 第38-39页 |
| ·PEDV COE基因重组载体鉴定结果 | 第39-40页 |
| ·COE基因在乳酸乳球菌中的表达 | 第40-41页 |
| ·诱导条件对重组乳酸菌生长的影响 | 第41-42页 |
| ·重组乳酸菌电转条件的优化结果 | 第42页 |
| ·影响乳酸菌NZ9000 电穿孔转化效率因素 | 第42页 |
| ·影响重组乳酸菌诱导表达因素 | 第42-43页 |
| ·存在问题 | 第43-44页 |
| 主要结论与展望 | 第44-45页 |
| 主要结论 | 第44页 |
| 展望 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49页 |
