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siRNA干扰Notch1对神经元样PC12细胞缺血损伤作用机制研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-16页
第1章 绪论第16-18页
第2章 综述第18-28页
 1.MAPK 信号转导通路第18-19页
 2.JAK/STAT 信号通路第19-20页
 3.PI3K/Akt 信号通路第20-21页
 4.NF-κB 信号通路第21-22页
 5.Rho/Rho-kinase 信号转导通路第22页
 6.ActA/Smads 信号通路第22-23页
 7. PKA-CREB 信号转导通路第23-24页
 8.Toll 样受体 4 信号转导通路第24-25页
 9.Notch 信号通路第25-26页
 10.结语第26-28页
第3章 PC12 细胞转化为神经元样细胞的培养、鉴定及氧糖剥夺模型的制备第28-40页
   ·材料第28-30页
     ·细胞株第28页
     ·主要试剂第28-29页
     ·主要仪器第29页
     ·主要试剂的配制第29-30页
   ·实验方法第30-32页
     ·PC12 细胞培养第30页
     ·PC12 细胞转化为神经元样细胞的培养第30页
     ·PC12 细胞转化为神经元的鉴定第30-31页
     ·PC12 细胞氧糖剥夺模型(OGD)的建立第31页
     ·PC12 细胞氧糖剥夺模型评价第31-32页
     ·统计学处理第32页
   ·实验结果第32-36页
     ·NGF 诱导 PC12 细胞转化为神经元样细胞的培养第32-33页
     ·PC12 细胞转化为神经元样细胞的的鉴定第33-34页
     ·PC-12 细胞氧糖剥夺(OGD)模型的建立第34页
     ·PC-12 细胞氧糖剥夺(OGD)模型的评价第34-36页
   ·讨论第36-38页
   ·小结第38-40页
第4章 靶向沉默 Notch1 基因及沉默效果检测第40-54页
   ·材料第40-42页
     ·细胞株第40页
     ·主要试剂第40-41页
     ·主要仪器第41-42页
   ·实验方法第42-48页
     ·PC12 细胞转化为神经元样细胞的培养、鉴定及分组第42页
     ·Notch1-siRNA 靶点的选择、设计及合成第42页
     ·细胞转染第42-43页
     ·转染效率检测第43页
     ·Realtime-PCR 检测 Notch1 mRNA 表达第43-45页
     ·Western blot 检测 Notch1 蛋白表达第45-47页
     ·转染毒性检测第47页
     ·siRNA 最佳作用浓度的筛选第47页
     ·siRNA 最佳作用时间的筛选第47-48页
     ·统计学处理第48页
   ·结果第48-52页
     ·转染效率检测第48页
     ·沉默效果检测第48-49页
     ·转染毒性检测第49-50页
     ·Notch1-siRNA 最佳浓度的筛选第50-51页
     ·Notch1-siRNA 最佳作用时间的筛选第51-52页
   ·讨论第52-53页
   ·小结第53-54页
第5章 Notch1 信号通路在神经元样 PC12 细胞 OGD 损伤后表达变化及 Notch1-siRNA 对其影响第54-62页
   ·材料第54-55页
     ·细胞株第54页
     ·主要试剂第54-55页
     ·主要仪器第55页
   ·实验方法第55-56页
     ·PC12 细胞转化为神经元样细胞的培养、鉴定、OGD 模型制备及分组第55-56页
     ·细胞转染第56页
     ·Realtime-PCR 检测 Notch1mRNA 表达第56页
     ·Western blot 检测 Notch1 及 NICD 蛋白表达第56页
     ·统计学处理第56页
   ·结果第56-58页
     ·Realtime-PCR 检测 Notch1 mRNA 表达第56-57页
     ·Western blot 检测 Notch1 及 NICD 蛋白表达第57-58页
   ·讨论第58-60页
   ·小结第60-62页
第6章 Notch1-siRNA 对神经元样 PC12 细胞缺血性损伤的影响及机制第62-70页
   ·材料第62-63页
     ·细胞株第62页
     ·主要试剂第62-63页
     ·主要仪器第63页
   ·实验方法第63-64页
     ·PC12 细胞转化为神经元样细胞的培养、鉴定、OGD 模型制备及分组第63页
     ·细胞转染第63页
     ·细胞凋亡检测第63-64页
     ·Realtime-PCR 检测 IAP-1 和 Caspase-3 mRNA 表达第64页
     ·Western blot 检测 IAP-1 和 Caspase-3 蛋白表达第64页
     ·统计学处理第64页
   ·结果第64-67页
     ·FCM 检测细胞凋亡率第64-65页
     ·Realtime-PCR 检测 IAP-1 和 Caspase-3mRNA 表达第65-66页
     ·Western-blot 检测 IAP-1 和 Caspase-3 蛋白表达第66-67页
   ·讨论第67-69页
   ·小结第69-70页
参考文献第70-85页
结论第85-86页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第86-87页
致谢第87页

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