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sirt1激活剂细胞筛选模型建立及初步应用

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 绪论第9-21页
     ·天然药物研究进展第9-12页
     ·天然药物发展简介第9-10页
     ·天然药物功能研究进展第10-12页
   ·sirt1 基因研究进展第12-18页
     ·sirt1 基因简介第12-14页
     ·sirt1 基因功能研究进展第14-17页
     ·天然药物有效成分对 sirt1 基因作用研究进展第17-18页
   ·天然药物活性成分筛选方法研究进展第18-19页
     ·药物活筛选方法简介第18页
     ·报告基因在天然药物筛选中的应用第18-19页
   ·研究目的及意义第19-21页
第二章 实验材料与方法第21-29页
   ·实验材料第21-23页
     ·实验材料第21页
     ·实验试剂及仪器第21-23页
   ·实验方法第23-29页
     ·天然药物的提取方法第23页
     ·人基因组 DNA 的提取方法第23页
     ·sirt1 启动子基因的克隆第23-24页
     ·sirt1 荧光素酶报告基因质粒的构建第24-25页
     ·质粒提取第25页
     ·去内毒素质粒提取第25-26页
     ·MTT 细胞毒性测定方法第26页
     ·HEK293T 细胞转染方法第26-27页
     ·双荧光素酶活性的测定方法第27页
     ·HEK293T 细胞总 RNA 的提取及 Realtime PCR 测定方法第27-28页
     ·HEK293T 细胞双氧水损伤模型的建立第28页
     ·SIRT1 蛋白 ELISA 测定方法第28-29页
第三章 实验结果与讨论第29-46页
   ·筛选 sirt1 激活剂细胞模型的构建第29-36页
     ·荧光素酶报告基因载体的构建第29-31页
     ·sirt1 激活剂细胞筛选模型的建立第31-33页
     ·Res 对转染报告基因后的 HEK293T 细胞的 sirt1 转录水平影响第33-36页
     ·小结第36页
   ·天然药物提取物的初步筛选第36-42页
     ·天然药物的提取第36页
     ·天然药物水提取物细胞毒性测定第36-39页
     ·天然水提物的活性筛选第39-41页
     ·铃兰,泽泻,罗布麻,黄芩,棘果,虎杖水提物对 sirt1 转录水平的影响第41页
     ·小结第41-42页
   ·天然药物的抗氧化作用研究第42-46页
     ·SIRT1 蛋白表达量的测定第42-43页
     ·双氧水诱导 HEK293T 细胞损伤模型的建立第43页
     ·中药水提物的抗氧化损伤活性测定第43-45页
     ·小结第45-46页
结论第46-47页
参考文献第47-50页
附录第50-51页
致谢第51页

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