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粘球菌孤立分泌素基因的功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-11页
符号说明及缩写第11-13页
第一章 文献综述第13-28页
   ·粘细菌概述第13-14页
   ·粘细菌的捕食行为第14-17页
   ·细菌的蛋白分泌系统第17-25页
     ·细菌的蛋白分泌系统概述第17-21页
     ·细菌的Ⅱ型分泌系统第21-23页
     ·粘细菌的蛋白分泌系统第23页
     ·粘细菌的Ⅱ型蛋白分泌系统第23-25页
   ·海洋粘细菌的研究第25-26页
   ·本论文工作开展的思路及研究内容第26-28页
第二章:橙色粘球菌HW-1遗传操作体系条件摸索第28-46页
   ·实验材料第29-32页
     ·菌株及质粒第29页
     ·培养基第29-30页
     ·实验试剂及仪器耗材第30-32页
   ·实验方法第32-39页
     ·目的基因缺失载体构建的流程第32-38页
     ·HW-1野生菌株电转化条件的探索第38-39页
       ·比较不同海水浓度液体CTT培养基中HW-1的生长状态第38页
       ·HW-1的电转化第38-39页
   ·实验结果与分析第39-45页
     ·敲除载体的构建结果第39-41页
     ·HW-1野生菌株的电转化第41-45页
       ·比较不同海水浓度液体CTT培养基中HW-1聚团的强弱第41-42页
       ·不同海水浓度和转速培养对HW-1电转化效率的影响第42-43页
       ·不同电场强度对HW-1电转化效率的影响第43-44页
       ·其他参数对HW-1电转化效率的影响第44-45页
 本章小结第45-46页
第三章 :DK1622孤立分泌素基因的功能研究第46-95页
   ·实验材料第48-52页
     ·菌株及质粒第48页
     ·培养基第48页
     ·实验试剂及仪器耗材第48-52页
     ·分析软件及网站第52页
   ·实验方法第52-65页
     ·引物设计与信息第52-53页
     ·基因缺失载体构建第53页
     ·基因置换载体的构建第53-55页
     ·M.xanthus DK1622突变株的筛选纯化第55-56页
     ·M.xanthus DK1622突变株的基本性质分析第56-58页
       ·不同海水浓度下子实体发育及生孢能力分析第56-57页
       ·不同海水浓度下菌株的运动能力分析第57页
       ·不同海水浓度下生长曲线的变化第57-58页
       ·不同海水浓度下捕食能力的分析第58页
     ·胞外蛋白质组分析第58-65页
       ·样品的制备第58-59页
       ·蛋白纯化(Bio-rad clean-up Kit)第59-60页
       ·蛋白浓度测定第60-61页
       ·双向电泳操作方法(按照Bio-rad双向电泳操作手册)第61-64页
       ·染色第64页
       ·考染蛋白胶内酶解第64-65页
       ·蛋白质谱鉴定第65页
   ·实验结果与分析第65-93页
     ·基因缺失载体的构建第65-71页
       ·Mxan3106基因敲除载体的构建第65-67页
       ·Mxan2514基因敲除载体的构建第67-69页
       ·基因置换载体的构建第69-71页
     ·突变株的筛选及纯化第71-75页
       ·Mxan3106及Mxan2514全基因敲除突变体的构建第71-72页
       ·Mxan2514置换Mxan3106突变体的构建第72-75页
     ·Mxan3106全基因缺失突变株YL1601的基本性质分析第75-82页
       ·不同海水浓度下子实体发育及生孢能力分析第75-76页
       ·不同海水浓度下菌株的运动能力分析第76-79页
       ·不同海水浓度下生长曲线的测定第79-80页
       ·不同海水条件下捕食能力分析第80-82页
     ·胞外比较蛋白质组学实验第82-93页
       ·蛋白标准曲线的测定第82页
       ·胞外分泌蛋白样品的制备与2-D分离第82-86页
       ·细胞膜相连蛋白的分离鉴定第86-89页
       ·YL1601与DK1622在15%海水条件下比较蛋白质组学实验(培养液中的分泌蛋白)第89-93页
 本章小结第93-95页
总结第95-96页
附录第96-97页
参考文献第97-102页
致谢第102-103页
攻读硕士期间主要研究成果第103-104页
学位论文评阅及答辩情况表第104页

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