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大豆GmGBP1基因参与光周期开花途径和逆境反应的功能分析

摘要第1-14页
Abstract第14-17页
1 前言第17-30页
   ·SKIP 基因概述第17页
   ·大豆光周期现象的研究进展第17-19页
   ·植物开花诱导研究进展第19-22页
     ·光周期途径第19页
     ·春化促进途径第19-21页
     ·自主途径第21页
     ·赤霉素途径第21-22页
   ·植物逆境胁迫研究进展第22-25页
     ·脱落酸(ABA)的研究进展第22-23页
     ·ROS 清除机制第23-24页
     ·逆境胁迫相关基因的研究进展第24-25页
   ·植物基因功能的研究进展第25-29页
     ·反向遗传学策略第25-26页
     ·植物过表达研究第26页
     ·植物基因沉默研究第26-27页
     ·酵母双杂交技术第27-28页
     ·基因的定点诱变第28页
     ·插入突变第28-29页
   ·本研究目的与意义第29-30页
2 材料和方法第30-50页
   ·试验材料和试剂第30页
     ·植物材料第30页
     ·菌种及载体第30页
     ·主要试剂第30页
   ·试验方法第30-50页
     ·Real-time RT-PCR 分析 GmGBP1 的表达第30-32页
     ·酵母表达载体 pBD-GmGBP1 和 pAD-GmGAMYB1 的构建第32-37页
     ·酵母双杂交分析 GmGBP1 与 GmGAMYB1 的相互作用第37-40页
     ·GmGBP1 原核表达研究第40-42页
     ·拟南芥突变体的筛选第42-43页
     ·农杆菌介导法侵染拟南芥花序第43-44页
     ·转基因拟南芥的分子生物学检测第44-45页
     ·转基因拟南芥的日长处理第45-46页
     ·转基因拟南芥的激素处理第46页
     ·转基因拟南芥的高盐胁迫处理第46-48页
     ·转基因拟南芥的干旱胁迫处理第48-49页
     ·转基因拟南芥的高温胁迫处理第49-50页
3 结果与分析第50-88页
   ·大豆 GmGBP 基因的序列分析第50-54页
     ·GmGBP 基因的染色体定位第50页
     ·GmGBP 基因与其它物种的序列比对第50-51页
     ·GmGBP 基因与其它物种进化树分析第51-52页
     ·GmGBP 基因的序列比对第52页
     ·GmGBP1 基因的生物信息学分析第52-54页
   ·大豆 GmGBP1 基因的表达研究第54-58页
     ·GmGBP1 在大豆不同组织器官中的差异表达第54-55页
     ·大豆叶片中 GmGBP1 在 GA3激素处理下的基因表达第55-56页
     ·大豆叶片中 GmGBP1 在 ABA 激素处理下的基因表达第56页
     ·大豆叶片中 GmGBP1 在 NaCl 处理下的基因表达第56-57页
     ·大豆叶片中 GmGBP1 在 PEG6000 处理下的基因表达第57页
     ·大豆叶片中 GmGBP1 在高温处理下的基因表达第57-58页
   ·大豆 GmGBP1 和 GmGAMYB1 的蛋白互作研究第58-63页
     ·酵母表达载体 pBD-GmGBP1 和 pAD-GmGAMYB1 的构建第58-61页
     ·酵母菌株 YRG-2 的表型鉴定第61页
     ·酵母菌株的组氨酸渗漏表达第61-62页
     ·GmGBP1 的转录自激活活性的鉴定第62页
     ·GmGBP1 和 GmGAMYB1 的蛋白互作分析第62-63页
   ·大豆 GmGBP1 原核表达研究第63-67页
     ·原核表达载体 pGEX-6p-GmGBP1 的构建第63-65页
     ·GmGBP1 重组蛋白的表达第65页
     ·GmGBP1 重组蛋白的纯化第65-67页
   ·拟南芥突变体的鉴定第67-70页
     ·拟南芥 skip 突变体 SAIL_681_H11 的鉴定第67-68页
     ·拟南芥 gamyb 突变体 SALK_058312 的鉴定第68-70页
   ·拟南芥的遗传转化及检测第70-73页
     ·拟南芥的遗传转化第70-71页
     ·过表达 GmGBP1 的拟南芥的检测第71页
     ·atskip 基因沉默的拟南芥的检测第71-73页
     ·过表达 GmGBP1 拟南芥的 gamyb 突变体的检测第73页
   ·转基因拟南芥的光周期反应第73-77页
     ·长日照处理转基因拟南芥第73-75页
     ·短日照处理转基因拟南芥第75-77页
     ·暗处理转基因拟南芥第77页
   ·转基因拟南芥的激素反应第77-80页
     ·赤霉素处理转基因拟南芥第77-78页
     ·脱落酸处理转基因拟南芥第78-79页
     ·多效唑处理转基因拟南芥第79-80页
   ·转基因拟南芥的盐胁迫反应第80-83页
     ·盐胁迫表型分析第80-81页
     ·盐胁迫生理指标测定第81-82页
     ·盐胁迫下基因的表达分析第82-83页
   ·转基因拟南芥的干旱胁迫反应第83-85页
     ·干旱胁迫表型分析第83页
     ·干旱胁迫生理指标测定第83-84页
     ·干旱胁迫下基因的表达分析第84-85页
   ·转基因拟南芥的高温胁迫处理第85-88页
     ·高温胁迫表型分析第85-86页
     ·高温胁迫生理指标测定第86-87页
     ·高温胁迫下基因的表达分析第87-88页
4 讨论第88-94页
   ·SKIP 基因的序列分析第88页
   ·SKIP 基因在植物生长中的重要作用第88-89页
   ·GmGBP1 调控植物开花第89-90页
     ·GmGBP1 组织特异性表达第89页
     ·GmGBP1 调控植物开花第89-90页
   ·GmGBP1 改变植物逆境胁迫耐性第90-92页
     ·GmGBP1 基因表达受多种因素调控第90-91页
     ·GmGBP1 降低拟南芥高盐胁迫耐性第91页
     ·GmGBP1 提高拟南芥干旱胁迫耐性第91页
     ·GmGBP1 提高拟南芥高温胁迫耐性第91-92页
   ·SKIP 基因在植物中的功能分化第92页
   ·ROS 清除机制在植物逆境胁迫中起关键作用第92-93页
   ·酵母双杂交研究植物基因功能第93-94页
5 结论第94-96页
致谢第96-97页
参考文献第97-110页
附录第110-113页
攻读学位期间发表的学术论文第113页

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