GL-7-ACA酰化酶发酵条件优化调控及其酶固定化研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 1 绪言 | 第12-28页 |
| ·头孢菌素类抗生素研究进展 | 第12-14页 |
| ·头孢菌素类抗生素概况 | 第12页 |
| ·头孢菌素类抗生素的作用机制与发展历程 | 第12-13页 |
| ·头孢菌素类抗生素新的应用 | 第13-14页 |
| ·戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶研究进展 | 第14-24页 |
| ·戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的来源及分类 | 第14页 |
| ·戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的结构及催化机理 | 第14-15页 |
| ·戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的特性 | 第15页 |
| ·戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的分离纯化 | 第15-20页 |
| ·戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的固定化 | 第20-23页 |
| ·戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的分泌表达 | 第23-24页 |
| ·戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的应用 | 第24页 |
| ·重组毕赤酵母高密度培养 | 第24-25页 |
| ·发酵动力学的模型建立 | 第25-26页 |
| ·本文的意义及研究内容 | 第26-28页 |
| ·目的意义 | 第26-27页 |
| ·课题研究内容 | 第27-28页 |
| 2 毕赤酵母产GL-7ACA酰化酶发酵动力学 | 第28-38页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·材料与方法 | 第28-31页 |
| ·菌种 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·培养基配方 | 第29页 |
| ·培养方法 | 第29-30页 |
| ·发酵过程中参数测定 | 第30-31页 |
| ·数据的获得及处理 | 第31页 |
| ·结果分析 | 第31-36页 |
| ·GL-7-ACA酰化酶发酵动力学特征 | 第31-32页 |
| ·第一阶段,消耗初始培养基中的甘油 | 第32-33页 |
| ·第二阶段,流加甘油 | 第33-34页 |
| ·第三阶段,甲醇诱导 | 第34-36页 |
| ·模型验证 | 第36页 |
| ·结论 | 第36-38页 |
| 3 GL-7-ACA酰化酶的分离纯化 | 第38-44页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·材料与方法 | 第38-40页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第38-39页 |
| ·酶液的纯化方法 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-41页 |
| ·膜分离效果 | 第40页 |
| ·硫酸铵沉淀效果 | 第40-41页 |
| ·GL-7-ACA酰化酶纯化结果 | 第41页 |
| ·小结 | 第41-44页 |
| 4 GL-7-ACA酰化酶的固定化研究 | 第44-54页 |
| ·引言 | 第44页 |
| ·材料与方法 | 第44-46页 |
| ·实验材料 | 第44页 |
| ·GA活力的测定及定义 | 第44-45页 |
| ·环氧基树脂固定GA的单因子试验 | 第45页 |
| ·Box-Behnken实验 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-48页 |
| ·环氧基树脂固定GA的单因子试验 | 第46-48页 |
| ·Box-Behnken实验 | 第48-53页 |
| ·Box-Behnken实验设计 | 第48-49页 |
| ·试验二次回归拟合和试验方差分析 | 第49-51页 |
| ·响应面图形分析 | 第51-53页 |
| ·结论 | 第53-54页 |
| 5 GL-7-ACA酰化酶的酶学性质研究 | 第54-58页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·材料与方法 | 第54页 |
| ·材料与试剂 | 第54页 |
| ·方法 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-56页 |
| ·固定化酶的最适反应pH | 第54-55页 |
| ·固定化酶的最适反应温度 | 第55-56页 |
| ·固定化酶的热稳定性 | 第56页 |
| ·固定化酶的操作稳定性 | 第56页 |
| ·小结 | 第56-58页 |
| 6 结论与展望 | 第58-62页 |
| ·结论 | 第58-59页 |
| ·创新点 | 第59-60页 |
| ·展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 附录 (攻读学位期间的主要学术成果) | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
