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过表达线粒体热激蛋白70抑制水稻悬浮细胞程序性死亡

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略语词汇表第11-13页
第一章 文献综述第13-31页
 一、植物细胞程序性死亡研究进展第13-26页
  1 植物细胞程序性死亡第13-23页
  2 细胞程序性死亡的亚细胞水平研究第23-25页
  3 植物细胞程序性死亡相关基因研究第25-26页
 二、热激蛋白与细胞程序性死亡研究第26-31页
  1 热激蛋白概述第26-27页
  2 热激蛋白与细胞程序性死亡第27-28页
  3 线粒体热激蛋白70与细胞程序性死亡研究概述第28-29页
  4 本研究目的与意义第29-31页
第二章 水稻mtHSP70过表达载体的构建及遗传转化第31-47页
 1 材料与方法第31-40页
   ·材料第31页
   ·pCAMBIA1304-mtHSP70表达载体的构建第31-37页
   ·农杆菌介导水稻遗传转化第37-38页
   ·水稻悬浮细胞系的建立第38-39页
   ·转基因水稻悬浮细胞系的检测第39-40页
 2 结果第40-45页
   ·pCAMBIA1304-mtHSP70表达载体的构建第40-43页
   ·农杆菌介导的水稻遗传转化第43-44页
   ·转基因水稻悬浮细胞PCR的检测第44-45页
 3 分析与讨论第45-47页
  水稻悬浮细胞为材料研究植物PCD过程第45-47页
第三章 过表达mtHSP70抑制水稻悬浮细胞程序性死亡第47-71页
 1 材料与方法第47-54页
   ·材料、主要试剂与仪器第47-48页
   ·热激诱导程序性死亡最适条件优化第48-49页
   ·mtHSP70的亚细胞定位第49-50页
   ·不同细胞系热激前后mtHSP70的qPCR分析第50-51页
   ·原生质体程序性死亡过程中细胞核变化第51页
   ·原生质体TUNEL检测第51-52页
   ·mtHSP70原生质体程序性死亡的抑制作用第52-53页
   ·细胞质中Cyt c的Western blot检测第53-54页
 2 结果第54-67页
   ·水稻原生质体程序性死亡最适热激诱导条件第54-55页
   ·mtHSP70的亚细胞定位第55-58页
   ·悬浮细胞mtHSP70转录水平的变化第58-59页
   ·原生质体程序性死亡过程中的细胞核形态变化第59-61页
   ·细胞程序性死亡过程中的染色体DNA断裂第61-64页
   ·原生质体程序性死亡过程中的死亡率及DNA片段化第64-66页
   ·热激诱导细胞程序性死亡早期细胞色素C的释放第66-67页
 3 分析与讨论第67-71页
   ·胁迫处理条件下诱发mtHSP70产生第67-68页
   ·植物DNA Ladder提取方法改进第68-71页
第四章 过表达mtHSP70抑制细胞程序性死亡发生机制的初步研究第71-81页
 1 材料与方法第71-73页
   ·材料、主要试剂与仪器第71页
   ·线粒体膜通透性检测第71-72页
   ·原生质体程序性死亡过程中H_2DCFDA活性氧染色第72页
   ·类Caspase-3蛋白酶活性检测第72-73页
 2 结果第73-76页
   ·mtHSP70过表达抑制细胞程序性死亡过程中的活性氧爆发第73-74页
   ·mtHSP70过表达维持细胞程序性死亡早期线粒体膜电势第74-75页
   ·过表达mtHSP70显著抑制细胞程序性死亡过程中类Caspase-3活性第75-76页
 3 分析与讨论第76-81页
   ·mtHSP70与线粒体膜电势稳定性第76-77页
   ·类Caspase在植物细胞中作用第77-78页
   ·mtHSP70作用于细胞程序性死亡过程中可能存在的分子机制第78-81页
全文结论第81-83页
创新之处第83-85页
存在问题与展望第85-87页
参考文献第87-103页
附录 Ⅰ第103-110页
附录 Ⅱ第110-117页
攻读博士学位期间发表与投送的论文第117-119页
致谢第119页

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