摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略语词汇表 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-31页 |
一、植物细胞程序性死亡研究进展 | 第13-26页 |
1 植物细胞程序性死亡 | 第13-23页 |
2 细胞程序性死亡的亚细胞水平研究 | 第23-25页 |
3 植物细胞程序性死亡相关基因研究 | 第25-26页 |
二、热激蛋白与细胞程序性死亡研究 | 第26-31页 |
1 热激蛋白概述 | 第26-27页 |
2 热激蛋白与细胞程序性死亡 | 第27-28页 |
3 线粒体热激蛋白70与细胞程序性死亡研究概述 | 第28-29页 |
4 本研究目的与意义 | 第29-31页 |
第二章 水稻mtHSP70过表达载体的构建及遗传转化 | 第31-47页 |
1 材料与方法 | 第31-40页 |
·材料 | 第31页 |
·pCAMBIA1304-mtHSP70表达载体的构建 | 第31-37页 |
·农杆菌介导水稻遗传转化 | 第37-38页 |
·水稻悬浮细胞系的建立 | 第38-39页 |
·转基因水稻悬浮细胞系的检测 | 第39-40页 |
2 结果 | 第40-45页 |
·pCAMBIA1304-mtHSP70表达载体的构建 | 第40-43页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第43-44页 |
·转基因水稻悬浮细胞PCR的检测 | 第44-45页 |
3 分析与讨论 | 第45-47页 |
水稻悬浮细胞为材料研究植物PCD过程 | 第45-47页 |
第三章 过表达mtHSP70抑制水稻悬浮细胞程序性死亡 | 第47-71页 |
1 材料与方法 | 第47-54页 |
·材料、主要试剂与仪器 | 第47-48页 |
·热激诱导程序性死亡最适条件优化 | 第48-49页 |
·mtHSP70的亚细胞定位 | 第49-50页 |
·不同细胞系热激前后mtHSP70的qPCR分析 | 第50-51页 |
·原生质体程序性死亡过程中细胞核变化 | 第51页 |
·原生质体TUNEL检测 | 第51-52页 |
·mtHSP70原生质体程序性死亡的抑制作用 | 第52-53页 |
·细胞质中Cyt c的Western blot检测 | 第53-54页 |
2 结果 | 第54-67页 |
·水稻原生质体程序性死亡最适热激诱导条件 | 第54-55页 |
·mtHSP70的亚细胞定位 | 第55-58页 |
·悬浮细胞mtHSP70转录水平的变化 | 第58-59页 |
·原生质体程序性死亡过程中的细胞核形态变化 | 第59-61页 |
·细胞程序性死亡过程中的染色体DNA断裂 | 第61-64页 |
·原生质体程序性死亡过程中的死亡率及DNA片段化 | 第64-66页 |
·热激诱导细胞程序性死亡早期细胞色素C的释放 | 第66-67页 |
3 分析与讨论 | 第67-71页 |
·胁迫处理条件下诱发mtHSP70产生 | 第67-68页 |
·植物DNA Ladder提取方法改进 | 第68-71页 |
第四章 过表达mtHSP70抑制细胞程序性死亡发生机制的初步研究 | 第71-81页 |
1 材料与方法 | 第71-73页 |
·材料、主要试剂与仪器 | 第71页 |
·线粒体膜通透性检测 | 第71-72页 |
·原生质体程序性死亡过程中H_2DCFDA活性氧染色 | 第72页 |
·类Caspase-3蛋白酶活性检测 | 第72-73页 |
2 结果 | 第73-76页 |
·mtHSP70过表达抑制细胞程序性死亡过程中的活性氧爆发 | 第73-74页 |
·mtHSP70过表达维持细胞程序性死亡早期线粒体膜电势 | 第74-75页 |
·过表达mtHSP70显著抑制细胞程序性死亡过程中类Caspase-3活性 | 第75-76页 |
3 分析与讨论 | 第76-81页 |
·mtHSP70与线粒体膜电势稳定性 | 第76-77页 |
·类Caspase在植物细胞中作用 | 第77-78页 |
·mtHSP70作用于细胞程序性死亡过程中可能存在的分子机制 | 第78-81页 |
全文结论 | 第81-83页 |
创新之处 | 第83-85页 |
存在问题与展望 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-103页 |
附录 Ⅰ | 第103-110页 |
附录 Ⅱ | 第110-117页 |
攻读博士学位期间发表与投送的论文 | 第117-119页 |
致谢 | 第119页 |