| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略语及英文对照 | 第8-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-21页 |
| ·线粒体和植物细胞质雄性不育 | 第12-13页 |
| ·VDAC 与线粒体的功能 | 第13-15页 |
| ·VDAC 的结构 | 第15-17页 |
| ·VDAC 与细胞凋亡 | 第17-19页 |
| ·植物VDAC 的研究进展 | 第19-20页 |
| ·本研究的主要内容、目的及意义 | 第20-21页 |
| 第2章 水稻OSVDAC3 和OSVDAC5 蛋白的原核表达 | 第21-40页 |
| ·引言 | 第21页 |
| ·材料、试剂和设备 | 第21-23页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·实验试剂 | 第21-23页 |
| ·实验设备 | 第23页 |
| ·PCR 引物 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-33页 |
| ·pET-30a-osvdac3 和-osvdac 5 原核表达载体的构建 | 第23-29页 |
| ·提取 YTB 总 RNA | 第23页 |
| ·制备 cDNA | 第23-24页 |
| ·SDS 碱裂解法提取质粒DNA | 第24-25页 |
| ·osvdac3 和osvdac5 基因的扩增 | 第25页 |
| ·osvdac3 和osvdac5 目的片段的回收 | 第25页 |
| ·PCR 产物osvdac3 和osvdac5 目的片段的克隆 | 第25-27页 |
| ·osvdac 3 和osvdac5 TA 克隆的限制性内切酶酶切 | 第27页 |
| ·酶切产物的回收 | 第27页 |
| ·载体pET-30a(+)质粒限制性内切酶酶切 | 第27-28页 |
| ·酶切产物的回收 | 第28页 |
| ·目的片段和载体的连接 | 第28页 |
| ·大肠杆菌热击感受态细胞的制备和转化 | 第28-29页 |
| ·重组质粒 pET-30a-osvdac 3 和-osvdac5 的鉴定 | 第29页 |
| ·pET-30a- osvdac3 和-osvdac5 融合蛋白的诱导表达 | 第29-31页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第29页 |
| ·菌体超声波破碎 | 第29-30页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第30-31页 |
| ·目的蛋白的质谱鉴定 | 第31页 |
| ·重组OSVDAC3 和OSVDAC5 蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| ·OSVDAC3 和 OSVDAC5 的 Western blot 分析 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-39页 |
| ·TA-osvdac 3 和 TA-osvdac5 克隆载体的构建 | 第33页 |
| ·pET-30a-osvdac3 和- osvdac5 表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·pET-30a(+)-OSVDAC 3 和-OSVDAC5 融合蛋白的诱导表达 | 第34-35页 |
| ·目的蛋白的质谱鉴定 | 第35-36页 |
| ·OSVDAC 3和OSVDAC5蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| ·OSVDAC3和OSVDAC5蛋白的western blot分析 | 第37-38页 |
| ·交叉杂交检测多克隆抗体特异性 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| 第3章 水稻2 个vdac 基因的遗传转化 | 第40-46页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·材料与方法 | 第40-41页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·实验试剂 | 第41页 |
| ·实验设备 | 第41页 |
| ·PCR 引物 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-44页 |
| ·pCAMBIA1302-osvdac3 和-osvdac5 表达载体的构建 | 第41-43页 |
| ·SDS 碱裂解法提取质粒DNA | 第41页 |
| ·目的基因及pCAMBIA1302 的双酶切与回收 | 第41-42页 |
| ·目的基因与pCAMBIA1302 的连接 | 第42页 |
| ·重组质粒的转化与鉴定 | 第42-43页 |
| ·pCAMBIA1302-osvdac3 和-osvdac5 表达载体的遗传转化 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-45页 |
| ·pCAMBIA1302-osvdac3 和 pCAMBIA1302-osvdac5 重组质粒的 鉴定 | 第44-45页 |
| ·pCAMBIA1302-osvdac3 和 pCAMBIA1302-osvdac5 表达载体的 遗传转化 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
