| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 前言 | 第10-19页 |
| 1 布鲁氏菌的流行病学 | 第10-11页 |
| 2 布鲁氏菌的病原学研究 | 第11-12页 |
| 3 布鲁氏菌的主要表面蛋白 | 第12-13页 |
| 4 bp26蛋白的特性 | 第13页 |
| 5 布鲁氏菌病诊断方法研究 | 第13-17页 |
| ·病原学诊断 | 第14页 |
| ·血清学诊断方法 | 第14-16页 |
| ·分子生物学诊断 | 第16-17页 |
| 6 布鲁氏菌病的防治措施 | 第17-18页 |
| 7 本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 材料与方法 | 第19-30页 |
| 1 材料 | 第19-24页 |
| ·样本 | 第19页 |
| ·质粒、细胞 | 第19页 |
| ·酶与试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·溶液及培养基 | 第21-24页 |
| 2 方法 | 第24-30页 |
| ·引物的设计与合成 | 第24页 |
| ·布鲁氏菌选择性培养基的配制 | 第24页 |
| ·布鲁氏菌的培养 | 第24-25页 |
| ·布鲁氏菌的纯培养 | 第25页 |
| ·布鲁氏菌的生化鉴定 | 第25页 |
| ·布鲁氏菌的涂片染色镜检 | 第25页 |
| ·布鲁氏菌bp26基因的PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·bp26基因与pMD 18-T Simple克隆载体的连接 | 第26页 |
| ·重组质粒的转化 | 第26-27页 |
| ·转化菌落的鉴定 | 第27页 |
| ·核苷酸序列序列测定及分析 | 第27页 |
| ·pMD 18-T-bp26及pGEX-4T-1质粒的酶切回收 | 第27-28页 |
| ·bp26基因与表达载体的连接、转化和筛选 | 第28页 |
| ·原核表达载体的鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组表达质粒的诱导表达 | 第29页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第29页 |
| ·表达产物的Western blotting分析 | 第29-30页 |
| 结果 | 第30-37页 |
| 1 选择培养基上菌落生长情况 | 第30页 |
| 2 H_2 O_2 的鉴定结果 | 第30-31页 |
| 3 尿素酶氧化实验 | 第31页 |
| 4 布鲁氏菌的涂片染色镜检 | 第31页 |
| 5 Amos PCR扩增结果 | 第31-32页 |
| 6 目的基因的扩增 | 第32-33页 |
| 7 重组克隆质粒的鉴定 | 第33-34页 |
| 8 重组克隆质粒的序列分析 | 第34页 |
| 9 bp26外膜蛋白结构预测 | 第34-35页 |
| 10 重组表达质粒的鉴定 | 第35页 |
| 11 原核表达产物的SDS-PAGE分析 | 第35-36页 |
| 12 表达产物的We stern blotting | 第36-37页 |
| 讨论 | 第37-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简介 | 第48-49页 |
| 硕士期间发表并参与的论文 | 第49页 |
