中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
前言 | 第10-12页 |
材料与方法 | 第12-25页 |
1. 实验材料 | 第12-16页 |
·菌株和细胞系及实验动物 | 第12页 |
·质粒载体 | 第12-14页 |
·工具酶及分子量标准 | 第14页 |
·试剂盒 | 第14-15页 |
·主要化学试剂(按试剂公司分类) | 第15页 |
·分析软件 | 第15-16页 |
·引物序列 | 第16页 |
2 实验方法 | 第16-25页 |
·神经干细胞的分离与原代培养 | 第16页 |
·pSNAV2.0-CMV-SHH-N-IRES-EGFP 载体的构建与SHH-N 的测序与鉴定 | 第16-23页 |
·.重组腺相关病毒rAAV2/1-SHH-N 的构建与包装 | 第23页 |
·rAAV2/1-SHH-N 体外转染神经干细胞 | 第23-24页 |
·Real-Time PCR 实验 | 第24页 |
·统计学方法 | 第24-25页 |
实验流程 | 第25-26页 |
实验结果 | 第26-28页 |
1. 神经干细胞的观察 | 第26-27页 |
2. 克隆得到SHH-N 编码序列并构建pSNAV2.0-CMV-IRES-EGFP 载体 | 第27页 |
3. SHH-N 在293T 细胞中表达 | 第27页 |
4. Western Blot 检测SHH-N 蛋白表达 | 第27页 |
5. 实时定量PCR 检测SHH 信号通路因子和靶基因的转录 | 第27-28页 |
6. rAAV-SHH-N-EGFP 转染NSCs 后EGFP 报告蛋白的表达观察 | 第28页 |
讨论 | 第28-30页 |
参考文献 | 第30-34页 |
综述 神经干细胞自我更新调节相关信号通路与分子研究进展 | 第34-44页 |
摘要 | 第34页 |
Abstract | 第34-39页 |
参考文献 | 第39-44页 |
附录 | 第44-45页 |
致谢 | 第45页 |