| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩写词 | 第7-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-19页 |
| ·研究背景 | 第11页 |
| ·研究路线 | 第11-12页 |
| ·abro1 基因的转录调控机制研究 | 第11-12页 |
| ·小鼠abro1基因敲除载体的构建 | 第12页 |
| ·国内外相关文献综述 | 第12-19页 |
| ·ABRO1 背景介绍 | 第12-13页 |
| ·转录调控 | 第13-16页 |
| ·基因敲除 | 第16-19页 |
| 第2章 abro1 基因转录调控机制的研究 | 第19-57页 |
| ·实验材料 | 第19-22页 |
| ·菌株/质粒/细胞系/实验动物 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19-20页 |
| ·需配制试剂 | 第20-22页 |
| ·实验方法 | 第22-39页 |
| ·5’RACE 确定 abro1 基因转录起点 | 第22-24页 |
| ·pGL3-Basic-2105 重组质粒构建 | 第24-28页 |
| ·缩小 abro1 特异转录激活因子的结合区域 | 第28-29页 |
| ·分析潜在的abro1基因特异转录激活因子 | 第29-31页 |
| ·构建潜在转录激活因子的蛋白表达载体或干涉载体 | 第31-35页 |
| ·验证潜在转录激活因子对 abro1 基因启动子的影响 | 第35-37页 |
| ·分析核转录因子与abro1启动子的结合特性 | 第37-39页 |
| ·实验结果 | 第39-54页 |
| ·abro1 转录起始位点位于起始密码子上游 13bp | 第39-42页 |
| ·成功构建 pGL3-Basic-2105 重组质粒 | 第42-44页 |
| ·abro1 特异转录激活因子结合于 -89~-60 区间 | 第44-47页 |
| ·潜在的 abro1 基因特异转录激活因子为 YY1、C-ETS-1、CBF1 | 第47-49页 |
| ·成功构建 YY1、C-ETS-1、CBF1 过表达载体和 YY1 干涉载体 | 第49-50页 |
| ·YY1 可以抑制 abro1 基因启动子活性 | 第50-52页 |
| ·YY1 可以与 abro1 基因启动子结合 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| ·本章小结 | 第55-57页 |
| 第3章 小鼠 abro1 基因敲除载体的构建 | 第57-69页 |
| ·实验材料 | 第57-58页 |
| ·菌株与质粒 | 第57页 |
| ·试剂 | 第57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·需配制试剂 | 第57-58页 |
| ·实验方法 | 第58-61页 |
| ·小鼠abro1基因敲除策略制定 | 第58页 |
| ·同源臂引物设计 | 第58页 |
| ·小鼠肝脏组织基因组 DNA 提取 | 第58-59页 |
| ·PfrtI -3’ARM 重组质粒的构建 | 第59-60页 |
| ·pfrtI-3’ARM-5’ARM 重组质粒的构建 | 第60-61页 |
| ·中靶 ES 细胞 Southern-Blotting 筛选方案设计 | 第61页 |
| ·实验结果与讨论 | 第61-68页 |
| ·敲除策略 | 第61-62页 |
| ·同源臂引物设计 | 第62页 |
| ·小鼠基因组 DNA 提取 | 第62-64页 |
| ·PfrtI-3’ARM 的构建 | 第64-65页 |
| ·PfrtI -3’ARM-5’ARM 的构建 | 第65-67页 |
| ·中靶 ES 细胞 Southern-Blotting 筛选方案设计 | 第67-68页 |
| ·本章小结 | 第68-69页 |
| 结论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 附录 | 第75-79页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
