| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 文献综述 | 第12-27页 |
| 第一章 猪繁殖与呼吸综合征及其病原的研究概况 | 第12-21页 |
| ·PRRS概述 | 第12-13页 |
| ·PRRS流行病学和致病机理研究 | 第13页 |
| ·PRRS的流行病学研究 | 第13页 |
| ·致病机理 | 第13页 |
| ·PRRSV的基本特性 | 第13-15页 |
| ·PRRSV的分类地位和类型 | 第13-14页 |
| ·PRRSV形态特征及理化特性 | 第14页 |
| ·PRRSV的生物学特性 | 第14-15页 |
| ·PRRSV基因组结构及编码的主要蛋白 | 第15-17页 |
| ·PRRSV的基因组结构 | 第15-16页 |
| ·PRRSV主要蛋白 | 第16-17页 |
| ·PRRSV疫苗研究概况 | 第17-21页 |
| ·灭活苗 | 第17-18页 |
| ·弱毒苗 | 第18页 |
| ·新型疫苗 | 第18-21页 |
| 第二章 杆状病毒及其应用的研究概况 | 第21-27页 |
| ·杆状病毒的分类 | 第21-22页 |
| ·杆状病毒的基因组 | 第22-23页 |
| ·杆状病毒基因组概述 | 第22页 |
| ·杆状病毒的感染方式和基因表达 | 第22-23页 |
| ·杆状病毒在生物科学中的应用 | 第23-27页 |
| ·重组杆状病毒表达系统的发展 | 第23页 |
| ·杆状病毒/昆虫细胞表达系统 | 第23-24页 |
| ·杆状病毒的表面展示技术 | 第24-25页 |
| ·杆状病毒在疫苗中的应用 | 第25页 |
| ·杆状病毒MultiBac系统 | 第25-27页 |
| 试验研究 | 第27-60页 |
| 第三章 GP5缺失型PRRSV的分离鉴定 | 第27-34页 |
| ·材料 | 第27-29页 |
| ·病料和细胞 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·仪器 | 第27-28页 |
| ·细胞培养所需溶液 | 第28页 |
| ·RT-PCR所需溶液 | 第28-29页 |
| ·引物 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-30页 |
| ·病料的处理 | 第29页 |
| ·细胞的复苏和培养 | 第29页 |
| ·病毒分离培养 | 第29-30页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第30页 |
| ·RNA反转录 | 第30页 |
| ·RT-PCR鉴定 | 第30页 |
| ·病毒中和试验鉴定 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-32页 |
| ·病料PCR鉴定结果 | 第30-31页 |
| ·病毒分离的结果 | 第31页 |
| ·接毒细胞PCR检测结果 | 第31-32页 |
| ·血清中和试验结果 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第四章 HZ1007株NSP2和GP5基因的序列分析 | 第34-45页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·毒株、细胞和菌种 | 第34-35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·仪器 | 第35页 |
| ·试验所需溶液 | 第35-36页 |
| ·使用软件 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·CaCl2法感受态细胞的制备 | 第36页 |
| ·GP5和NSP2基因的扩增及胶回收 | 第36-37页 |
| ·胶回收片段连接pMD-18TVector及连接产物转化 | 第37页 |
| ·基因测序 | 第37页 |
| ·HZ1007株序列相似性分析 | 第37页 |
| ·HZ1007株基因系统进化分析 | 第37页 |
| ·HZ1007株氨基酸序列比对分析 | 第37页 |
| ·HZ1007株GP5抗原性预测分析 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-43页 |
| ·HZ1007株序列相似性分析结果 | 第38-39页 |
| ·HZ1007株进化树分析结果 | 第39-40页 |
| ·HZ1007株氨基酸比对分析结果 | 第40-43页 |
| ·HZ1007株GP5抗原性分析结果 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第五章 GP5和M蛋白杆状病毒载体的构建 | 第45-60页 |
| ·材料 | 第45-47页 |
| ·细胞、菌体和质粒 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·仪器 | 第45页 |
| ·YC法制备的感受态细胞 | 第45-46页 |
| ·引物 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-54页 |
| ·对照质粒pFBDM-p10-gp64-EGFP-ph-CMV-dsRed的构建 | 第47-50页 |
| ·重组质粒pFBDM-IE1-gp64-Flagellin-InvC-ph-cmv-3HA-mtsynGP5-2A-GP6的构建 | 第50-53页 |
| ·对照质粒重组杆状病毒的包装 | 第53-54页 |
| ·结果 | 第54-59页 |
| ·对照质粒pFBDM-p10-gp64-EGFP-ph-CMV-dsRed | 第54-56页 |
| ·重组质粒pFBDM-IE1-gp64-Flagellin-InvC-ph-cmv-3HA-mtsynGP5-2A-GP6 | 第56-58页 |
| ·对照质粒重组病毒感染细胞 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 中英文缩略词 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |
