| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一篇研究报告 | 第13-105页 |
| 第一章 基因Ｃ型鸭甲肝病毒致人工感染雏鸭组织细胞凋亡及其动态病理学和抗原定位研究 | 第13-76页 |
| 1 材料 | 第14-15页 |
| ·DHAV-C 毒株 | 第14页 |
| ·实验动物 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14页 |
| ·主要仪器 | 第14页 |
| ·主要试剂的配制 | 第14-15页 |
| 2 方法 | 第15-21页 |
| ·兔抗 DHAV-C 高免血清的制备 | 第15页 |
| ·DHAV-C 抗原的制备 | 第15页 |
| ·兔抗 DHAV-C 高免血清的制备 | 第15页 |
| ·DHAV-C 人工感染 SPF 雏鸭的病理学观察 | 第15-17页 |
| ·SPF 雏鸭的孵化 | 第15-16页 |
| ·DHAV-C SWUN3504 病毒的处理 | 第16页 |
| ·SPF 雏鸭的人工感染 | 第16页 |
| ·病变的观察及样品的采集处理 | 第16页 |
| ·组织切片的制作 | 第16页 |
| ·组织切片的苏木素伊红（H·E）染色 | 第16-17页 |
| ·H·E 染色结果的观察和记录 | 第17页 |
| ·DHAV-C 人工感染 SPF 雏鸭组织内病毒抗原的免疫组化染色观察 | 第17-19页 |
| ·组织切片的间接免疫酶组织化学染色程序 | 第17-18页 |
| ·间接免疫酶组织化学染色条件的优化 | 第18-19页 |
| ·特异性试验 | 第19页 |
| ·图片的采集与数据分析 | 第19页 |
| ·DHAV-C 感染雏鸭后致组织细胞凋亡的研究 | 第19-21页 |
| ·细胞凋亡染色程序 | 第19-20页 |
| ·Proteinase K 及 TUNEL 反应混合液孵育时间的优化 | 第20页 |
| ·特异性试验 | 第20-21页 |
| 3 结果 | 第21-72页 |
| ·兔抗 DHAV-C 高免血清的琼扩检测结果 | 第21页 |
| ·DHAV-C 人工感染 SPF 雏鸭的临床症状和组织病理变化 | 第21-29页 |
| ·感染雏鸭的临床症状 | 第21-22页 |
| ·雏鸭的病理剖检变化 | 第22-23页 |
| ·感染雏鸭的组织病理学变化 | 第23-29页 |
| ·DHAV-C 人工感染 SPF 雏鸭后组织内病毒抗原的动态分布 | 第29-52页 |
| ·间接免疫酶组织化学染色条件的优化结果 | 第29-30页 |
| ·特异性试验结果 | 第30页 |
| ·IPP6 软件的图像分析结果 | 第30-31页 |
| ·雏鸭组织内病毒的定位及动态分布 | 第31-52页 |
| ·DHAV-C 感染雏鸭后致组织细胞凋亡的检测结果 | 第52-72页 |
| ·Proteinase K 及 TUNEL 反应混合液孵育时间的优化结果 | 第52页 |
| ·特异性试验结果 | 第52-53页 |
| ·DHAV-C 感染 SPF 雏鸭各组织器官的细胞凋亡检测结果 | 第53-72页 |
| 4 讨论 | 第72-76页 |
| ·DHAV-C 人工感染 SPF 雏鸭引起的病理学变化特征 | 第72-73页 |
| ·DHAV-C 病毒抗原分布与其致病的关系 | 第73-74页 |
| ·DHAV-C 致 SPF 雏鸭组织细胞凋亡在其感染致病中的作用 | 第74页 |
| ·组织病理变化、病毒分布和细胞凋亡三者与病毒致病性的关系 | 第74-76页 |
| 第二章 14 株基因 C 型鸭甲肝病毒分离株 VP1 基因变异及其编码蛋白的抗原表位分析 | 第76-91页 |
| 1 材料 | 第76-77页 |
| ·毒（菌）株和载体 | 第76-77页 |
| ·试验动物 | 第77页 |
| ·主要试剂 | 第77页 |
| ·主要仪器 | 第77页 |
| ·培养基的配制 | 第77页 |
| 2 方法 | 第77-80页 |
| ·设计并合成引物序列 | 第77-78页 |
| ·病毒 RNA 的提取及 RT-PCR 扩增 VP1 基因 | 第78页 |
| ·DHAV-C VP1 基因的克隆及测序 | 第78-79页 |
| ·VP1 基因的生物信息学分析 | 第79-80页 |
| ·VP1 基因的序列比较分析 | 第79-80页 |
| ·VP1 基因编码蛋白的生物信息学分析 | 第80页 |
| 3 结果 | 第80-89页 |
| ·RT-PCR 扩增结果 | 第80-81页 |
| ·阳性克隆质粒的 PCR 和酶切鉴定 | 第81页 |
| ·序列同源性分析结果 | 第81-85页 |
| ·VP1 基因系统进化树 | 第85页 |
| ·VP1 基因推导氨基酸序列比对分析结果 | 第85-88页 |
| ·VP1 蛋白的二级结构与功能结构域分析结果 | 第88-89页 |
| ·VP1 蛋白氨基酸序列的亲水性、抗原指数和表面可及性分析结果 | 第89页 |
| 4 讨论 | 第89-91页 |
| 第三章 基因C型鸭甲肝病毒 VP1 基因的原核表达 | 第91-104页 |
| 1 材料 | 第91-94页 |
| ·毒（菌）株、血清和载体 | 第91-92页 |
| ·试验动物 | 第92页 |
| ·主要试剂 | 第92页 |
| ·主要仪器 | 第92页 |
| ·主要试剂的配制 | 第92-94页 |
| 2 方法 | 第94-98页 |
| ·VP1 基因的原核表达 | 第94-96页 |
| ·引物设计与合成 | 第94页 |
| ·病毒 RNA 的提取与 cDNA 的合成 | 第94页 |
| ·巢式 PCR 扩增 VP1 全基因 | 第94-95页 |
| ·pMD19-T- VP1 载体的构建 | 第95页 |
| ·pET-32a(+)- VP1 重组表达载体的构建 | 第95-96页 |
| ·表达工程菌的筛选及 VP1 重组蛋白的表达 | 第96页 |
| ·表达产物的 SDS-PAGE 检测 | 第96页 |
| ·重组 VP1 蛋白的纯化 | 第96-97页 |
| ·重组 VP1 蛋白表达形式的鉴定 | 第96-97页 |
| ·重组 VP1 蛋白包涵体的洗涤纯化 | 第97页 |
| ·重组 VP1 蛋白的Western-blot检测 | 第97-98页 |
| ·电转印 | 第97页 |
| ·免疫印迹检测 | 第97-98页 |
| 3 结果 | 第98-102页 |
| ·巢式 RT-PCR 扩增结果 | 第98页 |
| ·VP1 基因的克隆鉴定及测序结果 | 第98-99页 |
| ·pET-32a(+)-VP1 重组质粒的酶切鉴定及质粒 PCR 鉴定结果 | 第99-100页 |
| ·重组 VP1 蛋白表达条件筛选结果及表达产物鉴定结果 | 第100-101页 |
| ·纯化的 VP1 重组蛋白 | 第101页 |
| ·VP1 重组融合蛋白 Western-blot 检测结果 | 第101-102页 |
| 4 讨论 | 第102-104页 |
| 第四章 结论与创新点 | 第104-105页 |
| 第二篇 文献综述鸭甲肝病毒研究进展 | 第105-110页 |
| 1 鸭病毒性肝炎及其病原 | 第105-106页 |
| 2 DHAV 的分型 | 第106-107页 |
| 3 DHAV 的致病机理 | 第107-108页 |
| 4 DHAV 的基因组结构特 | 第108-109页 |
| 5 展望 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-115页 |
| 附录 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
