| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-18页 |
| 缩写词简表 | 第18-19页 |
| 前言 | 第19-21页 |
| 第一部分 BRD7多克隆抗体的制备及人胚胎组织BRD7蛋白表达分析 | 第21-51页 |
| 第一章 材料与方法 | 第21-38页 |
| 第一节 材料 | 第21-26页 |
| 1 目的基因与引物 | 第21页 |
| 2 菌株与质粒载体 | 第21-22页 |
| 3 免疫原与动物 | 第22页 |
| 4 人胚胎组织标本 | 第22-23页 |
| 5 试剂 | 第23页 |
| 6 自配试剂 | 第23-25页 |
| 7 主要仪器 | 第25页 |
| 8 动物免疫用器材 | 第25-26页 |
| 第二节 方法 | 第26-38页 |
| 1 GST-BRD7N重组原核表达载体的构建 | 第26-29页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·PCR扩增及PCR产物的回收与纯化 | 第26页 |
| ·酶切反应 | 第26-27页 |
| ·连接反应 | 第27页 |
| ·转化 | 第27-28页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第28-29页 |
| 2 GST-BRD7N融合蛋白的诱导表达、鉴定与纯化 | 第29-31页 |
| ·GST-BRD7N融合蛋白的诱导表达 | 第29页 |
| ·诱导表达的GST-BRD7N融合蛋白的鉴定 | 第29-30页 |
| ·GST-BRD7N融合蛋白最佳诱导条件筛选 | 第30-31页 |
| ·GST-BRD7N融合蛋白的纯化与定量 | 第31页 |
| 3 抗BRD7N多克隆抗体的制备 | 第31-35页 |
| ·动物免疫 | 第31-32页 |
| ·抗血清采集与保存 | 第32-33页 |
| ·抗血清效价测定 | 第33-34页 |
| ·兔抗BRD7抗血清的纯化 | 第34-35页 |
| ·兔抗BRD7抗血清特异性的鉴定 | 第35页 |
| 4 人胚胎组织内源性BRD7蛋白表达分析 | 第35-38页 |
| ·western blot | 第35页 |
| ·免疫组化 | 第35-38页 |
| 第二章 结果 | 第38-48页 |
| 1 GST-BRD7N融合蛋白重组原核表达载体pGEX-4T-BRD7N的构建 | 第38页 |
| 2 GST-BRD7N融合蛋白的诱导表达与纯化 | 第38-40页 |
| 3 BRD7多克隆抗体的制备与特异性鉴定 | 第40-43页 |
| 4 BRD7蛋白在人胚胎多种组织中的表达 | 第43-48页 |
| 第三章 讨论 | 第48-51页 |
| 1 特异性抗体的成功制备为BRD7基因功能研究提供了重要工具 | 第48-49页 |
| 2 人胚胎组织BRD7蛋白的组织表达谱 | 第49-51页 |
| 第二部分 结直肠癌中BRD7蛋白表达及其临床意义 | 第51-72页 |
| 第一章 材料与方法 | 第51-60页 |
| 第一节 材料 | 第51-52页 |
| 1 组织样本和组织微阵列 | 第51页 |
| 2 试剂 | 第51-52页 |
| 3 主要仪器和分析软件 | 第52页 |
| 第二节 方法 | 第52-60页 |
| 1 组织微阵列的制作 | 第52-58页 |
| 2 免疫组化 | 第58-59页 |
| 3 统计学分析 | 第59-60页 |
| 第二章 结果 | 第60-68页 |
| 1 组织微阵列的制作 | 第60-62页 |
| 2 结直肠癌中BRD7基因的蛋白表达 | 第62-66页 |
| 3 BRD7蛋白表达与结直肠癌临床病理特征的关系 | 第66-68页 |
| 第三章 讨论 | 第68-72页 |
| 1 组织微阵列是研究基因原位表达的高通量技术平台 | 第68-69页 |
| 2 结直肠癌BRD7蛋白表达及其与临床病理特征的关系 | 第69-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 综述 | 第79-94页 |
| 致谢 | 第94-96页 |
| 个人简介 | 第96页 |
