稻瘟病菌MNH1和MgYCA1基因的克隆与功能分析
致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
第一章:文献综述 | 第11-27页 |
·稻瘟病与稻瘟病菌 | 第11页 |
·稻瘟病菌的病害和侵染循环 | 第11-14页 |
·孢子萌发 | 第12页 |
·附着胞的分化和成熟 | 第12页 |
·侵入栓形成和侵入 | 第12-13页 |
·侵入后的菌丝分化与扩展 | 第13页 |
·产孢与再侵染 | 第13-14页 |
·稻瘟病菌的重要功能基因 | 第14-26页 |
·参与产孢过程的基因 | 第14页 |
·附着胞分化相关基因 | 第14-19页 |
·附着胞的成熟与膨压形成过程中的功能基因 | 第19-21页 |
·侵入栓形成及侵入相关基因 | 第21页 |
·侵入后菌丝分化及扩展相关的基因 | 第21-22页 |
·细胞自噬基因 | 第22-23页 |
·其它致病性相关基因 | 第23-26页 |
·本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
第二章:材料与方法 | 第27-50页 |
·MNH1、MgYCA1基因的确定与序列比对 | 第27页 |
·实验材料 | 第27-31页 |
·实验使用的菌株、质粒、文库、试剂等材料 | 第27-28页 |
·培养基配制 | 第28-31页 |
·菌株的保存与培养 | 第31页 |
·DNA相关操作 | 第31-44页 |
·常规PCR、长片段PCR(>4kb) | 第31-34页 |
·PCR产物的克隆 | 第34页 |
·序列测定 | 第34页 |
·DNA克隆程序 | 第34-39页 |
·基因组DNA提取 | 第39-40页 |
·Southern杂交 | 第40-43页 |
·DNA和蛋白序列分析 | 第43-44页 |
·MNH1、MgYCA1基因敲除及突变子功能分析 | 第44-45页 |
·基因置换载体的构建 | 第44页 |
·稻瘟病菌原生质体的制备与转化 | 第44-45页 |
·MNH1、MgYCA1基因的GFP表达分析 | 第45-46页 |
·融合载体的构建 | 第45页 |
·稻瘟病菌eGFP转化子的荧光观察 | 第45-46页 |
·稻瘟病菌突变体的形态学观察 | 第46-49页 |
·生长速度与产孢量 | 第46页 |
·稻瘟病菌产孢培养、孢子收集和附着胞的诱导 | 第46页 |
·水稻(大麦)离体接种 | 第46-47页 |
·水稻(大麦)苗喷雾接种 | 第47页 |
·稻瘟病菌的有性杂交 | 第47-48页 |
·酵母分析 | 第48-49页 |
·稻瘟菌菌侵染过程的组织病理学观察 | 第49-50页 |
第三章:MNH1基因的克隆与功能分析 | 第50-64页 |
·MNH1基因的克隆和序列分析 | 第50-53页 |
·MNH1蛋白的功能预测 | 第53-54页 |
·MNH1基因敲除载体的构建及突变体的获得 | 第54-57页 |
·载体构建策略 | 第54-55页 |
·△MNH1突变子的获得 | 第55-57页 |
·△MNH1突变子表型分析 | 第57-61页 |
·△MNH1突变子的菌落形态 | 第57-58页 |
·△MNH1突变子的生长速度 | 第58页 |
·△MNH1突变子的产孢量 | 第58-59页 |
·孢子萌发和附着胞形成 | 第59页 |
·交配试验 | 第59-60页 |
·△MNH1突变子在YPEG上的表型分析 | 第60-61页 |
·△MNH1突变体致病性分析 | 第61-62页 |
·喷雾接种 | 第61页 |
·离体接种 | 第61-62页 |
·MNH1基因时空表达分析 | 第62-64页 |
·融合载体的构建 | 第62-63页 |
·转化子的荧光表达 | 第63-64页 |
第四章:MgYCA1基因的克隆与功能分析 | 第64-76页 |
·MgYCA1基因的克隆和序列分析 | 第64-66页 |
·MgYCA1蛋白的功能预测 | 第66-67页 |
·MgYCA1基因同源性分析 | 第67-69页 |
·MgYCA1基因置换载体的构建 | 第69页 |
·△MgYCA1突变子的获得 | 第69-71页 |
·△MgYCA1突变子表型分析 | 第71-74页 |
·△MgYCA1突变子的菌落形态与生长速度 | 第71-72页 |
·△mgYCA1突变子的产孢量 | 第72-73页 |
·△MgYCA1突变子的分生孢子萌发、附着胞形成 | 第73页 |
·交配试验 | 第73-74页 |
·△MgYCA1突变子致病性分析 | 第74-75页 |
·喷雾接种 | 第74-75页 |
·离体接种 | 第75页 |
·MgYCA1基因时空表达分析 | 第75-76页 |
第五章:讨论与总结 | 第76-79页 |
参考文献 | 第79-84页 |