| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略语对照表 | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-15页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第15-49页 |
| ·实验材料 | 第15-19页 |
| ·工具酶、限制性内切酶、分子量标准及试剂盒 | 第15页 |
| ·菌株与细胞株 | 第15页 |
| ·PCR扩增用引物 | 第15-17页 |
| ·主要试剂及抗体 | 第17页 |
| ·cDNA及质粒载体 | 第17页 |
| ·实验动物 | 第17-18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18-19页 |
| ·常用分析软件 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-49页 |
| ·目的蛋白的原核表达 | 第19-35页 |
| ·组织或细胞总RNA的提取 | 第19-20页 |
| ·反转录反应 | 第20页 |
| ·PCR反应 | 第20页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第20-21页 |
| ·琼脂糖凝胶分离DNA片段的回收 | 第21-22页 |
| ·E.coli感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| ·质粒的小量提取 | 第23-24页 |
| ·DNA分子的酶切与连接 | 第24页 |
| ·DNA转化感受态细胞 | 第24-25页 |
| ·PCR鉴定重组菌落——菌落PCR(Colony PCR) | 第25-26页 |
| ·菌种的保藏 | 第26页 |
| ·目的蛋白的小量诱导表达 | 第26-27页 |
| ·目的蛋白的大量诱导表达 | 第27-28页 |
| ·包涵体的纯化 | 第28页 |
| ·His-tag蛋白的镍柱纯化 | 第28-29页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第29-30页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第30-32页 |
| ·Semi-dry Western blot(蛋白印迹) | 第32-34页 |
| ·目的蛋白与Sepharose 4B的交联 | 第34-35页 |
| ·单克隆抗体的制备及应用 | 第35-42页 |
| ·动物的免疫 | 第35页 |
| ·骨髓瘤细胞的培养 | 第35页 |
| ·收集脾细胞 | 第35-36页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第36页 |
| ·细胞融合 | 第36页 |
| ·挑克隆 | 第36页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第36-37页 |
| ·阳性细胞亚克隆及鉴定 | 第37-38页 |
| ·阳性细胞的大量培养及冻存 | 第38页 |
| ·单克隆抗体获得及纯化 | 第38-39页 |
| ·FITC标记蛋白质 | 第39-40页 |
| ·FACS法检测抗体与细胞膜表面受体的结合情况 | 第40-41页 |
| ·免疫共沉淀法检测抗体与细胞中未知蛋白的结合情况 | 第41-42页 |
| ·免疫组织(细胞)化学 | 第42-46页 |
| ·石蜡切片的免疫组织化学 | 第42-45页 |
| ·冰冻切片的免疫组织化学 | 第45-46页 |
| ·免疫细胞化学 | 第46-48页 |
| ·盖玻片的处理: | 第46页 |
| ·细胞在盖玻片上的生长: | 第46-47页 |
| ·细胞染色前洗涤及固定 | 第47页 |
| ·细胞免疫化学染色步骤 | 第47-48页 |
| ·真核细胞转染 | 第48-49页 |
| 第三章 实验结果 | 第49-83页 |
| ·小鼠Fcα/μR的组织及细胞学定位 | 第49-78页 |
| ·大鼠抗小鼠Fcα/μR单克隆及多克隆抗体的制备及鉴定 | 第49-60页 |
| ·小鼠Fcα/μR(mFcα/μR)的原核表达 | 第49-51页 |
| ·大鼠抗mFcα/μR单克隆抗体的制备及鉴定 | 第51-56页 |
| ·大鼠抗mFcα/μR多克隆抗体的鉴定 | 第56-60页 |
| ·大鼠抗小鼠pIgR单克隆抗体的制备及鉴定 | 第60-66页 |
| ·小鼠pIgR(mpIgR)的结构特点 | 第60-61页 |
| ·mpIgR的原核表达 | 第61-63页 |
| ·大鼠抗mpIgR单克隆抗体的制备及鉴定 | 第63-66页 |
| ·小鼠Fcα/μR及pIgR的组织定位研究 | 第66-74页 |
| ·mFcα/μR及mpIgR的基因表达谱研究 | 第66-67页 |
| ·mFcα/μR及mpIgR在各脏器的免疫组织化学研究 | 第67-74页 |
| ·小鼠Fcα/μR及pIgR在小鼠B淋巴瘤细胞系T560的表达 | 第74-78页 |
| ·mFcα/μR在T560的基因表达 | 第74页 |
| ·mFcα/μR及mpIgR在T560的蛋白表达 | 第74-78页 |
| ·大鼠Fcα/μR的组织定位初步研究 | 第78-83页 |
| ·大鼠Fcα/μR在各脏器的基因表达 | 第78-79页 |
| ·大鼠Fcα/μR蛋白表达的免疫组织化学研究 | 第79-83页 |
| ·小鼠抗rFcα/μR单克隆抗体的筛选 | 第79-80页 |
| ·rFcα/μR的免疫组织化学研究 | 第80-83页 |
| 第四章 讨论 | 第83-96页 |
| ·对抗Fcα/μR单克隆和多克隆抗体的评价 | 第83-85页 |
| ·对抗mpIgR单克隆抗体的评价 | 第85-86页 |
| ·Fcα/μR和pIgR组织定位分析 | 第86-94页 |
| ·基因表达谱分析 | 第86-90页 |
| ·小鼠Fcα/μR和pIgR的基因表达谱分析 | 第86-88页 |
| ·大鼠Fcα/μR及其他IgA受体的基因表达谱分析 | 第88-90页 |
| ·蛋白表达的组织定位分析 | 第90-94页 |
| ·小鼠Fcα/μR及pIgR在小鼠各脏器中的蛋白表达分析 | 第90-93页 |
| ·大鼠Fcα/μR在大鼠各脏器中的蛋白表达分析 | 第93-94页 |
| ·小鼠Fcα/μR及pIgR在小鼠B淋巴瘤细胞系T560的表达 | 第94-96页 |
| 综述:pIgR——粘膜免疫中的"Mr.Key" | 第96-103页 |
| 参考文献 | 第103-117页 |
| 附录Ⅰ:质粒载体图谱和多克隆位点 | 第117-119页 |
| 附录Ⅱ:攻读博士学位期间文章发表情况 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
