中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
前言 | 第9-13页 |
材料与方法 | 第13-34页 |
1. 实验材料 | 第13-19页 |
·菌株与质粒 | 第13页 |
·基因资源 | 第13页 |
·引物 | 第13-15页 |
·试剂盒 | 第15页 |
·主要分子生物学试剂 | 第15页 |
·其他主要试剂和耗材 | 第15页 |
·主要试剂、缓冲液和凝胶 | 第15-18页 |
·主要培养基 | 第18页 |
·主要仪器 | 第18-19页 |
2. 实验方法 | 第19-34页 |
·人心肌组织总RNA完整性鉴定 | 第19-20页 |
·引物设计 | 第20页 |
·人心肌肌钙蛋白I基因的克隆及目的片段的纯化、回收 | 第20-22页 |
·克隆载体的构建与鉴定 | 第22-26页 |
·表达载体的构建与鉴定 | 第26-30页 |
·目的蛋白的表达与表达条件的优化 | 第30-31页 |
·基因工程菌菌株稳定性检查 | 第31-32页 |
·表达产物的分析与鉴定 | 第32-34页 |
实验结果 | 第34-45页 |
1. 人心肌组织总 RNA完整性鉴定 | 第34页 |
2. 引物设计 | 第34页 |
3. RT-PCR扩增目的基因的鉴定 | 第34-35页 |
4. 克隆载体的鉴定 | 第35-38页 |
5. 克隆载体双酶切回收目的基因片段 | 第38页 |
6. 表达载体的鉴定 | 第38-41页 |
7. 目的蛋白的表达与表达条件的优化 | 第41-43页 |
8. 基因工程菌菌株稳定性检查 | 第43页 |
9. 表达产物的分析与鉴定 | 第43-45页 |
讨论 | 第45-49页 |
1. 目的蛋白表达片段的选取 | 第45-46页 |
2. 人心肌肌钙蛋白I基因的克隆 | 第46页 |
3. 克隆载体和表达载体的构建 | 第46页 |
4. 目的蛋白表达系统的选择 | 第46-47页 |
5. 感受态细胞的制备 | 第47页 |
6. 目的蛋白表达条件的优化 | 第47-48页 |
7. 目的蛋白免疫原性的确定 | 第48-49页 |
结论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-53页 |
附件 | 第53-57页 |
综述一 | 第57-66页 |
综述二 | 第66-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
缩略词 | 第73-74页 |