英文常用缩写词 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
第一章 前言 | 第13-21页 |
第一节 泛素-蛋白酶体降解系统 | 第13-14页 |
第二节 泛素连接酶 | 第14-21页 |
第二章 泛素连接酶Nedd4家族相互作用蛋白的筛选 | 第21-37页 |
1. 研究背景 | 第21-22页 |
2. 材料与方法 | 第22-23页 |
·质粒与试剂 | 第22页 |
·酵母双杂交筛选 | 第22-23页 |
3. 结果 | 第23-36页 |
·酵母双杂交筛选载体的构建 | 第23-24页 |
·酵母双杂交筛库结果 | 第24-34页 |
·酵母双杂交结果相互作用网络的构建 | 第34-36页 |
4. 讨论 | 第36-37页 |
第三章 FBXL15靶向Smurf1调控BMP通路活性 | 第37-66页 |
第一节 F-box 蛋白FBXL15 基本信息表征 | 第37-45页 |
1. 研究背景 | 第37-40页 |
2. 材料与方法 | 第40-41页 |
·质粒与试剂 | 第40页 |
·生物信息学分析 | 第40页 |
·FBXL15多克隆抗体制备 | 第40-41页 |
·FBXL15细胞定位分析 | 第41页 |
3. 结果 | 第41-45页 |
·FBXL15 生物信息学分析 | 第41-43页 |
·FBXL15 多克隆抗体制备及细胞组织表达谱 | 第43-45页 |
第二节 FBXL15 通过其LRR 区与Smurf1 HECT 结构域相互作用 | 第45-48页 |
1. 材料与方法 | 第45页 |
2. 结果与讨论 | 第45-47页 |
3. 小结 | 第47-48页 |
第三节 FBXL15 形成SCF 复合体反式调控Smurf1 蛋白稳定性 | 第48-55页 |
1. 材料与方法 | 第48页 |
2. 结果 | 第48-54页 |
·FBXL15 形成SCF 复合体下调Smurf1 蛋白稳定性 | 第48-50页 |
·敲低SCF~(FBXL15)上调内源Smurf1 蛋白水平 | 第50-52页 |
·SCF~(FBXL15)复合体促进Smurf1的泛素化 | 第52-53页 |
·SCF~(FBXL15) 参与细胞周期过程中G2/M 期的转换 | 第53-54页 |
3. 小结 | 第54-55页 |
第四节 FBXL15 与Nedd4 家族调控关系分析 | 第55-58页 |
1. 材料与方法 | 第55页 |
2. 结果及讨论 | 第55-58页 |
第五节 FBXL15 反式调控Smurf1 的功能研究 | 第58-66页 |
1. 研究背景 | 第58-60页 |
2. 材料与方法 | 第60-61页 |
·质粒与试剂 | 第60页 |
·报告基因实验 | 第60页 |
·实时定量PCR | 第60页 |
·成年大鼠FBXL15 敲低及MicroCT 分析 | 第60页 |
·成骨细胞分化及ALP 染色 | 第60-61页 |
3. 结果 | 第61-65页 |
·FBXL15 拮抗Smurf1 对BMP 通路的抑制效应 | 第61页 |
·FBXL15 参与斑马鱼胚胎发育过程中背腹轴的分化 | 第61-63页 |
·BXL15 参与体内骨稳态的调控 | 第63-65页 |
4. 小结 | 第65-66页 |
总结与讨论 | 第66-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
附录 | 第78-84页 |
附录1 主要实验仪器、设备及常用试剂配制 | 第78-80页 |
附录2 Nedd4 家族相互作用蛋白统计表 | 第80-81页 |
附录3 构建载体、引物、酶切位点 | 第81-83页 |
附录4 siRNA 序列 | 第83页 |
附录5 实时定量PCR 引物序列 | 第83-84页 |
综述 | 第84-91页 |
在读期间发表的代表性论文 | 第91-106页 |
个人简历以及在读期间发表的论文、所获奖励 | 第106-107页 |
致谢 | 第107页 |