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SCFFBXL15复合体促进HECT类泛素连接酶Smurf1的降解及其在BMP信号通路中的功能研究

英文常用缩写词第1-7页
中文摘要第7-10页
Abstract第10-13页
第一章 前言第13-21页
 第一节 泛素-蛋白酶体降解系统第13-14页
 第二节 泛素连接酶第14-21页
第二章 泛素连接酶Nedd4家族相互作用蛋白的筛选第21-37页
 1. 研究背景第21-22页
 2. 材料与方法第22-23页
   ·质粒与试剂第22页
   ·酵母双杂交筛选第22-23页
 3. 结果第23-36页
   ·酵母双杂交筛选载体的构建第23-24页
   ·酵母双杂交筛库结果第24-34页
   ·酵母双杂交结果相互作用网络的构建第34-36页
 4. 讨论第36-37页
第三章 FBXL15靶向Smurf1调控BMP通路活性第37-66页
 第一节 F-box 蛋白FBXL15 基本信息表征第37-45页
  1. 研究背景第37-40页
  2. 材料与方法第40-41页
   ·质粒与试剂第40页
   ·生物信息学分析第40页
   ·FBXL15多克隆抗体制备第40-41页
   ·FBXL15细胞定位分析第41页
  3. 结果第41-45页
   ·FBXL15 生物信息学分析第41-43页
   ·FBXL15 多克隆抗体制备及细胞组织表达谱第43-45页
 第二节 FBXL15 通过其LRR 区与Smurf1 HECT 结构域相互作用第45-48页
  1. 材料与方法第45页
  2. 结果与讨论第45-47页
  3. 小结第47-48页
 第三节 FBXL15 形成SCF 复合体反式调控Smurf1 蛋白稳定性第48-55页
  1. 材料与方法第48页
  2. 结果第48-54页
   ·FBXL15 形成SCF 复合体下调Smurf1 蛋白稳定性第48-50页
   ·敲低SCF~(FBXL15)上调内源Smurf1 蛋白水平第50-52页
   ·SCF~(FBXL15)复合体促进Smurf1的泛素化第52-53页
   ·SCF~(FBXL15) 参与细胞周期过程中G2/M 期的转换第53-54页
  3. 小结第54-55页
 第四节 FBXL15 与Nedd4 家族调控关系分析第55-58页
  1. 材料与方法第55页
  2. 结果及讨论第55-58页
 第五节 FBXL15 反式调控Smurf1 的功能研究第58-66页
  1. 研究背景第58-60页
  2. 材料与方法第60-61页
   ·质粒与试剂第60页
   ·报告基因实验第60页
   ·实时定量PCR第60页
   ·成年大鼠FBXL15 敲低及MicroCT 分析第60页
   ·成骨细胞分化及ALP 染色第60-61页
  3. 结果第61-65页
   ·FBXL15 拮抗Smurf1 对BMP 通路的抑制效应第61页
   ·FBXL15 参与斑马鱼胚胎发育过程中背腹轴的分化第61-63页
   ·BXL15 参与体内骨稳态的调控第63-65页
  4. 小结第65-66页
总结与讨论第66-71页
参考文献第71-78页
附录第78-84页
 附录1 主要实验仪器、设备及常用试剂配制第78-80页
 附录2 Nedd4 家族相互作用蛋白统计表第80-81页
 附录3 构建载体、引物、酶切位点第81-83页
 附录4 siRNA 序列第83页
 附录5 实时定量PCR 引物序列第83-84页
综述第84-91页
在读期间发表的代表性论文第91-106页
个人简历以及在读期间发表的论文、所获奖励第106-107页
致谢第107页

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