| 摘要 | 第1-6页 |
| Summary | 第6-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-29页 |
| 1. Toll 样受体研究进展 | 第15-24页 |
| ·TLRs 的发现 | 第15页 |
| ·TLRs 的结构 | 第15-16页 |
| ·TLRs 成员在物种、组织和细胞中的分布及表达 | 第16-18页 |
| ·TLRs 的物种分布 | 第16页 |
| ·TLRs 的组织分布 | 第16-17页 |
| ·TLRs 的细胞分布 | 第17页 |
| ·TLRs 的表达与调控 | 第17-18页 |
| ·TLRs 家族的配体 | 第18-19页 |
| ·TLRs 的信号转导通路 | 第19-20页 |
| ·MyD88 依赖途径 | 第19-20页 |
| ·MyD88 非依赖途径 | 第20页 |
| ·由TLR 介导的生物学功能 | 第20-24页 |
| ·促进细胞因子的合成与释放，引发炎症反应 | 第20-21页 |
| ·促进免疫细胞膜表面表达相关免疫分子，促进免疫细胞的成熟和功能化 | 第21页 |
| ·抗病毒感染 | 第21页 |
| ·TLRs 的抗细菌作用 | 第21-22页 |
| ·调节免疫应答 | 第22页 |
| ·诱导一氧化氮(NO)依赖性杀菌活性 | 第22页 |
| ·TLR 间的协同作用 | 第22-23页 |
| ·TLR 与败血症的全身免疫病理学损伤有关 | 第23页 |
| ·TLR 在天然免疫与获得性免疫中的作用 | 第23-24页 |
| ·前景和展望 | 第24页 |
| 2 Toll 样受体7 研究进展 | 第24-27页 |
| ·TLR7 的发现与结构 | 第24-25页 |
| ·TLR7 介导的生物学效应 | 第25-26页 |
| ·TLR7 识别某些小分子抗病毒化合物 | 第25-26页 |
| ·TLR7 识别病毒ssRNA | 第26页 |
| ·TLR7 介导的信号转导通路 | 第26-27页 |
| ·MyD88 依赖的信号转导通路 | 第26页 |
| ·TLR7 介导的信号通路需要内体成熟 | 第26-27页 |
| ·前景和展望 | 第27页 |
| 3 研究内容和方法 | 第27-29页 |
| 第二章 猪TLR7 基因的克隆及其在CHO-K1 细胞中的表达 | 第29-48页 |
| 1 前言 | 第29-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-38页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-38页 |
| ·基因的克隆 | 第31-33页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第33-35页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第35-36页 |
| ·猪TLR7 全长基因序列组成与结构预测分析 | 第36页 |
| ·猪TLR7 全长基因在CHO-K1 细胞中的表达 | 第36-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-46页 |
| ·单个核细胞刺激诱导结果 | 第38-39页 |
| ·RT- PCR 产物结果 | 第39-40页 |
| ·表达载体的构建与鉴定结果 | 第40-41页 |
| ·猪TLR7 全长基因的克隆结果 | 第40页 |
| ·重组表达载体鉴定 | 第40-41页 |
| ·基因序列分析及结构预测结果 | 第41-44页 |
| ·猪TLR7 序列组成成分预测分析 | 第41页 |
| ·猪TLR7 序列的同源性及遗传演化关系分析 | 第41-44页 |
| ·猪TLR7 全长基因在CHO-K1 细胞中的表达 | 第44-46页 |
| ·G418 对CHO-K1 细胞最小致死量的测定结果 | 第44-45页 |
| ·重组质粒转染CHO-K1 细胞结果 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 猪TLR7 基因胞外区片段的原核表达 | 第48-56页 |
| 1 前言 | 第48页 |
| 2 材料与方法 | 第48-52页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·试验方法 | 第49-52页 |
| ·猪TLR 7 基因胞外区片段表达引物的设计 | 第49页 |
| ·目的基因胞外区片段的克隆 | 第49-50页 |
| ·原核表达载体的构建与转化 | 第50页 |
| ·重组质粒菌株的诱导表达 | 第50页 |
| ·SDS-PAGE 电泳分析 | 第50-51页 |
| ·重组猪TLR7 基因胞外区蛋白的提取与复性 | 第51-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-54页 |
| ·TLR7 基因胞外区片段的克隆 | 第52页 |
| ·重组原核表达质粒的构建与鉴定 | 第52-53页 |
| ·融合蛋白的表达与鉴定 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 第四章 猪TLR7 基因胞外区及全长蛋白多克隆抗体的研制 | 第56-67页 |
| 1 前言 | 第56-57页 |
| 2 材料与方法 | 第57-61页 |
| ·实验材料 | 第57页 |
| ·试验方法 | 第57-61页 |
| ·猪TLR 7 胞外区重组蛋白抗体的研制 | 第57-59页 |
| ·猪TLR7 全长基因真核表达载体的构建与抗体的研制 | 第59-61页 |
| 3 结果与分析 | 第61-65页 |
| ·猪TLR 7 胞外区重组蛋白抗体的研制 | 第61-63页 |
| ·标签蛋白MBP 的制备 | 第61-62页 |
| ·小鼠抗猪TLR7 胞外区重组蛋白抗血清效价的测定 | 第62-63页 |
| ·猪TLR7 全长基因体内真核表达与其抗体的研制 | 第63-65页 |
| ·真核表达重组质粒的鉴定 | 第63-64页 |
| ·pTLR7 全长蛋白抗血清的效价测定 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| 第五章 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 附录 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 作者简历 | 第78-79页 |
| 附件 | 第79-80页 |
