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龙眼(Dimocarpus Longan Lour.)成花逆转cDNA-AFLP分析

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩写词第10-12页
1 文献综述第12-26页
   ·龙眼成花逆转的研究进展第12-15页
     ·龙眼的花芽分化与成花逆转第12-13页
       ·龙眼的花芽分化第12-13页
       ·龙眼的成花逆转第13页
     ·影响龙眼成花逆转的因素第13-14页
       ·树体营养第13-14页
       ·内源激素第14页
       ·温度和湿度第14页
     ·成花逆转的分子机理研究第14-15页
   ·差异表达基因的分离方法第15-20页
     ·mRNA差异显示技术第16页
     ·抑制消减杂交第16-17页
     ·cDNA代表性差异分析第17-18页
     ·基因表达系列分析法第18页
     ·RC4D第18-19页
     ·cDNA微列阵第19-20页
   ·cDNA-AFLP技术的应用第20-24页
     ·cDNA-AFLP基本原理第20-21页
     ·cDNA-AFLP技术特点第21-22页
       ·cDNA-AFLP技术重复性好第21页
       ·cDNA-AFLP技术可准确反映基因间表达量的区别第21页
       ·cDNA-AFLP技术对内切酶与引物的选择要求第21-22页
     ·cDNA-AFLP技术的应用第22-24页
       ·基因表达特性的研究第22-23页
       ·遗传标记分析第23页
       ·分离特异表达的基因第23-24页
   ·研究的目的、意义与内容第24-26页
     ·研究目的与意义第24页
     ·研究内容第24-25页
     ·技术路线第25-26页
2 材料与方法第26-38页
   ·仪器设备和试剂第26-29页
     ·仪器设备第26页
     ·试剂第26-29页
       ·提取龙眼花芽RNA所用试剂第26-27页
       ·反转录所用试剂第27页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳所用试剂第27-28页
       ·其它试剂第28-29页
   ·试验材料第29页
   ·龙眼花芽总RNA提取第29-31页
     ·器皿准备第29页
     ·RNA提取方法第29-30页
     ·总RNA的电泳检测第30页
     ·总RNA含量和纯度的测定第30页
     ·RNA的纯化第30-31页
   ·cDNA-AFLP分析第31-35页
     ·cDNA第一链的合成第31-32页
     ·第二链的合成第32页
     ·双链cDNA的纯化第32-33页
     ·cDNA-AFLP分析第33-35页
       ·限制性酶切及连接第33-34页
       ·预扩增第34页
       ·选择性PCR扩增第34-35页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第35-38页
     ·制胶第35页
       ·制胶板的处理第35页
       ·灌胶第35页
     ·电泳第35-36页
     ·银染第36页
       ·银染试剂的配制第36页
       ·银染操作步骤:第36页
   ·AFLP多态性片段的回收、纯化、测序第36-38页
     ·差异片段的回收第36页
     ·差异片段的二次扩增第36-37页
     ·二次扩增产物的纯化第37页
     ·cDNA差异片段的测序第37-38页
3 结果与分析第38-48页
   ·龙眼花芽总RNA提取第38页
   ·双链cDNA的合成第38-39页
   ·cDNA酶切片段的预扩增第39页
   ·选择性扩增产物聚丙烯酰胺凝胶电泳结果分析第39-42页
   ·对特异TDFs再扩增结果第42-43页
   ·TDFs的序列分析结果第43页
   ·TDFs序列同源性分析第43-48页
4 讨论第48-52页
   ·龙眼花芽RNA的提取第48页
   ·cDNA-AFLP分析龙眼花芽正常成花和成花逆转的基因表达变化第48页
   ·龙眼成花逆转相关TDFs第48-50页
   ·cDNA-AFLP试验体系中应注意的问题第50-51页
   ·银染与放射性标记的比较第51-52页
5 结论第52-53页
参考文献第53-61页
致谢第61页

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