| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-18页 |
| ·日本囊对虾形态特征、自然分布及生活习性 | 第10页 |
| ·性腺发育及性别分化的相关研究 | 第10-11页 |
| ·本研究的背景和目的意义 | 第11-13页 |
| ·ACP 技术的基本原理、特点及研究进展 | 第13-15页 |
| ·本研究的内容和技术路线 | 第15-16页 |
| ·增殖细胞核抗原基因的研究进展 | 第16页 |
| ·泛素缀合酶基因的研究进展 | 第16-18页 |
| 第二章 材料和方法 | 第18-28页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·日本囊对虾 | 第18页 |
| ·主要试剂盒 | 第18页 |
| ·本实验室自配的溶液 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-28页 |
| ·ACP 方法获得日本囊对虾性腺差异表达基因 | 第19-23页 |
| ·总 RNA 提取及检测 | 第19页 |
| ·利用dT-ACP 合成cDNA 第一条链 | 第19-20页 |
| ·20 对 ACP 随机引物分别对精巢和卵巢cDNA 进行 PCR 扩增 | 第20页 |
| ·割胶纯化基因片段 | 第20-21页 |
| ·与质粒载体连接 | 第21页 |
| ·感受态细胞的转化及筛选 | 第21-22页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第22页 |
| ·质粒插入片段的检测 | 第22页 |
| ·质粒测序 | 第22-23页 |
| ·测序结果比对 | 第23页 |
| ·RACE 方法获得 PCNA 及 UBE2r 基因cDNA 全长 | 第23-26页 |
| ·RACE 引物设计 | 第23页 |
| ·RACE cDNA 第一条链的合成 | 第23-24页 |
| ·PCNA RACE-PCR 特异性扩增 | 第24页 |
| ·UBE2r 基因 RACE-PCR 特异扩增 | 第24页 |
| ·割胶纯化目的基因片段 | 第24页 |
| ·与质粒载体连接 | 第24-25页 |
| ·连接产物的转化 | 第25页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第25页 |
| ·质粒插入片段的检测 | 第25页 |
| ·质粒测序 | 第25页 |
| ·测序结果拼接 | 第25页 |
| ·目的基因的同源性分析及分子进化分析 | 第25-26页 |
| ·荧光定量 PCR 反应分析各基因在精巢和卵巢不同发育时段的表达 | 第26-28页 |
| ·各个发育时期的总 RNA 的提取 | 第26页 |
| ·合成cDNA 第一条链 | 第26页 |
| ·实时荧光定量 PCR 引物 | 第26-27页 |
| ·实时荧光定量 PCR 反应体系及条件 | 第27页 |
| ·荧光定量 PCR 所获得的条带的测序 | 第27页 |
| ·数据分析 | 第27-28页 |
| 第三章 结果 | 第28-52页 |
| ·ACP 方法获得日本囊对虾性腺差异表达基因 | 第28-31页 |
| ·总 RNA 提取的结果 | 第28页 |
| ·ACP 方法获得的日本囊对虾性别差异基因 | 第28-29页 |
| ·差异条带测序结果 | 第29-31页 |
| ·PCNA 基因全长的获得及序列分析 | 第31-38页 |
| ·PCNA 基因的 RACE 扩增结果 | 第31-32页 |
| ·PCNA 基因的cDNA 序列分析 | 第32-33页 |
| ·PCNA 基因和其他物种 PCNA 基因的比较分析 | 第33-37页 |
| ·荧光定量 PCR 分析 PCNA 基因在精巢和卵巢不同发育时期的表达 | 第37-38页 |
| ·PCNA 基因的熔解曲线 | 第37页 |
| ·PCNA 基因定量 PCR 扩增片段的测序 | 第37页 |
| ·PCNA 基因在不同发育时期的表达情况 | 第37-38页 |
| ·UBE2r 基因全长的获得及序列分析 | 第38-47页 |
| ·UBE2r 基因的 RACE 扩增结果 | 第38-39页 |
| ·UBE2r基因的cDNA 序列分析 | 第39-40页 |
| ·UBE2r和其他物种 UBE2r 的比较分析 | 第40-45页 |
| ·荧光定量PCR 分析UBE2r基因在精巢和卵巢不同发育时期的表达 | 第45-47页 |
| ·UBE2r 基因的熔解曲线 | 第45页 |
| ·UBE2r 基因定量 PCR 扩增片段的测序 | 第45页 |
| ·UBE2r 基因基因在不同发育时期的表达情况 | 第45-47页 |
| ·荧光定量 PCR 分析4 个未知基因在精巢和卵巢不同发育时期的表达 | 第47-52页 |
| ·溶解曲线 | 第47页 |
| ·4 个未知基因定量表达结果 | 第47-52页 |
| 第四章 讨论 | 第52-57页 |
| ·增殖细胞核抗原基因 | 第52-53页 |
| ·泛素缀合酶基因 | 第53-55页 |
| ·ACP 方法获得的其它差异表达基因 | 第55-57页 |
| ·ACP16 | 第55页 |
| ·ACP18 | 第55-56页 |
| ·ACP3、ACP4-T、ACP4-O、ACP15 基因 | 第56-57页 |
| 第五章 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第65页 |
