摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-19页 |
前言 | 第19-23页 |
第一章 白藜芦醇合酶基因克隆及表达载体构建 | 第23-42页 |
·材料 | 第23-24页 |
·仪器设备 | 第23页 |
·植物材料 | 第23页 |
·菌种和质粒 | 第23页 |
·试剂 | 第23-24页 |
·方法 | 第24-35页 |
·葡萄基因组总DNA的提取 | 第24-25页 |
·PCR法扩增目的基因 | 第25-27页 |
·目的基因的克隆 | 第27-30页 |
·植物表达载体(pBI-RS)的构建 | 第30-35页 |
·质量控制 | 第35页 |
·结果 | 第35-40页 |
·白藜芦醇合酶基因的获得 | 第35-36页 |
·重组质粒pT-RS的克隆 | 第36-38页 |
·植物双元表达载体pBI-RS的构建 | 第38-39页 |
·根癌农杆菌EHA105的转化及鉴定 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·根癌农杆菌介导的基因转化方法 | 第40页 |
·植物双元载体系统 | 第40-41页 |
小结 | 第41页 |
参考文献 | 第41-42页 |
第二章 生菜遗传转化系统的优化及转基因抗性苗的获得 | 第42-75页 |
·材料 | 第42-44页 |
·植物材料 | 第42页 |
·菌株及质粒 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42页 |
·溶液及培养基的配制 | 第42-44页 |
·方法 | 第44-50页 |
·生菜无菌苗的培养 | 第44-45页 |
·生菜离体再生系统的建立 | 第45-46页 |
·再生芽生根系统的建立 | 第46页 |
·试管苗的移栽 | 第46-47页 |
·抗生素选择压力的筛选 | 第47页 |
·生菜转化植株的再生成株 | 第47-50页 |
·数据统计分析 | 第50页 |
·质量控制 | 第50页 |
·结果 | 第50-65页 |
·生菜无菌苗的优化培养条件 | 第50-51页 |
·生菜外植体离体再生试验条件的优化 | 第51-56页 |
·生菜再生芽的优化生根条件 | 第56-57页 |
·抗生素选择压力的筛选 | 第57-60页 |
·生菜转化植株的再生成株 | 第60-65页 |
·讨论 | 第65-70页 |
·生菜无菌苗培养的影响因素 | 第65-66页 |
·生菜离体再生过程中的影响因素 | 第66-67页 |
·根癌农杆菌转化过程中的影响因素 | 第67-70页 |
小结 | 第70页 |
参考文献 | 第70-75页 |
第三章 生菜转化体的检测 | 第75-98页 |
·材料 | 第75-76页 |
·植物材料 | 第75页 |
·标准品 | 第75页 |
·试剂 | 第75页 |
·主要仪器设备 | 第75-76页 |
·方法 | 第76-80页 |
·PCR法检测白藜芦醇合酶基因在生菜中的整合情况 | 第76页 |
·RT-PCR法检测白藜芦醇合酶基因在生菜中的表达情况 | 第76-77页 |
·高效液相色谱法及气相色谱-质谱法检测转基因生菜中白藜芦醇及白藜芦醇苷的含量 | 第77-79页 |
·继代培养分析 | 第79页 |
·数据统计分析 | 第79页 |
·质量控制 | 第79-80页 |
·结果 | 第80-91页 |
·PCR分析结果 | 第80页 |
·RT-PCR分析结果 | 第80-81页 |
·白藜芦醇及白藜芦醇苷定性、定量分析方法的建立 | 第81-85页 |
·鉴定白藜芦醇及白藜芦醇苷 | 第85-88页 |
·转基因植株中白藜芦醇及白藜芦醇苷的定量检测 | 第88-90页 |
·转基因植株的继代稳定性 | 第90-91页 |
·讨论 | 第91-94页 |
·转基因植株中白藜芦醇及白藜芦醇苷的表达水平 | 第91-92页 |
·转基因沉默现象 | 第92-93页 |
·离体无性繁殖及转化外源基因的稳定性 | 第93-94页 |
小结 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-98页 |
全文总结 | 第98-99页 |
研究的特色与创新性 | 第99-100页 |
缩略词表 | 第100-101页 |
白藜芦醇及白藜芦醇苷的研究进展 | 第101-122页 |
成果 | 第122-123页 |
致谢 | 第123-124页 |