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白藜芦醇合酶基因转化生菜的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-19页
前言第19-23页
第一章 白藜芦醇合酶基因克隆及表达载体构建第23-42页
   ·材料第23-24页
     ·仪器设备第23页
     ·植物材料第23页
     ·菌种和质粒第23页
     ·试剂第23-24页
   ·方法第24-35页
     ·葡萄基因组总DNA的提取第24-25页
     ·PCR法扩增目的基因第25-27页
     ·目的基因的克隆第27-30页
     ·植物表达载体(pBI-RS)的构建第30-35页
     ·质量控制第35页
   ·结果第35-40页
     ·白藜芦醇合酶基因的获得第35-36页
     ·重组质粒pT-RS的克隆第36-38页
     ·植物双元表达载体pBI-RS的构建第38-39页
     ·根癌农杆菌EHA105的转化及鉴定第39-40页
   ·讨论第40-41页
     ·根癌农杆菌介导的基因转化方法第40页
     ·植物双元载体系统第40-41页
 小结第41页
 参考文献第41-42页
第二章 生菜遗传转化系统的优化及转基因抗性苗的获得第42-75页
   ·材料第42-44页
     ·植物材料第42页
     ·菌株及质粒第42页
     ·主要试剂第42页
     ·溶液及培养基的配制第42-44页
   ·方法第44-50页
     ·生菜无菌苗的培养第44-45页
     ·生菜离体再生系统的建立第45-46页
     ·再生芽生根系统的建立第46页
     ·试管苗的移栽第46-47页
     ·抗生素选择压力的筛选第47页
     ·生菜转化植株的再生成株第47-50页
     ·数据统计分析第50页
     ·质量控制第50页
   ·结果第50-65页
     ·生菜无菌苗的优化培养条件第50-51页
     ·生菜外植体离体再生试验条件的优化第51-56页
     ·生菜再生芽的优化生根条件第56-57页
     ·抗生素选择压力的筛选第57-60页
     ·生菜转化植株的再生成株第60-65页
   ·讨论第65-70页
     ·生菜无菌苗培养的影响因素第65-66页
     ·生菜离体再生过程中的影响因素第66-67页
     ·根癌农杆菌转化过程中的影响因素第67-70页
 小结第70页
 参考文献第70-75页
第三章 生菜转化体的检测第75-98页
   ·材料第75-76页
     ·植物材料第75页
     ·标准品第75页
     ·试剂第75页
     ·主要仪器设备第75-76页
   ·方法第76-80页
     ·PCR法检测白藜芦醇合酶基因在生菜中的整合情况第76页
     ·RT-PCR法检测白藜芦醇合酶基因在生菜中的表达情况第76-77页
     ·高效液相色谱法及气相色谱-质谱法检测转基因生菜中白藜芦醇及白藜芦醇苷的含量第77-79页
     ·继代培养分析第79页
     ·数据统计分析第79页
     ·质量控制第79-80页
   ·结果第80-91页
     ·PCR分析结果第80页
     ·RT-PCR分析结果第80-81页
     ·白藜芦醇及白藜芦醇苷定性、定量分析方法的建立第81-85页
     ·鉴定白藜芦醇及白藜芦醇苷第85-88页
     ·转基因植株中白藜芦醇及白藜芦醇苷的定量检测第88-90页
     ·转基因植株的继代稳定性第90-91页
   ·讨论第91-94页
     ·转基因植株中白藜芦醇及白藜芦醇苷的表达水平第91-92页
     ·转基因沉默现象第92-93页
     ·离体无性繁殖及转化外源基因的稳定性第93-94页
 小结第94-95页
 参考文献第95-98页
全文总结第98-99页
研究的特色与创新性第99-100页
缩略词表第100-101页
白藜芦醇及白藜芦醇苷的研究进展第101-122页
成果第122-123页
致谢第123-124页

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