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血小板反应蛋白-1在小鼠视网膜缺血再灌注损伤中的作用及在糖尿病视网膜病变中的应用价值

中文摘要第1-8页
Abstract第8-17页
第1章 TSP1对于视网膜血管病变的作用机制第17-47页
   ·血小板反应蛋白-1(TSP1)第17-39页
     ·TSP1 的发现,提纯和结构第18-19页
     ·TSP1 与其它因子的相互作用第19-26页
     ·TSP1 的调控第26-29页
     ·TSP1 在血管表面受体、信号传导通路第29-32页
     ·TSP1 的功能第32-39页
     ·TSP1 基因敲除后对机体的影响第39页
   ·视网膜缺血再灌注模型第39-47页
     ·视网膜缺血再灌注模型的建立解剖及病理生理基础第39-40页
     ·视网膜缺血再灌注模型的病理机制第40-42页
     ·视网膜缺血再灌注模型的建立第42-44页
     ·视网膜 IR 模型在糖尿病性视网膜病变研究的意义第44-47页
第2章 糖尿病视网膜病变动物模型建立及病理变化第47-63页
   ·实验材料第48-50页
     ·主要仪器及设备第48页
     ·主要试剂第48-49页
     ·实验动物第49-50页
   ·实验方法第50-56页
     ·腹腔注射 STZ第50页
     ·定量 PCR 方法测量氧诱导视网膜新生血管模型中各种因子表达第50-52页
     ·无核毛细血管统计第52-53页
     ·神经节细胞的丢失第53-54页
     ·白细胞粘附功能测定第54-55页
     ·血视网膜屏障功能 BRB 结果第55页
     ·8OHDG 染色第55-56页
   ·结果第56-60页
     ·成功应用 STZ 腹腔注射方法制作糖尿病小鼠模型第56-57页
     ·糖尿病视网膜病变无核毛细血管变化第57-58页
     ·神经节细胞的丢失第58页
     ·白细胞粘附功能测定第58-59页
     ·血视网膜屏障功能 BRB 结果第59-60页
     ·8OHDG 染色结果第60页
   ·讨论第60-62页
   ·结论第62-63页
第3章 在视网膜缺血再灌注病变的中 TSP1KO 和 WT 的对照第63-87页
   ·实验材料第63-65页
     ·主要仪器及设备第63-64页
     ·主要试剂第64-65页
     ·实验动物第65页
   ·实验方法第65-71页
     ·视网膜缺血再灌注模型的建立第65-67页
     ·定量 PCR 方法测量视网膜缺血再灌注模型中各种因子表达情况第67页
     ·Western blot 方法测定野生型小鼠模型组 TSP1 表达升高第67-69页
     ·无核毛细血管统计第69页
     ·神经节细胞的丢失统计第69页
     ·白细胞粘附功能测定第69页
     ·血视网膜屏障功能 BRB 方法第69页
     ·TUNNEL 染色第69-70页
     ·8OHDG 染色方法第70页
     ·测量 luminescence 变化第70-71页
   ·结果第71-80页
     ·成功建立了小鼠的高眼压诱导视网膜缺血再灌注模型第71页
     ·视网膜缺血再灌注模型中各种炎症因子以及诱导凋亡因子的升高第71-73页
     ·Western Blot 示 IR 后 TSP1 表达增加第73页
     ·IR 组白细胞粘附于血管壁以及白细胞在组织中浸润第73-75页
     ·视网膜 IR 导致视网膜形态改变和神经节细胞丢失第75-76页
     ·视网膜 IR 模型组视网膜无核毛细血管的增加第76-78页
     ·血视网膜屏障功能 BRB 结果第78页
     ·TUNNEL 染色证实模型组细胞凋亡增加第78-79页
     ·在 IR 后 24 小时,48 小时的磷酸化及总 P38、P65、AKT 的表达第79页
     ·8OHDG 免疫组化染色对比野生型和 TSP1KO 小鼠线粒体损伤第79-80页
     ·野生型和 TSP1KO 小鼠视网膜缺血再灌注模型 luminescence 变化第80页
   ·讨论第80-86页
   ·结论第86-87页
第4章 通过 HREC培养进一步验证 TSP1 对于缺血再灌注损伤中内皮细胞的促进凋亡作用第87-98页
   ·实验材料第87-88页
     ·主要仪器及设备第87-88页
     ·主要试剂第88页
     ·HREC7-9 细胞系第88页
   ·实验方法第88-91页
     ·细胞复苏第88-89页
     ·细胞计数,分盘第89页
     ·低氧(1%O2)诱导刺激 HREC第89-90页
     ·用 siRNA 方法去除 TSP1 比较第90页
     ·细胞死亡检测 ELISA 法第90-91页
   ·实验结果第91-95页
     ·低氧诱导后 HREC 释放 TSP1 增加,凋亡细胞同比例增加第91-93页
     ·应用 siRNA 技术干涉 TSP1 的表达第93-94页
     ·应用 siRNA 技术干涉 TSP1 的表达,检测细胞凋亡情况第94页
     ·用不同浓度的葡萄糖刺激 HREC 的细胞凋亡情况第94-95页
     ·葡萄糖浓度为 50mM 时,siTSP1 与 siCN 比较细胞凋亡情况第95页
   ·讨论第95-98页
第5章 结论第98-99页
参考文献第99-108页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第108-109页
致谢第109页

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