摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词(Abbreviation) | 第10-11页 |
1.文献综述 | 第11-36页 |
·抗体技术的发展 | 第11-14页 |
·多克隆抗体 | 第11-12页 |
·单克隆抗体 | 第12页 |
·基因工程抗体 | 第12-14页 |
·抗体的基本结构 | 第14-15页 |
·噬菌体展示技术 | 第15-18页 |
·噬菌体展示技术的基本原理 | 第15-16页 |
·噬菌体展示系统的发展 | 第16-18页 |
·噬菌体抗体库的类型 | 第18-22页 |
·天然抗体库(Natural library) | 第18-19页 |
·免疫抗体库(Immunized library) | 第19页 |
·化学合成抗体库(Synthetic library) | 第19-20页 |
·ScFv抗体库(Single chain variable fragments antibody library) | 第20-21页 |
·Fab抗体库(Antigen binding fragments antibody library) | 第21页 |
·双体抗体库和双特异性抗体库(Diabody library) | 第21-22页 |
·二硫键稳定型抗体库(Disulfide stablilized Fv fragments antibody library) | 第22页 |
·噬菌体抗体技术的操作 | 第22-23页 |
·抗体可变区的获得 | 第22-23页 |
·噬菌体抗体库载体的构建 | 第23页 |
·单链抗体的表达 | 第23-25页 |
·原核表达 | 第23-24页 |
·真核表达 | 第24页 |
·噬菌体表达 | 第24-25页 |
·转基因动植物 | 第25页 |
·单链抗体的应用 | 第25-27页 |
·基础理论方面的研究 | 第25页 |
·中和病毒 | 第25-26页 |
·在肿瘤免疫诊断和免疫治疗上的应用 | 第26页 |
·细胞内免疫 | 第26页 |
·免疫毒素 | 第26页 |
·在农兽药等小分子残留检测中的应用 | 第26-27页 |
·构建其它类型的基因工程抗体 | 第27页 |
·噬菌体抗体库的筛选 | 第27-31页 |
·抗体库的经典筛选法 | 第28-29页 |
·非纯化抗原进行筛选 | 第29-31页 |
·生长抑素及小分子酶联免疫分析 | 第31-36页 |
·生长抑素 | 第31-32页 |
·小分子酶联免疫分析(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA) | 第32-36页 |
实验研究 | 第36-66页 |
1.引言 | 第36页 |
2.材料和方法 | 第36-55页 |
·试验材料 | 第36-43页 |
·噬菌粒(phagemid) | 第36-37页 |
·试验动物 | 第37页 |
·抗原及试剂 | 第37-38页 |
·主要仪器和设备 | 第38-39页 |
·缓冲液和试剂配置 | 第39-40页 |
·培养基 | 第40-41页 |
·ELISA相关试剂的配制 | 第41页 |
·偶联相关试剂的配制 | 第41页 |
·PCR引物 | 第41-42页 |
·ScFv基因组装方法 | 第42-43页 |
·试验方法 | 第43-55页 |
·人工抗原的合成和鉴定 | 第43-44页 |
·动物免疫程序和检测 | 第44-45页 |
·RNA的提取以及纯度和浓度的检测 | 第45-46页 |
·cDNA第一条链的合成 | 第46页 |
·抗体基因片段的制备 | 第46-50页 |
·噬菌粒载体pCANTAB-5E和ScFv基因的内切酶消化 | 第50-51页 |
·连接 | 第51页 |
·电转化 | 第51-52页 |
·转化子的鉴定 | 第52-53页 |
·辅助噬菌体M13K07的制备 | 第53-54页 |
·噬菌体抗体库的构建 | 第54-55页 |
·噬菌体抗体库容量的测定 | 第55页 |
3.结果和分析 | 第55-60页 |
·抗体效价 | 第55-56页 |
·总RNA纯度 | 第56-57页 |
·V_H、V_L、Linker基因扩增产物 | 第57-58页 |
·ScFv基因组装 | 第58页 |
·ScFv的两种基因连接方法比较 | 第58-59页 |
·转化子鉴定 | 第59-60页 |
·库容量 | 第60页 |
4.讨论 | 第60-66页 |
·人工抗原的合成 | 第60页 |
·关于小鼠免疫 | 第60-61页 |
·关于ELISA方法建立 | 第61页 |
·关于RNA提取与纯化 | 第61-62页 |
·关于cDNA合成 | 第62-63页 |
·关于组装 | 第63页 |
·关于组装方法的比较 | 第63-64页 |
·关于库容 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-78页 |
研究生期间发表的论文目录 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |