草酸盐高效降解菌的筛选及其酶学性质研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-42页 |
| ·草酸盐与植物 | 第13-16页 |
| ·植物草酸的功能 | 第13-15页 |
| ·过量草酸盐对植物的毒害作用及预防 | 第15-16页 |
| ·草酸盐在动物饲料中的毒害作用及预防 | 第16-17页 |
| ·草酸盐与人类健康 | 第17-21页 |
| ·草酸和草酸盐是天然有毒物质 | 第18-19页 |
| ·草酸盐与人类结石 | 第19-21页 |
| ·草酸盐与微生物 | 第21-32页 |
| ·草酸盐与真菌 | 第21-24页 |
| ·嗜草酸盐细菌 | 第24-32页 |
| ·草酸盐降解菌的生物技术应用 | 第32页 |
| ·草酸盐的检测方法 | 第32-35页 |
| ·比色法 | 第32-33页 |
| ·高效液相色谱法 | 第33页 |
| ·分光光度法及其利用草酸特性检测法 | 第33-34页 |
| ·离子色谱法 | 第34页 |
| ·酶法 | 第34-35页 |
| ·草酸盐降解酶 | 第35-40页 |
| ·草酸盐氧化酶 | 第36-37页 |
| ·草酸盐脱羧酶 | 第37-38页 |
| ·草酰辅酶A脱羧酶/甲酰辅酶A转移酶 | 第38-40页 |
| ·本论文研究的目的、意义及内容 | 第40-42页 |
| ·研究目的和意义 | 第40页 |
| ·研究内容 | 第40-42页 |
| 2 草酸盐检测方法的确立 | 第42-55页 |
| ·材料与方法 | 第42-45页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·测定方法 | 第43页 |
| ·次甲基蓝-重铬酸钾体系的吸收光谱 | 第43页 |
| ·反应时间对次甲基蓝-重铬酸钾体系的影响 | 第43-44页 |
| ·次甲基蓝-重铬酸钾体系中各因素的反应条件优化 | 第44页 |
| ·温度对次甲基蓝-重铬酸钾体系的影响 | 第44页 |
| ·草酸催化反应的终止 | 第44页 |
| ·工作曲线、准确度及检出限 | 第44页 |
| ·干扰因素的影响 | 第44页 |
| ·次甲基蓝-重铬酸钾体系的分析应用 | 第44-45页 |
| ·次甲基蓝-重铬酸钾体系在酶活力测定中的应用 | 第45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-54页 |
| ·次甲基蓝-重铬酸钾体系的吸收光谱 | 第45-46页 |
| ·反应时间对次甲基蓝-重铬酸钾体系的影响 | 第46-48页 |
| ·次甲基蓝-重铬酸钾体系中各因素的反应条件优化 | 第48-50页 |
| ·温度对次甲基蓝-重铬酸钾体系的影响 | 第50-51页 |
| ·草酸催化反应的终止 | 第51页 |
| ·工作曲线、准确度及检出限 | 第51-52页 |
| ·干扰因素的影响 | 第52页 |
| ·分析应用 | 第52-53页 |
| ·次甲基蓝-重铬酸钾体系在酶活力测定中的应用 | 第53-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 3 草酸盐降解菌的筛选鉴定及发酵条件研究 | 第55-76页 |
| ·材料与方法 | 第55-61页 |
| ·实验材料 | 第55页 |
| ·培养基的配制 | 第55-57页 |
| ·草酸盐降解菌的分离 | 第57页 |
| ·细菌的形态观察 | 第57-58页 |
| ·菌株的鉴定与生理生化反应 | 第58页 |
| ·16SrRNA基因片断序列分析 | 第58-59页 |
| ·系统发育树分析 | 第59页 |
| ·不同种类碳源对菌体生长及产酶活力的影响 | 第59页 |
| ·不同碳源含量对菌体生长及产酶活力的影响 | 第59页 |
| ·不同种类氮源对菌体生长及产酶活力的影响 | 第59页 |
| ·不同氮源含量对菌体生长及产酶活力的影响 | 第59页 |
| ·温度对菌体生长及产酶活力的影响 | 第59-60页 |
| ·初始pH对菌体生长及产酶活力的影响 | 第60页 |
| ·接种量对菌体生长及产酶活力的影响 | 第60页 |
| ·发酵生长曲线的测定 | 第60页 |
| ·培养时间对产酶活力的影响 | 第60页 |
| ·菌体量的测定方法 | 第60页 |
| ·草酸盐含量的测定方法 | 第60页 |
| ·酶活力的测定方法 | 第60-61页 |
| ·草酸离体叶片的防病实验 | 第61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-75页 |
| ·草酸盐降解菌的分离 | 第61-62页 |
| ·生理生化特性 | 第62-65页 |
| ·16S rRNA序列分析 | 第65-67页 |
| ·不同碳源种类对菌体生长及产酶活力的影响 | 第67页 |
| ·不同碳源含量对菌体生长及产酶活力的影响 | 第67-68页 |
| ·不同氮源种类对菌体生长及产酶活力的影响 | 第68-69页 |
| ·不同氮源含量对菌体生长及产酶活力的影响 | 第69页 |
| ·温度对菌体生长及产酶活力的影响 | 第69-71页 |
| ·初始pH对菌体生长及产酶活力的影响 | 第71页 |
| ·不同接种量对菌体生长及产酶活力的影响 | 第71-72页 |
| ·发酵生长曲线的测定 | 第72-73页 |
| ·发酵时间对产酶活力的影响 | 第73页 |
| ·油菜离体叶片的防病实验 | 第73-75页 |
| ·本章小节 | 第75-76页 |
| 4 粗酶酶学性质的研究 | 第76-90页 |
| ·材料与方法 | 第76-80页 |
| ·实验材料 | 第76-77页 |
| ·培养基的配制及接种方法 | 第77页 |
| ·酶在细胞中位置的确定 | 第77-78页 |
| ·蛋白含量的测定—考马斯亮蓝法 | 第78页 |
| ·蛋白质标准曲线的绘制 | 第78页 |
| ·超声破碎时间的确定 | 第78页 |
| ·酶促反应初速度时间范围的确定 | 第78-79页 |
| ·酶活力的测定方法 | 第79页 |
| ·初始底物浓度对酶活力的影响 | 第79页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第79页 |
| ·酶的热稳定性 | 第79-80页 |
| ·pH对酶活力的影响 | 第80页 |
| ·酶的酸碱稳定性 | 第80页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第80页 |
| ·不同试剂对酶活力的影响 | 第80页 |
| ·不同浓度NaCl对酶活力的影响 | 第80页 |
| ·实验结果与讨论 | 第80-89页 |
| ·酶在细胞中位置的确定 | 第80-81页 |
| ·蛋白质标准曲线的绘制 | 第81页 |
| ·超声破碎时间的确定 | 第81-82页 |
| ·酶促反应初速度时间范围的确定 | 第82-83页 |
| ·初始底物浓度对酶活力的影响 | 第83-84页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第84页 |
| ·酶的热稳定性 | 第84-86页 |
| ·pH对酶活力的影响 | 第86页 |
| ·酶的酸碱稳定性 | 第86页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第86-87页 |
| ·不同试剂对酶活力的影响 | 第87页 |
| ·不同浓度NaCl对酶活力的影响 | 第87-89页 |
| ·本章小结 | 第89-90页 |
| 5 酶降解机理的研究 | 第90-104页 |
| ·材料与方法 | 第90-96页 |
| ·实验材料 | 第90页 |
| ·培养基的配制及接种方法 | 第90-91页 |
| ·酶降解产物的测定方法 | 第91页 |
| ·酶系组成的研究 | 第91-92页 |
| ·酶解需氧情况的研究 | 第92-93页 |
| ·可替换底物的研究 | 第93页 |
| ·产物抑制 | 第93-95页 |
| ·底物影响 | 第95-96页 |
| ·结果与讨论 | 第96-103页 |
| ·酶解产物研究 | 第96-97页 |
| ·酶系组成的研究 | 第97-99页 |
| ·酶解需氧情况研究 | 第99-100页 |
| ·可替换底物的研究 | 第100-101页 |
| ·产物抑制 | 第101-102页 |
| ·ATP、ADP对酶活力的影响 | 第102-103页 |
| ·琥珀酸钠对酶活力的影响 | 第103页 |
| ·本章小结 | 第103-104页 |
| 6 结论 | 第104-106页 |
| 1 本文实验研究总结 | 第104-105页 |
| 2 本论文的创新之处 | 第105页 |
| 3 工作展望 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-120页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
