| 本论文的创新性工作 | 第1-4页 |
| 中文摘要 | 第4-8页 |
| 英文摘要 | 第8-14页 |
| 符号说明 | 第14-24页 |
| 第一部分 文献综述 | 第24-60页 |
| 第一章 禽大肠杆菌病研究进展 | 第24-34页 |
| 1 病原学特性 | 第24-25页 |
| 2 禽大肠杆菌病的流行特点 | 第25页 |
| 3 禽病原性大肠杆菌的O血清型 | 第25-27页 |
| 4 临床类型及病理变化 | 第27-28页 |
| 5 致病机理 | 第28-29页 |
| 6 大肠杆菌的耐药性 | 第29-30页 |
| 7 诊断 | 第30页 |
| 8 防制 | 第30-34页 |
| ·一般性预防措施 | 第30-31页 |
| ·免疫预防 | 第31-32页 |
| ·灭活苗 | 第31页 |
| ·亚单位疫苗 | 第31-32页 |
| ·活菌苗 | 第32页 |
| ·微生态学防制 | 第32页 |
| ·药物防治 | 第32-34页 |
| 第二章 禽病原性大肠杆菌主要毒力因子研究进展 | 第34-60页 |
| 1 菌毛 | 第34-39页 |
| ·Ⅰ型菌毛 | 第35-38页 |
| ·Ⅰ型菌毛的特点 | 第35页 |
| ·Ⅰ型菌毛基因结构与功能 | 第35-36页 |
| ·Ⅰ型菌毛的同源性 | 第36页 |
| ·Ⅰ型菌毛在感染中的作用 | 第36-37页 |
| ·Ⅰ型菌毛蛋白免疫原性 | 第37-38页 |
| ·P型菌毛 | 第38-39页 |
| ·P型菌毛的特点 | 第38页 |
| ·P型菌毛基因结构的相关研究 | 第38页 |
| ·P型菌毛的同源性 | 第38-39页 |
| ·P型菌毛在感染中的作用 | 第39页 |
| 2 外膜蛋白(OMPs) | 第39-43页 |
| ·外膜蛋白与血清型 | 第40-41页 |
| ·外膜蛋白的免疫原性 | 第41-42页 |
| ·外膜蛋白的致病作用 | 第42-43页 |
| ·外膜蛋白与耐药性 | 第43页 |
| 3 血清抗性蛋白(Iss) | 第43-44页 |
| 4 志贺毒素(Stx) | 第44-47页 |
| ·Stx的分子结构 | 第45页 |
| ·Stx的致病机理 | 第45-47页 |
| 5 溶血素(hly) | 第47-48页 |
| 6 大肠杆菌素(ColV) | 第48-49页 |
| 7 毒力岛 | 第49-54页 |
| ·耶尔森氏菌强毒力岛(HPI) | 第50-52页 |
| ·HPI的基本特点 | 第50页 |
| ·HPI的结构与功能 | 第50-51页 |
| ·HPI在其他肠道致病菌中的分布 | 第51-52页 |
| ·肠细胞脱落位点毒力岛(LEE) | 第52-54页 |
| ·LEE的基本特点 | 第52页 |
| ·LEE的结构与功能 | 第52-54页 |
| ·eaeA在其他肠道致病菌中的分布 | 第54页 |
| 8 APEC与ExPEC | 第54-56页 |
| 9 小结 | 第56页 |
| 10 立题依据 | 第56-60页 |
| ·研究背景与意义 | 第56-57页 |
| ·本研究的立题依据与设计思路 | 第57-60页 |
| 第二部分 实验研究 | 第60-154页 |
| 第三章 规模化养鸭场鸭源致病性大肠杆菌的分离鉴定及病原特性和系统发育学分析 | 第60-80页 |
| 1 材料与方法 | 第61-66页 |
| ·材料 | 第61-63页 |
| ·病料和棉拭样品来源 | 第61页 |
| ·主要仪器设备 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61-62页 |
| ·大肠杆菌标准抗O因子血清 | 第62页 |
| ·大肠杆菌药敏标准质控菌株 | 第62页 |
| ·药敏纸片 | 第62页 |
| ·试验鸭 | 第62页 |
| ·试剂配制 | 第62-63页 |
| ·方法 | 第63-66页 |
| ·细菌分离培养 | 第63页 |
| ·革兰氏染色镜检 | 第63页 |
| ·大肠杆菌生化试验 | 第63页 |
| ·大肠杆菌O血清型鉴定 | 第63页 |
| ·药敏试验 | 第63-64页 |
| ·致病性试验 | 第64页 |
| ·16S rRNA基因序列测定与系统发育学分析 | 第64-66页 |
| 2 结果 | 第66-75页 |
| ·大肠杆菌分离培养 | 第67页 |
| ·生化试验 | 第67页 |
| ·大肠杆菌分离株O血清型鉴定 | 第67-69页 |
| ·耐药性测定 | 第69-71页 |
| ·耐药率 | 第69页 |
| ·多重耐药率 | 第69-71页 |
| ·致病性试验 | 第71-73页 |
| ·16S rRNA基因序列测定与系统发育学分析 | 第73-75页 |
| ·16S rRNA序列扩增 | 第73页 |
| ·16S rRNA的基因克隆鉴定 | 第73-74页 |
| ·16S rRNA基因序列与系统发育学 | 第74-75页 |
| 3 讨论 | 第75-78页 |
| ·关于鸭源致病性大肠杆菌的血清型 | 第75-76页 |
| ·鸭源致病性大肠杆菌的耐药性 | 第76-77页 |
| ·鸭源大肠杆菌的致病性 | 第77页 |
| ·鸭源大肠杆菌的系统发育分析 | 第77-78页 |
| 4 小结 | 第78-80页 |
| 第四章 鸭源致病性大肠杆菌外膜蛋白型研究 | 第80-96页 |
| 1 材料与方法 | 第81-83页 |
| ·菌株 | 第81页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第81-82页 |
| ·OMPs的提取 | 第82页 |
| ·OMPs的SDS-PAGE | 第82页 |
| ·优势血清型ompA基因克隆和序列分析 | 第82-83页 |
| ·引物 | 第82页 |
| ·优势血清型E.coli及其DNA的提取 | 第82页 |
| ·ompA基因的PCR扩增 | 第82-83页 |
| ·PCR扩增产物的克隆、酶切鉴定及序列测定 | 第83页 |
| ·OmpA及其推导的氨基酸序列分析 | 第83页 |
| ·疏水性分析 | 第83页 |
| 2 结果 | 第83-93页 |
| ·130个鸭致病性E.coli分离株的OMP型 | 第83-84页 |
| ·17个O93鸭致病性E.coli分离株的OMP型 | 第84页 |
| ·13个鸭致病性E.coli O78分离株的OMP型 | 第84-85页 |
| ·15个鸭致病性E.coli O92分离株的OMP型 | 第85页 |
| ·8个鸭致病性E.coli O76分离株的OMP型 | 第85页 |
| ·77个鸭致病性E.coli其他30个血清型分离株的OMP型 | 第85-88页 |
| ·ompA基因PCR扩增结果 | 第88页 |
| ·ompA基因的克隆鉴定 | 第88-89页 |
| ·OmpA序列分析 | 第89-92页 |
| ·DNA序列结构分析 | 第89页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第89-92页 |
| ·系统发育分析 | 第92-93页 |
| ·疏水性分析 | 第93页 |
| 3 讨论 | 第93-95页 |
| 4 小结 | 第95-96页 |
| 第五章 鸭源致病性大肠杆菌分离株相关毒力基因分析 | 第96-106页 |
| 1 材料与方法 | 第97-99页 |
| ·材料 | 第97页 |
| ·菌株来源 | 第97页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第97页 |
| ·方法 | 第97-99页 |
| ·DNA模板的制备 | 第97页 |
| ·毒力基因的PCR检测 | 第97-98页 |
| ·PCR产物的克隆及鉴定 | 第98-99页 |
| 2 结果 | 第99-104页 |
| ·HPI毒力岛fyuA和irp2的PCR检测 | 第99页 |
| ·fimC、papA和iss的PCR检测 | 第99-101页 |
| ·不同血清型鸭大肠杆菌病分离株HPI检出率 | 第101-102页 |
| ·irp2、fyuA、fimC、papA和iss基因的克隆与序列分析 | 第102-104页 |
| 3 讨论 | 第104-105页 |
| ·fimC和papA基因在鸭源E.coli中的分布及其公共卫生的意义 | 第104页 |
| ·iss基因与鸭E.coli致病性的关系 | 第104-105页 |
| ·HPI毒力岛与鸭E.coli致病性 | 第105页 |
| 4 小结 | 第105-106页 |
| 第六章 鸭源致病性大肠杆菌分离株志贺毒素相关基因分子流行病学研究 | 第106-116页 |
| 1 材料与方法 | 第107-109页 |
| ·材料 | 第107页 |
| ·菌株来源 | 第107页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第107页 |
| ·方法 | 第107-109页 |
| ·DNA模板的制备 | 第107-108页 |
| ·多重PCR的建立 | 第108-109页 |
| ·分子流行病学调查 | 第109页 |
| ·PCR产物的克隆及鉴定 | 第109页 |
| 2 结果 | 第109-112页 |
| ·多重PCR的建立 | 第109-111页 |
| ·PCR反应条件 | 第109-110页 |
| ·PCR 特异性检测 | 第110页 |
| ·PCR敏感性检测 | 第110页 |
| ·PCR重复性检测 | 第110-111页 |
| ·分子流行病学调查 | 第111页 |
| ·stx1、stx2、eaeA和hiyA基因的克隆与序列分析 | 第111-112页 |
| 3 讨论 | 第112-114页 |
| ·关于多重PCR方法的建立 | 第112页 |
| ·非-O157产志贺毒素大肠杆菌与HUS的关系 | 第112-113页 |
| ·动物STEC感染在公共卫生的意义 | 第113-114页 |
| 4 小结 | 第114-116页 |
| 第七章 一株致鸭腿水肿为特征的O46大肠杆菌的发现及其实验病理模型建立 | 第116-136页 |
| 1 材料与方法 | 第117-120页 |
| ·材料 | 第117-118页 |
| ·菌株来源 | 第117页 |
| ·实验动物 | 第117页 |
| ·主要仪器设备 | 第117页 |
| ·主要试剂 | 第117-118页 |
| ·大肠杆菌标准抗O因子血清 | 第118页 |
| ·方法 | 第118-120页 |
| ·培养鉴定 | 第118页 |
| ·生化鉴定 | 第118页 |
| ·大肠杆菌O血清型鉴定 | 第118页 |
| ·电镜观察 | 第118页 |
| ·药敏试验 | 第118页 |
| ·16S rRNA基因序列测定与系统发育学分析 | 第118-119页 |
| ·fyuA、irp2、fimC、iss和papA基因的PCR检测及序列测定 | 第119页 |
| ·stx1、stx2、eaeA和hlyA基因的PCR检测及序列测定 | 第119页 |
| ·实验病理模型建立 | 第119-120页 |
| 2 结果 | 第120-132页 |
| ·形态及染色 | 第120页 |
| ·生化特性 | 第120页 |
| ·血清型鉴定 | 第120页 |
| ·电镜观察 | 第120-121页 |
| ·药敏试验 | 第121页 |
| ·16S rRNA基因序列测定与系统发育学分析 | 第121页 |
| ·毒力基因的PCR检测及序列测定 | 第121页 |
| ·雏鸭人工感染大肠杆菌SYW004株的临床症状 | 第121-123页 |
| ·雏鸭人工感染大肠杆菌SYW004株的病理解剖变化 | 第123-124页 |
| ·雏鸭人工感染大肠杆菌SYW004株的组织病理学变化 | 第124-128页 |
| ·雏鸭人工感染大肠杆菌SYW004株的超微病理观察 | 第128-132页 |
| ·细菌在鸭体内的分布和所感染的细胞 | 第128页 |
| ·各器官组织的超微病理观察 | 第128-132页 |
| 3 讨论 | 第132-135页 |
| 4 小结 | 第135-136页 |
| 第八章 鸭源致病性大肠杆菌O46分离株对人工感染鸭的侵染规律研究 | 第136-154页 |
| 1 材料与方法 | 第137-139页 |
| ·材料 | 第137页 |
| ·试验菌株 | 第137页 |
| ·实验动物 | 第137页 |
| ·高免血清 | 第137页 |
| ·主要仪器设备和实验试剂 | 第137页 |
| ·方法 | 第137-139页 |
| ·动物实验及实验设计 | 第137-138页 |
| ·样品的采集 | 第138页 |
| ·间接免疫酶染色检测大肠杆菌方法的建立 | 第138-139页 |
| ·大肠杆菌感染雏鸭组织内细菌分布的动态观察检测 | 第139页 |
| 2 结果 | 第139-146页 |
| ·特异性试验 | 第139页 |
| ·间接酶标抗体染色条件的确定 | 第139-140页 |
| ·大肠杆菌感染雏鸭组织内定位及动态分布 | 第140-146页 |
| ·不同途经感染雏鸭组织内的定位及动态分布的检测结果 | 第140-146页 |
| 3 讨论 | 第146-148页 |
| ·间接免疫组化方法的建立和优化 | 第146-147页 |
| ·大肠杆菌O46分离株在组织器官的分布特点 | 第147-148页 |
| ·O46分离株感染的定位与其他APEC的比较 | 第148页 |
| ·O46分离株在肠道内的定位与鸭的其它传染病的比较 | 第148页 |
| 4 小结 | 第148-154页 |
| 第三部分 结论 | 第154-156页 |
| 参考文献 | 第156-174页 |
| 致谢 | 第174-176页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文和承担科研项目 | 第176页 |
