中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
前言 | 第9-15页 |
第一章 pGEX-PTD-rhBDNF载体构建与蛋白表达 | 第15-28页 |
一、实验材料 | 第15-17页 |
二、实验方法 | 第17-21页 |
三、实验结果 | 第21-28页 |
1.pGEX-PTD-rhBDNF质粒的构建流程 | 第21页 |
2.hBDNF基因克隆 | 第21-24页 |
3.pGEX-PTD-rhBDNF质粒的PCR扩增和酶切鉴定 | 第24页 |
4.基因测序图谱片段 | 第24-27页 |
5.聚丙烯酸胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第27页 |
6.pGEX-PTD-rhBDNF融合蛋白的western blotting | 第27-28页 |
四、讨论 | 第28页 |
第二章 计算机辅助设计PTD-BDNF基因及在E.coli中的高效表达 | 第28-44页 |
一、实验材料 | 第30-31页 |
二、实验方法 | 第31-34页 |
三、实验结果 | 第34-41页 |
1.PTD-BDNF基因设计与二级结构分析 | 第34-36页 |
2.PBV-PTD-BDNF酶切鉴定及基因测序 | 第36-37页 |
3.重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达及SDS-PAGE分析 | 第37-38页 |
4.C18反相色谱纯化PTD-rhBDNF | 第38页 |
5.PTD-rhBDNF蛋白鉴定 | 第38-41页 |
四、讨论 | 第41-44页 |
第三章 PTD-rhBDNF对Aβ25-35致海马神经元毒性的防治及跨血脑屏障作用研究 | 第44-60页 |
一、实验材料 | 第44-45页 |
二、实验方法 | 第45-49页 |
三、实验结果 | 第49-58页 |
1.PTD-rhBDNF通过细胞膜结果 | 第49-50页 |
2.PTD-rhBDNF对Aβ25-35致海马神经元损伤的保护作用 | 第50-55页 |
3.穿越血脑屏障结果 | 第55-58页 |
四、讨论 | 第58-60页 |
第四章 PTD-BDNF对Alzheimer's病模型小鼠的治疗作用 | 第60-73页 |
一、实验材料 | 第60-61页 |
二、实验方法 | 第61-63页 |
三、实验结果 | 第63-71页 |
1.PTD-BDNF对AD模型鼠病理组织形态的影响 | 第63页 |
2.PTD-BDNF对AD模型鼠老年斑形成的影响 | 第63页 |
3.PTD-BDNF对AD模型鼠海马组织中Bax和Bcl-2表达的影响 | 第63-68页 |
4.PTD-BDNF对AD模型鼠行为功能的影响 | 第68-71页 |
四、讨论 | 第71-73页 |
第五章 PTD-BDNF对帕金森病大鼠的治疗作用 | 第73-84页 |
一、实验材料 | 第73页 |
二、实验方法 | 第73-75页 |
三、实验结果 | 第75-82页 |
1.大鼠旋转行为测试结果 | 第75页 |
2.PTD-BDNF对PD模型鼠行为功能的影响 | 第75-76页 |
3.PTD-BDNF对PD模型鼠病理组织形态的影响 | 第76页 |
4.TH免疫组织化学染色结果 | 第76-79页 |
5.PTD-BDNF对6-OHDA诱导PD模型损伤Micro-PET显像结果 | 第79-82页 |
四、讨论 | 第82-84页 |
结论 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-91页 |
附录一 英文缩写 | 第91-93页 |
附录二 在学期间撰写的文章 | 第93-94页 |
附录三 文献综述 | 第94-104页 |