| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一部分 前言与综述 | 第12-23页 |
| 1 我国沙门氏菌污染分布概况 | 第12-16页 |
| ·水的污染 | 第13页 |
| ·饲料的污染 | 第13-14页 |
| ·食品的污染 | 第14-16页 |
| ·人和动物带菌 | 第16页 |
| 2 建立一种快速，准确，高效的沙门氏菌检测方法的紧迫性 | 第16-18页 |
| ·沙门氏菌中毒屡发事件 | 第16-17页 |
| ·沙门氏菌耐药状况 | 第17-18页 |
| 3 胶体金免疫层析法(GICA)原理 | 第18-19页 |
| 4 荧光定量 PCR(FQ-PCR)原理 | 第19-21页 |
| 5 GICA 与 FQ-PCR 联合检测的构想 | 第21-23页 |
| 第二部分 胶体金免疫层析法(GICA)检测沙门氏菌方法的建立 | 第23-34页 |
| 1 材料与方法 | 第23-30页 |
| ·实验菌株 | 第23页 |
| ·实验兔 | 第23页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第23-24页 |
| ·兔抗沙门氏菌多抗血清的制备 | 第24-26页 |
| ·兔抗血清的纯化 | 第26-27页 |
| ·抗体浓度的测定 | 第27页 |
| ·胶体金颗粒的制备 | 第27页 |
| ·胶体金溶液pH值的调节 | 第27-28页 |
| ·待标记抗体合适量的测定 | 第28-29页 |
| ·胶体金标记抗体 | 第29页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条的制备和包装 | 第29页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条成分最佳浓度和灵敏度的测定 | 第29页 |
| ·特异性试验 | 第29-30页 |
| ·稳定性试验 | 第30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-34页 |
| ·实验兔免疫情况 | 第30页 |
| ·抗体的效价检测和筛选处理 | 第30页 |
| ·抗体纯化效果和含量 | 第30页 |
| ·胶体金颗粒的制备结果 | 第30页 |
| ·待标记抗体的合适量 | 第30-31页 |
| ·试纸条的制备和判断方法 | 第31-32页 |
| ·试纸条的成分最佳浓度和灵敏度 | 第32-33页 |
| ·试纸条的特异性 | 第33页 |
| ·试纸条的稳定性 | 第33-34页 |
| 第三部分 荧光定量 PCR(FQ-PCR)检测沙门氏菌方法的建立 | 第34-44页 |
| 1 材料与方法 | 第34-39页 |
| ·实验菌株 | 第34页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第34页 |
| ·FQ-PCR 引物和探针的设计 | 第34-35页 |
| ·常规 PCR 方法 | 第35-36页 |
| ·细菌模板提取方法 | 第36-39页 |
| ·FQ-PCR 反应体系和条件的建立和优化 | 第39页 |
| ·FQ-PCR 的评价 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-44页 |
| ·FQ-PCR 引物和探针合成结果 | 第39-40页 |
| ·菌体总 DNA 模板提取方法选择 | 第40页 |
| ·FQ-PCR 反应体系和条件的确定 | 第40-42页 |
| ·FQ-PCR 的灵敏度 | 第42-43页 |
| ·FQ-PCR 的特异性 | 第43页 |
| ·FQ-PCR 的重复性 | 第43-44页 |
| 第四部分 胶体金免疫层析法与荧光定量 PCR 联合检测沙门氏菌的临床应用 | 第44-50页 |
| 1 材料与方法 | 第44-46页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第44页 |
| ·检测样品的种类 | 第44页 |
| ·传统检测方法 | 第44-46页 |
| ·GICA 与 FQ-PCR 联合检测方法 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-50页 |
| ·传统方法检测结果与 GICA 和 FQ-PCR 联合检测结果比较 | 第46-47页 |
| ·GICA 与 FQ-PCR 联合检测方法的应用效果 | 第47-50页 |
| 第五部分 讨论 | 第50-55页 |
| 1 胶体金的制备 | 第50-51页 |
| 2 GICA 标记抗体的选择 | 第51页 |
| 3 FQ-PCR 反应结果的影响因素 | 第51页 |
| 4 实验室核酸污染解决办法 | 第51-52页 |
| 5 临床检测样品的处理 | 第52-53页 |
| 6 GICA 与 FQ-PCR 联合检测的优势 | 第53-54页 |
| 7 不足和展望 | 第54-55页 |
| 总结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 在学期间发表的论文及荣誉 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
