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XIOsPR10基因转化水稻研究及其功能初探

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-11页
第一章 前言第11-26页
   ·植物与病原的相互作用第11页
   ·植物的抗病机制第11-13页
   ·病程相关蛋白(PR PROTEINS)与植物抗病反应第13-16页
     ·病程相关蛋白的一般特性以及分类第13-14页
     ·病程相关蛋白与系统获得抗性(SAR)第14-16页
   ·PR10 家族基因第16-21页
     ·PR10 蛋白的分类及分布第16页
     ·PR10 蛋白家族序列及结构特点第16页
     ·生物及非生物胁迫下PR10 蛋白的诱导及表达第16-18页
     ·PR10 蛋白的生物学功能第18-21页
     ·PR10 蛋白研究小结第21页
   ·RNAI 及其在植物功能基因组学中的应用第21-24页
     ·基因沉默的机制第22-23页
     ·RNAi 在植物功能基因组学研究中的应用第23-24页
   ·本研究的目的意义第24-26页
第二章 材料与方法第26-41页
   ·材料第26-28页
     ·植物材料第26页
     ·菌株和质粒第26页
     ·主要化学试剂及仪器第26-27页
     ·培养基的配制第27-28页
   ·方法第28-41页
     ·XIOsPR10 基因序列分析及引物设计第28-29页
     ·植物表达载体的构建第29-33页
     ·XIOsPR10 基因的RNAi 表达载体的构建第33页
     ·农杆菌介导的水稻遗传转化第33-35页
     ·转基因水稻检测第35-38页
     ·XIOsPR10 基因的原核表达,纯化以及抗菌实验第38-41页
第三章 结果与分析第41-56页
   ·XIOSPR10 基因序列分析第41-43页
   ·XIOSPR10 基因的获得及中间表达载体的构建和鉴定第43-44页
   ·XIOSPR10 基因植物表达载体的构建及鉴定第44-45页
   ·XIOSPR10 基因RNAI 表达载体的构建及鉴定第45-46页
   ·水稻愈伤组织的遗传转化第46-48页
   ·转基因水稻检测第48-52页
     ·组织化学染色检测第48-49页
     ·转基因植株的PCR 检测第49-50页
     ·southern 斑点杂交分析第50-51页
     ·半定量RT-PCR 法检测XIOsPR10 基因的转录水平第51-52页
   ·XIOSPR10 基因的原核表达,纯化以及抗菌实验第52-56页
     ·原核表达载体pET28a-XIOsPR10 的构建第52-53页
     ·XIOsPR10 蛋白的诱导表达及纯化第53-55页
     ·XIOsPR10 蛋白体外抑菌活性检测第55-56页
第四章 讨论第56-61页
   ·水稻XIOSPR10 基因RNAI 植物表达载体的构建第56页
   ·水稻愈伤组织的诱导及转化第56-57页
   ·转基因植株的检测第57-58页
     ·PCR 及斑点杂交检测第57页
     ·半定量RT-PCR 检测第57-58页
   ·XIOSPR10 基因的表达方式第58-59页
   ·XIOSPR10 基因的原核表达,纯化及抑菌实验第59-61页
     ·XIOsPR10 基因的原核表达及纯化第59页
     ·XIOsPR10 蛋白抑菌活性检测第59-61页
第五章 小结与展望第61-62页
参考文献第62-68页
附录:培养基及试剂的配制第68-70页
致谢第70页

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