摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
第一章 前言 | 第11-26页 |
·植物与病原的相互作用 | 第11页 |
·植物的抗病机制 | 第11-13页 |
·病程相关蛋白(PR PROTEINS)与植物抗病反应 | 第13-16页 |
·病程相关蛋白的一般特性以及分类 | 第13-14页 |
·病程相关蛋白与系统获得抗性(SAR) | 第14-16页 |
·PR10 家族基因 | 第16-21页 |
·PR10 蛋白的分类及分布 | 第16页 |
·PR10 蛋白家族序列及结构特点 | 第16页 |
·生物及非生物胁迫下PR10 蛋白的诱导及表达 | 第16-18页 |
·PR10 蛋白的生物学功能 | 第18-21页 |
·PR10 蛋白研究小结 | 第21页 |
·RNAI 及其在植物功能基因组学中的应用 | 第21-24页 |
·基因沉默的机制 | 第22-23页 |
·RNAi 在植物功能基因组学研究中的应用 | 第23-24页 |
·本研究的目的意义 | 第24-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-41页 |
·材料 | 第26-28页 |
·植物材料 | 第26页 |
·菌株和质粒 | 第26页 |
·主要化学试剂及仪器 | 第26-27页 |
·培养基的配制 | 第27-28页 |
·方法 | 第28-41页 |
·XIOsPR10 基因序列分析及引物设计 | 第28-29页 |
·植物表达载体的构建 | 第29-33页 |
·XIOsPR10 基因的RNAi 表达载体的构建 | 第33页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第33-35页 |
·转基因水稻检测 | 第35-38页 |
·XIOsPR10 基因的原核表达,纯化以及抗菌实验 | 第38-41页 |
第三章 结果与分析 | 第41-56页 |
·XIOSPR10 基因序列分析 | 第41-43页 |
·XIOSPR10 基因的获得及中间表达载体的构建和鉴定 | 第43-44页 |
·XIOSPR10 基因植物表达载体的构建及鉴定 | 第44-45页 |
·XIOSPR10 基因RNAI 表达载体的构建及鉴定 | 第45-46页 |
·水稻愈伤组织的遗传转化 | 第46-48页 |
·转基因水稻检测 | 第48-52页 |
·组织化学染色检测 | 第48-49页 |
·转基因植株的PCR 检测 | 第49-50页 |
·southern 斑点杂交分析 | 第50-51页 |
·半定量RT-PCR 法检测XIOsPR10 基因的转录水平 | 第51-52页 |
·XIOSPR10 基因的原核表达,纯化以及抗菌实验 | 第52-56页 |
·原核表达载体pET28a-XIOsPR10 的构建 | 第52-53页 |
·XIOsPR10 蛋白的诱导表达及纯化 | 第53-55页 |
·XIOsPR10 蛋白体外抑菌活性检测 | 第55-56页 |
第四章 讨论 | 第56-61页 |
·水稻XIOSPR10 基因RNAI 植物表达载体的构建 | 第56页 |
·水稻愈伤组织的诱导及转化 | 第56-57页 |
·转基因植株的检测 | 第57-58页 |
·PCR 及斑点杂交检测 | 第57页 |
·半定量RT-PCR 检测 | 第57-58页 |
·XIOSPR10 基因的表达方式 | 第58-59页 |
·XIOSPR10 基因的原核表达,纯化及抑菌实验 | 第59-61页 |
·XIOsPR10 基因的原核表达及纯化 | 第59页 |
·XIOsPR10 蛋白抑菌活性检测 | 第59-61页 |
第五章 小结与展望 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
附录:培养基及试剂的配制 | 第68-70页 |
致谢 | 第70页 |