| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 1 前言 | 第15-35页 |
| ·21 世纪将是手性技术和手性药物发展的世纪 | 第15-16页 |
| ·手性技术的发展情况 | 第16-17页 |
| ·Baeyer-Villiger 反应 | 第17-18页 |
| ·环己酮单加氧酶（CHMO） | 第18-23页 |
| ·CHMO 催化机理 | 第23-24页 |
| ·环己酮的代谢途径相关基因及CHMO 在其过程中的作用 | 第24页 |
| ·环己酮利用菌的CHMO 基因及部分其他BVMO 基因的克隆 | 第24-26页 |
| ·TYPE 1 型BVMO 的比较及底物范围的差异 | 第26-27页 |
| ·环己酮加氧酶结构与功能的研究 | 第27-28页 |
| ·利用环己酮单加氧酶的催化工艺改进 | 第28-30页 |
| ·利用环己酮单加氧酶进行天然手性物质合成或生物制药的应用--- | 第30-32页 |
| ·本论文的研究目的及意义 | 第32-35页 |
| 2 材料和方法 | 第35-54页 |
| ·材料 | 第35-42页 |
| ·基本操作 | 第42-45页 |
| ·方法 | 第45-54页 |
| 3 结果与讨论 | 第54-112页 |
| ·环己酮降解菌CN1 的筛选及功能研究 | 第54-69页 |
| ·环己酮降解菌的筛选 | 第54页 |
| ·pH，盐度，温度及环己酮浓度对CN1 生长的影响 | 第54-56页 |
| ·抗生素抗性范围 | 第56页 |
| ·CN1基因组GC含量测定 | 第56页 |
| ·CN1的碳源利用范围 | 第56-58页 |
| ·CN1对环己醇，环己酮，环戊酮的生物转化 | 第58-59页 |
| ·厌氧情况下，CN1 对环己酮的降解 | 第59-60页 |
| ·CN1 对药物中间体双环[3,2,0] -2-双键-6-酮的手性转化 | 第60页 |
| ·CN1 环己酮的诱导表达分析 | 第60-61页 |
| ·CN1 环己酮单加氧酶基因的克隆 | 第61-62页 |
| ·环己酮降解过程中中间产物的研究 | 第62-64页 |
| ·对环己酮代谢途径的推测 | 第64-66页 |
| ·CN1 上表现的其他功能 | 第66-69页 |
| ·环己酮单加氧酶基因及基因簇的克隆和功能研究 | 第69-96页 |
| ·CN1 基因组酶切及杂交 | 第69-70页 |
| ·含CHNB 的4.6k 的片段的克隆及鉴定 | 第70页 |
| ·4.6K 核酸片段上的基因排布及特点 | 第70-71页 |
| ·ChnB，ChnE，密码子使用的特点 | 第71-72页 |
| ·ChnA，ChnB 的功能验证 | 第72-74页 |
| ·CN1 基因组文库的构建 | 第74页 |
| ·CN1 基因文库的筛选与鉴定 | 第74-76页 |
| ·16C-9，16F-10 质粒的测序及整个环己酮降解基因簇的拼接 | 第76-78页 |
| ·对所获基因簇的开放编码阅读框的分析 | 第78-79页 |
| ·对所获基因簇上非编码区的分析 | 第79-81页 |
| ·CN1 环己酮加氧酶系统发育分析 | 第81-82页 |
| ·对CN1 环己酮加氧酶同源建模分析 | 第82-83页 |
| ·CHNB 蛋白模型中氨基酸位置总体特征 | 第83-85页 |
| ·九种环己酮加氧酶核心区域的建模分析 | 第85-86页 |
| ·对一条重要多肽的分析 | 第86-88页 |
| ·BVMO 反应机理的推测 | 第88-90页 |
| ·ChnB 及其缺失突变在大肠杆菌中的表达 | 第90-91页 |
| ·ChnB 与其他融合标签的共表达 | 第91-92页 |
| ·His –ChnB 包涵体的复性 | 第92-93页 |
| ·讨论 | 第93-96页 |
| ·利用5 种碳源对印度洋热液口泥样的菌群富集和单菌分离 | 第96-112页 |
| ·菌群分析 | 第96-99页 |
| ·在属的水平上对筛选的手段及结果的分析 | 第99-101页 |
| ·在富集筛选的过程中从表观发现的几株比较有特点的菌 | 第101-102页 |
| ·用GC-MS 检测55 株菌对环己酮，环己醇，环戊酮，苯乙酮的转化 | 第102-105页 |
| ·利用GC-MS 对其余61 株菌环己酮降解菌进行筛选 | 第105页 |
| ·通过southern 杂交验证环己酮降解菌中环己酮加氧酶基因的存在 | 第105页 |
| ·利用GC-MS 对19 株菌进行降解性能和降解范围的测定 | 第105-107页 |
| ·相同165 的菌在GC-MS 分析的差异 | 第107-108页 |
| ·部分菌alkB，p450 基因的克隆 | 第108-109页 |
| ·讨论 | 第109-112页 |
| 参考文献 | 第112-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
