| 摘要 | 第1-4页 |
| Summary | 第4-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-35页 |
| 猪链球菌2 型的研究进展 | 第11-26页 |
| 1 猪链球菌2 型的发现 | 第11页 |
| 2 流行病学研究 | 第11-13页 |
| 3 猪链球菌2 型的毒力因子 | 第13-15页 |
| ·荚膜多糖 | 第13页 |
| ·溶菌酶释放蛋白和胞外因子 | 第13-14页 |
| ·溶血素 | 第14-15页 |
| ·毒力相关蛋白 | 第15页 |
| 4 毒力因子的复杂性 | 第15-16页 |
| 5 协同性致病因子 | 第16-17页 |
| 6 动物模型 | 第17页 |
| 7 致病机理 | 第17-21页 |
| 8 猪链球菌的鉴定 | 第21-24页 |
| ·生化鉴定 | 第21-22页 |
| ·血清学鉴定 | 第22-23页 |
| ·分子鉴定 | 第23-24页 |
| ·多酶电泳法 | 第23页 |
| ·限制性内切酶图谱分析法 | 第23-24页 |
| ·随即扩增核酸片段多态性分析(RAPD) | 第24页 |
| ·PCR 法 | 第24页 |
| 9 预防和治疗 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-35页 |
| 第二篇 研究报告 | 第35-58页 |
| 猪链球菌2 型胞外因子基因片段的原核表达及免疫保护力试验 | 第35-56页 |
| 1 材料与方法 | 第35-49页 |
| ·菌种和质粒 | 第35页 |
| ·细菌培养 | 第35页 |
| ·兔552 阳性血清的制备 | 第35-36页 |
| ·动物免疫 | 第35页 |
| ·采血 | 第35页 |
| ·分离血清 | 第35-36页 |
| ·目的片段的选择 | 第36页 |
| ·引物的设计和合成 | 第36页 |
| ·重组克隆质粒构建 | 第36页 |
| ·目的片段的获得 | 第36-40页 |
| ·PCR 模板的制备 | 第36-38页 |
| ·目的片段的PCR 扩增及电泳 | 第38-39页 |
| ·PCR 扩增产物的回收 | 第39-40页 |
| ·目的片段的A/T 克隆与鉴定 | 第40-43页 |
| ·PCR 产物与载体pMD 18-T 的连接反应 | 第40页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| ·连接产物的转化 | 第41页 |
| ·重组克隆质粒的提取 | 第41-42页 |
| ·重组克隆质粒的鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组表达质粒的构建与鉴定 | 第43-45页 |
| ·目的片段与载体的酶切和回收 | 第43-44页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第44页 |
| ·目的片段与载体的连接转化 | 第44页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第44-45页 |
| ·重组质粒在原核细胞中的表达及检测 | 第45-47页 |
| ·最佳诱导条件筛选 | 第45页 |
| ·表达蛋白的 SDS-PAGE | 第45-46页 |
| ·Western Blot 鉴定分析 | 第46页 |
| ·GST-EF 包涵体蛋白的大量制备 | 第46-47页 |
| ·表达蛋白的免疫保护力测定 | 第47-49页 |
| ·试验动物及分组 | 第47页 |
| ·免疫及攻毒试验 | 第47-48页 |
| ·采血 | 第48页 |
| ·分离血清 | 第48页 |
| ·表达 EF 蛋白的抗体效价 | 第48-49页 |
| 2 结果 | 第49-53页 |
| ·ef 基因片段 PCR 扩增 | 第49页 |
| ·重组克隆质粒的鉴定 | 第49-50页 |
| ·PCR 鉴定 | 第49页 |
| ·酶切鉴定 | 第49页 |
| ·序列分析 | 第49-50页 |
| ·重组表达质粒鉴定 | 第50页 |
| ·电泳鉴定 | 第50页 |
| ·酶切、PCR 及测序鉴定 | 第50页 |
| ·表达产物EF 蛋白在DH5α细胞中的表达情况检测 | 第50-52页 |
| ·最佳诱导条件筛选 | 第50-52页 |
| ·Western blot 分析 | 第52页 |
| ·包涵体处理 | 第52页 |
| ·免疫保护力试验 | 第52-53页 |
| ·抗体效价 | 第53页 |
| 3 讨论 | 第53-56页 |
| ·猪链球菌2 型ef 片段的原核表达 | 第53页 |
| ·重组蛋白表达效率的影响因素 | 第53-54页 |
| ·EF 的免疫保护力 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 附录 | 第60-64页 |
| 缩写词英汉对照表 | 第64-65页 |
| 计量单位 | 第65-66页 |
| 个人简介 | 第66-67页 |
| 导师简介 | 第67-68页 |