| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-7页 |
| 第一部分 实验论文 | 第7-46页 |
| 第一章 盐芥(Thellungiella halophila)基因组文库的构建 | 第7-19页 |
| 一、实验材料与方法 | 第7-16页 |
| 1、实验材料 | 第7-9页 |
| ·植物材料 | 第7页 |
| ·菌种、质粒和噬菌体 | 第7页 |
| ·酶、药品及试剂盒 | 第7-8页 |
| ·培养基及化学试剂 | 第8页 |
| ·主要仪器设备 | 第8-9页 |
| 2 实验方法 | 第9-16页 |
| ·盐芥(Thellungiella halophila)基因组DNA的提取 | 第9-10页 |
| ·CTAB抽提法 | 第9-10页 |
| ·Dellaporta法分离总基因组DNA | 第10页 |
| ·Sau3AI酶切消化盐芥基因组DNA | 第10-11页 |
| ·浓缩酶切后的盐芥基因组DNA | 第11页 |
| ·插入基因组DNA片段的准备 | 第11-12页 |
| ·待插入DNA与λ-DNA载体的连接 | 第12-13页 |
| ·盐芥基因组DNA的包装 | 第13页 |
| ·包装蛋白的选取 | 第13页 |
| ·包装 | 第13页 |
| ·噬菌体文库滴度的测定 | 第13-15页 |
| ·试剂准备 | 第13页 |
| ·宿主菌的准备 | 第13-14页 |
| ·铺板 | 第14-15页 |
| ·盐芥基因组的扩大 | 第15-16页 |
| 二、实验结果 | 第16-19页 |
| 1.盐芥基因组DNA提取结果 | 第16-17页 |
| 2.盐芥基因组Sau3AI酶切及浓缩结果 | 第17-18页 |
| 3.酶切基因组添平处理结果 | 第18页 |
| 4.盐芥基因组文库滴度的测定 | 第18-19页 |
| ·铺板结果 | 第19页 |
| ·滴度测定结果 | 第19页 |
| 第二章:盐芥脯氨酸代谢相关基因片段(ThP5CS1、2,ThP5CDH,ThPDH,ThERD5)的克隆 | 第19-39页 |
| 一、实验材料及实验方法 | 第19-29页 |
| 1 实验材料 | 第19-21页 |
| ·植物材料 | 第19-20页 |
| ·质粒及菌种 | 第20页 |
| ·酶及化学试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器与设备 | 第20页 |
| ·质粒提取液 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·相关引物序列 | 第21页 |
| ·软件 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-29页 |
| ·RNeasy Plant Mini Kit提取植物总RNA及DNA酶消化 | 第21-22页 |
| ·RNA的定量 | 第22-23页 |
| ·RNA的反转录及cDNA模板的稀释 | 第23页 |
| ·PCR扩增ThP5CDH,ThPDH、ThERD5、ThP5CS2基因片段(探针的制备) | 第23-27页 |
| ·PCR扩增ThP5CDH基因片段 | 第23-25页 |
| ·PCR扩增ThPDH基因片段 | 第25-26页 |
| ·PCR扩增ThERD5基因片段 | 第26页 |
| ·PCR扩增ThP5CS2基因片段 | 第26-27页 |
| ·酶切得到ThP5CS1基因片段 | 第27页 |
| ·Gene Clean方法从琼脂糖凝胶上回收外源基因片段 | 第27-28页 |
| ·克隆得到的外源基因片段与载体的连接 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第28页 |
| ·质粒的提取 | 第28-29页 |
| ·PCR、酶切验证 | 第29页 |
| 二、实验结果 | 第29-35页 |
| 1 各外源基因片段的测序结果 | 第29-35页 |
| 三、讨论 | 第35-39页 |
| 第三章 盐芥脯氨酸代谢相关基因在盐芥基因组文库中的筛选 | 第39-46页 |
| 一、实验材料与方法 | 第39-42页 |
| 1 实验材料 | 第39-40页 |
| ·探针及所需文库 | 第39页 |
| ·酶及化学试剂 | 第39-40页 |
| ·质粒及菌种 | 第40页 |
| ·实验仪器及设备 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40页 |
| ·质粒提取液 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-42页 |
| ·探针的制备 | 第40页 |
| ·各种试剂的准备 | 第40页 |
| ·噬菌体基因组文库的筛选 | 第40-42页 |
| 二、实验结果 | 第42-44页 |
| 三、讨论 | 第44-45页 |
| 1 盐芥基因组文库构建对盐芥基因功能研究有重要的意义 | 第44-45页 |
| 2 文库构建过程中遇到的问题及解决方案 | 第45页 |
| 四、后续工作 | 第45-46页 |
| 第二部分:文献综述 | 第46-66页 |
| 1 盐芥(Thellungiella halophila)—新型耐盐模式植物 | 第46-50页 |
| 2 活性氧的产生和清除机制 | 第50-64页 |
| ·氧的活化 | 第50-51页 |
| ·活性氧的产生位点及相应的降低活性氧产生的机制 | 第51-55页 |
| ·活性氧的清除机制 | 第55-64页 |
| ·活性氧的酶促清除机制 | 第55-60页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD) | 第55-56页 |
| ·抗坏血酸过氧化物酶(APX) | 第56-57页 |
| ·过氧化氢酶(CAT) | 第57-58页 |
| ·过氧还蛋白(peroxidoxin,Prx) | 第58-60页 |
| ·非酶促清除机制 | 第60-64页 |
| ·抗坏血酸(Asc) | 第60-61页 |
| ·谷胱甘肽 | 第61-62页 |
| ·生育酚 | 第62页 |
| ·类胡萝卜素 | 第62-64页 |
| 3 结论和展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
