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菜粉蝶颗粒体病毒hel和sod基因的克隆、转录和表达研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 前言第8-19页
   ·昆虫杆状病毒研究进展第8-16页
     ·昆虫杆状病毒的分类第8页
     ·已测定全序列的昆虫杆状病毒第8-10页
     ·昆虫杆状病毒的应用第10-11页
       ·昆虫杆状病毒表达载体第10页
       ·重组病毒杀虫剂第10-11页
     ·昆虫杆状病毒的功能基因第11-16页
       ·与病毒复制有关的基因第11-13页
       ·与病毒DNA表达调节有关的基因第13-14页
       ·与辅助功能有关的基因第14-15页
       ·与病毒结构有关的基因第15-16页
       ·与抗细胞凋亡有关的基因第16页
   ·菜粉蝶颗粒体病毒的研究进展第16-18页
     ·菜粉蝶发生及危害情况第16-17页
     ·已鉴定的菜粉蝶颗粒体病毒功能基因第17-18页
       ·颗粒体蛋白(Granulin)第17页
       ·晚期表达因子lef-8、lef-9及ac22-like protein、polyhedrin/granulin第17-18页
   ·本研究的目的及意义第18-19页
第二章 材料与方法第19-32页
   ·材料第19-20页
     ·菜粉蝶颗粒体病毒第19页
     ·菌株与质粒第19页
     ·培养基及菌株培养条件第19页
       ·培养基配置第19页
       ·菌株培养条件第19页
     ·抗生素配制第19-20页
     ·酶、化学试剂第20页
   ·病毒接种第20页
     ·无病毒菜粉蝶群落的建立第20页
     ·病毒纯化和接种第20页
   ·常规分子生物学操作方法第20-32页
     ·总RNA的提取第20-21页
       ·异硫氰酸胍变性法第20-21页
       ·Trizol法第21页
     ·凝胶电泳第21-22页
     ·PCR反应体系第22页
     ·菜粉蝶颗粒体病毒hel RACE第22-24页
       ·hel 3’RACE第22-23页
       ·hel 5’RACE第23-24页
     ·菜粉蝶颗粒体病毒sod RACE第24-25页
     ·从凝胶中回收目的DNA片段第25-26页
     ·DNA连接反应第26页
     ·质粒DNA的转化第26-27页
       ·甘油法快速制备E.coli的感受态细胞第26页
       ·RbCl_2制备大肠杆菌感受态细胞第26-27页
       ·质粒DNA的电脉冲转化第27页
       ·质粒DNA的热冲击转化第27页
     ·质粒DNA的提取第27-28页
     ·内切酶反应第28页
     ·荧光定量PCR(quantitative real-time PCR)第28-29页
     ·粉蝶颗粒体病毒sod原核表达第29-32页
第三章 PiraGV hel基因第32-48页
   ·结果与分析第32-46页
     ·PiraGV hel基因的定位与克隆第32页
     ·感染了PiraGV的宿主总RNA的浓度及质量第32-33页
     ·PiraGV hel RACE第33-35页
     ·PiraGV hel全长cDNA序列及推导的氨基酸序列第35-38页
     ·PiraGV hel氨基酸同源性比较第38-44页
     ·PiraGV hel系统进化树分析第44-45页
     ·PiraGV hel转录的荧光定量PCR分析第45-46页
   ·讨论第46-48页
第四章 PiraGV sod基因第48-57页
   ·结果与分析第48-55页
     ·PiraGV sod基因克隆与定位第48页
     ·PiraGV sod 3′RACE和5′RACE第48-50页
     ·PiraGV sod全长cDNA序列及氨基酸序列第50-51页
     ·PiraGV SOD氨基酸同源性比较第51-53页
     ·PiraGV sod转录的荧光定量PCR的分析第53-54页
     ·SOD原核表达第54-55页
   ·讨论第55-57页
参考文献第57-67页
附录1 缩略词及中文对照第67-68页
附录2 常用培养基、溶液及其配制第68-69页
附录3 实验中用到的主要仪器第69-70页
致谢第70-71页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第71页

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