摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
第一章 前言 | 第8-19页 |
·昆虫杆状病毒研究进展 | 第8-16页 |
·昆虫杆状病毒的分类 | 第8页 |
·已测定全序列的昆虫杆状病毒 | 第8-10页 |
·昆虫杆状病毒的应用 | 第10-11页 |
·昆虫杆状病毒表达载体 | 第10页 |
·重组病毒杀虫剂 | 第10-11页 |
·昆虫杆状病毒的功能基因 | 第11-16页 |
·与病毒复制有关的基因 | 第11-13页 |
·与病毒DNA表达调节有关的基因 | 第13-14页 |
·与辅助功能有关的基因 | 第14-15页 |
·与病毒结构有关的基因 | 第15-16页 |
·与抗细胞凋亡有关的基因 | 第16页 |
·菜粉蝶颗粒体病毒的研究进展 | 第16-18页 |
·菜粉蝶发生及危害情况 | 第16-17页 |
·已鉴定的菜粉蝶颗粒体病毒功能基因 | 第17-18页 |
·颗粒体蛋白(Granulin) | 第17页 |
·晚期表达因子lef-8、lef-9及ac22-like protein、polyhedrin/granulin | 第17-18页 |
·本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-32页 |
·材料 | 第19-20页 |
·菜粉蝶颗粒体病毒 | 第19页 |
·菌株与质粒 | 第19页 |
·培养基及菌株培养条件 | 第19页 |
·培养基配置 | 第19页 |
·菌株培养条件 | 第19页 |
·抗生素配制 | 第19-20页 |
·酶、化学试剂 | 第20页 |
·病毒接种 | 第20页 |
·无病毒菜粉蝶群落的建立 | 第20页 |
·病毒纯化和接种 | 第20页 |
·常规分子生物学操作方法 | 第20-32页 |
·总RNA的提取 | 第20-21页 |
·异硫氰酸胍变性法 | 第20-21页 |
·Trizol法 | 第21页 |
·凝胶电泳 | 第21-22页 |
·PCR反应体系 | 第22页 |
·菜粉蝶颗粒体病毒hel RACE | 第22-24页 |
·hel 3’RACE | 第22-23页 |
·hel 5’RACE | 第23-24页 |
·菜粉蝶颗粒体病毒sod RACE | 第24-25页 |
·从凝胶中回收目的DNA片段 | 第25-26页 |
·DNA连接反应 | 第26页 |
·质粒DNA的转化 | 第26-27页 |
·甘油法快速制备E.coli的感受态细胞 | 第26页 |
·RbCl_2制备大肠杆菌感受态细胞 | 第26-27页 |
·质粒DNA的电脉冲转化 | 第27页 |
·质粒DNA的热冲击转化 | 第27页 |
·质粒DNA的提取 | 第27-28页 |
·内切酶反应 | 第28页 |
·荧光定量PCR(quantitative real-time PCR) | 第28-29页 |
·粉蝶颗粒体病毒sod原核表达 | 第29-32页 |
第三章 PiraGV hel基因 | 第32-48页 |
·结果与分析 | 第32-46页 |
·PiraGV hel基因的定位与克隆 | 第32页 |
·感染了PiraGV的宿主总RNA的浓度及质量 | 第32-33页 |
·PiraGV hel RACE | 第33-35页 |
·PiraGV hel全长cDNA序列及推导的氨基酸序列 | 第35-38页 |
·PiraGV hel氨基酸同源性比较 | 第38-44页 |
·PiraGV hel系统进化树分析 | 第44-45页 |
·PiraGV hel转录的荧光定量PCR分析 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
第四章 PiraGV sod基因 | 第48-57页 |
·结果与分析 | 第48-55页 |
·PiraGV sod基因克隆与定位 | 第48页 |
·PiraGV sod 3′RACE和5′RACE | 第48-50页 |
·PiraGV sod全长cDNA序列及氨基酸序列 | 第50-51页 |
·PiraGV SOD氨基酸同源性比较 | 第51-53页 |
·PiraGV sod转录的荧光定量PCR的分析 | 第53-54页 |
·SOD原核表达 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-67页 |
附录1 缩略词及中文对照 | 第67-68页 |
附录2 常用培养基、溶液及其配制 | 第68-69页 |
附录3 实验中用到的主要仪器 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第71页 |