| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 主要英文缩写词 | 第8-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述：HLAI 类分子异常表达与肿瘤免疫逃逸机制的研究进展 | 第14-20页 |
| 第二章 肝癌组织中 HLAI 类抗原及相关分子表达的研究 | 第20-30页 |
| 前言 | 第20页 |
| 1 实验材料 | 第20-21页 |
| ·肝癌组织样本 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| 2 方法 | 第21-22页 |
| ·切片处理 | 第21页 |
| ·操作步骤 | 第21页 |
| ·判断标准 | 第21-22页 |
| ·统计学分析 | 第22页 |
| 3 结果 | 第22-27页 |
| ·165 例原发性肝癌石蜡组织的临床资料 | 第22-26页 |
| ·染色结果 | 第26-27页 |
| ·统计软件分析HLA 各分子表达情况与病理分级的相关性 | 第27页 |
| 4 讨论 | 第27-30页 |
| 第三章 肝癌细胞系中HLA 表达改变的分子机制研究 | 第30-56页 |
| 前言 | 第30-31页 |
| 第一节 肝癌细胞系、癌旁细胞系以及正常肝细胞系HLA I 类抗原及相关分子的表达情况的研究 | 第31-37页 |
| 1 材料 | 第31页 |
| ·肝癌细胞系 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| 2 方法 | 第31-33页 |
| ·细胞培养与流式细胞仪检测 | 第31页 |
| ·细胞总RNA 提取纯化与荧光定量 | 第31-33页 |
| 3 结果 | 第33-36页 |
| ·肝癌细胞系，癌旁肝细胞系及正常肝细胞系表面HLA I类复合物表达情况 | 第33-34页 |
| ·荧光定量PCR检测HLA I类抗原及其相关分子的表达 | 第34-36页 |
| 4 讨论 | 第36-37页 |
| 第二节 肝癌细胞系中HLA I 类抗原及相关分子表达水平分析 | 第37-42页 |
| 1 材料 | 第37页 |
| ·肝癌细胞系 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| 2 方法 | 第37-39页 |
| ·细胞培养与流式细胞仪检测 | 第37页 |
| ·细胞总RNA 提取纯化与半定量RT- | 第37-38页 |
| ·Northern | 第38页 |
| ·细胞总蛋白的提取定量和Western | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-41页 |
| ·肝癌细胞表面HLA I 类复合物的表达 | 第39页 |
| ·肝癌细胞中HLA I 类分子抗原加工递呈各分子mRNA 水平的表达 | 第39-41页 |
| ·细胞系中HLA -A 重链蛋白水平的表达 | 第41页 |
| 4 讨论 | 第41-42页 |
| 第三节 肝癌细胞系中HLA-A 重链表达上调分子机制 | 第42-50页 |
| 1 材料 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-44页 |
| ·Luciferase assay 检测肝癌细胞系中HLA-A 重链启动子活性 | 第42-43页 |
| ·EMSA 检测与ISRE 结合的转录因子 | 第43-44页 |
| ·半定量RT-PCR 与Western | 第44页 |
| ·构建IRF-1 全长质粒，转入肝癌细胞系中瞬时表达 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-47页 |
| ·HLA-A 重链启动子区域各顺式作用序列活性检测 | 第44-45页 |
| ·EMSA 检测顺式作用序列ISRE 在肝癌细胞系中结合的转录因子 | 第45-46页 |
| ·转录因子IRF-1 在肝癌细胞系与肝癌组织中的表达量 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 第四节 肝癌细胞系BEL7404 中HLA I 类分子表达下调的分子机制研究 | 第50-56页 |
| 1 材料 | 第50页 |
| ·肝癌细胞系 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| 2 方法 | 第50页 |
| 3 结果 | 第50-54页 |
| ·肝癌细胞BEL7404 表面HLA I 类复合物的表达 | 第50-51页 |
| ·肝癌细胞BEL7404 中HLA I 类分子抗原加工递呈各分子的表达 | 第51-52页 |
| ·通过转染LMP2 和LMP7 恢复肝癌细胞BEL7404 表面HLA I 类分子的表达 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 作者简介 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
